磁性カラムを用いたウイルス導入用Magnetofection試薬 Viro-MICST

Viro-MICST reagentはI-MICST（Integrated Magnetic Immuno-cell Sorting and Transfection / Transduction）テクノロジーに最適化された、Magnetofection技術を用いた新しいナノ粒子試薬です。Miltenyi社製MACS column、Magnetic separator、目的細胞に特異的な抗体が標識されたMagnetic microbeadsと組み合わせて使用します。磁気ビーズによる目的細胞の分離とMagnetofectionを組み合わせたため、感染多重度（MOI：multiplicity of infection）が低い場合でも、高い効率での導入を可能にしました。

※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

※本製品は単独では使用できません。上記のMiltenyi社製品および抗体標識Magnetic microbeadsを別途ご用意下さい。
※MACS^（R）はMiltenyi社の登録商標です。

目的細胞には、特異的な抗体で標識されたMagnetic microbeadsを結合させる。Viro-MICSTを結合させたウイルス粒子と、Magnetic microbeadsを結合させた細胞を、MACS column中でインキュベートすることで、目的細胞が分離され、同時にウイルスと細胞が会合することにより、ウイルスが細胞に感染します。

1. ウイルス粒子とViro-MICSTをピペッティングにより混合し、血清フリーの培地を加えた後、室温で20分インキュベートする。
2. Cell separation columnにウイルス粒子とViro-MICSTの混合を加え、column中のマトリックス（スフィア）に十分拡散させ、Cell separation columnをMagnetic separatorにセットする。
3. Cell separation columnにMagnetic microbeadsを結合させた目的細胞を加え、column中のマトリックスに十分拡散させた後、columnを培地で洗浄し、室温で30分インキュベートする。
4. Cell separation columnをMagnet separatorから外し、細胞をcolumnから流出させる。

eGFP遺伝子が組み込まれたレンチウイルスについて、それぞれのMOIのものを用いて1×10⁶のhUC-MSC細胞に導入し、3日後の遺伝子発現効率をフローサイトメトリー解析により比較した。hUC-MSC細胞には、抗CD105抗体標識Magnet microbeadsを結合させた。

eGFP遺伝子が組み込まれたレンチウイルスをhCB-HSC細胞に導入し、3日後の遺伝子導入効率をフローサイトメトリー解析により比較した。hCB-HSC細胞には、抗CD105抗体標識Magnet microbeadsを結合させた。細胞：1.5×10⁵ cells/ml、MOI：10