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酵素ポリマー法による免疫多重染色システム MACH 2 Double Stain Polymer Detection Reagent

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:5559

BIOCARE Medical社が独自に開発した酵素マイクロポリマーMACH 2を用いた、免疫組織二重染色用の試薬です。マウス由来、ウサギ由来の各一次抗体に対するMACH 2 Polymer二次抗体があらかじめ混合されており、1枚の試料スライド上にある2種類の一次抗体と同時に反応させることができます。

MACH 2 Polymerとは

MACH 2 Polymerは、BIOCARE Medical社が独自に開発した酵素マイクロポリマーです。酵素マイクロポリマーMACH 2を結合した二次抗体により、迅速かつ高感度な免疫染色が可能です。

  • デキストランを骨格とした酵素に比べ、MACH 2 Polymerはポリマーを骨格としたコンパクトな構造のため、染色強度が高くなっています(核の染色強度:3~4倍、細胞質および細胞表面の染色強度:2倍)。
  • 1液組成の1ステップ染色法を採用しており、非常に短時間で簡便に染色できます。
  • 検出系にビオチンを使用しないため、高感度かつ低バックグラウンドの免疫組織染色が可能です。
  • HRP(ペルオキシダーゼ)またはAP(アルカリホスファターゼ)で標識されています。
  • ホルマリン固定/パラフィン包埋ヒト組織切片で使用できます。

腎臓組織の筋肉アクチン染色像

腎臓組織の筋肉アクチン染色像

左:内因性ビオチンのブロッキング処理を行わずにABC法で染色した。動脈周辺に内因性ビオチンによるバックグラウンド染色(茶色)が見られる。
右:MACH 2で染色した。バックグラウンド染色が低く抑えられている。

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特長

  • マウス由来一次抗体およびウサギ由来一次抗体を同時に検出できる、二重染色用の試薬です。
  • 検出系はHRPとAPの組み合わせとなります。非常に高感度な染色が可能です。
  • 一次抗体反応から発色までの操作は4ステップで、非常にシンプルです。2時間以内に染色が完了します。
  • 内因性ビオチンのブロッキング操作は不要です。
  • 自動染色装置(オートステイナー)にも対応しています。
  • MACH 2 Polymerはそれぞれ単独でも購入できます。詳細については「MACH 1/2/3/4 Polymer Detectionシリーズ 」をご覧下さい。

発色基質や対比(核)染色液は含まれていません。各酵素に対応した基質や、対比染色液(下記参照)をご用意下さい。

商品コードBRR523BRR525
一次抗体マウスウサギマウスウサギ
検出系APHRPHRPAP

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操作方法概略

前処理(共通)

手順項目操作使用する試薬など時間
1内因性酵素ブロッキングインキュベーション・Peroxidazed 15分
2抗原賦活化加熱/加圧処理・DivaまたはReveal Decloaker
Decloaking Chamber NxGen
3非特異タンパク質ブロッキングインキュベーション・Background Punisherなど5~10分

必要に応じて行って下さい。

迅速二重染色プロトコル

手順項目操作使用する試薬など時間
4一次抗体反応インキュベーション・マウス抗体、ウサギ抗体のカクテル30~45分
5二次抗体反応インキュベーション・MACH 2 Double Stain Polymer20~30分
6発色基質反応(1)インキュベーション・Betazoid DAB など5分
7発色基質反応(2)インキュベーション・Vulcan Fast Redなど5~7分
8対比染色インキュベーション・Hematoxylin、Bluing Solutionなど1分

迅速三重染色プロトコル

URO-3 Triple Stain(BCM社:#APR370TSAA)を使用する際のプロトコル例です。

手順項目操作使用する試薬など時間
4一次抗体反応インキュベーション・抗CD44+抗p53抗体カクテル30分
5二次抗体反応インキュベーション・MACH 2 Double Stain Polymer #130分
6発色基質反応(1)インキュベーション・Betazoid DAB など5分
7発色基質反応(2)インキュベーション・Ferangi Blueなど5分
8変性処理インキュベーション・Denaturing Solution3分
9一次抗体反応インキュベーション・抗CK20抗体20~30分
10二次抗体反応インキュベーション・MACH 2 Mouse AP-Polymer20~30分
11発色基質反応(3)インキュベーション・Vulcan Fast Redなど10~15分
12対比染色インキュベーション・Hematoxylin

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免疫染色例

メラノーマの免疫染色像

メラノーマの免疫染色像

Pan Melanoma+Ki-67抗体カクテル(抗MART-1抗体、抗Tyrosinase抗体、抗Ki-67抗体、#APR362DS)とMACH 2 Double Stain Polymer Detection Reagent #1を用いて、メラノーマを染色した。
抗Ki-67抗体:茶(DAB染色)
抗MART-1抗体、抗Tyrosinase抗体:赤(Fast Red 染色)

前立腺組織の免疫染色像

前立腺組織の免疫染色像

PIN-4抗体カクテル(抗サイトケラチン5/14抗体、抗p63抗体、抗P504S抗体、#PPM225DS)とMACH 2 Double Stain Polymer Detection Reagent #2を用いて、前立腺がんおよび前立腺上皮内腫瘍を染色した。
抗CK5/14抗体、抗p63抗体:茶(DAB染色)
抗P504S抗体:赤(Fast Red染色)

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価格

[在庫・価格 :2024年04月25日 20時55分現在]

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Double Stain Polymer Detection Reagent #1, Mouse-AP+Rabbit-HRP, MACH 2 (6ml) <MACH 2 Double Stain 1>
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マウスおよびウサギ由来一次抗体検出用二重染色試薬。内容:MACH 2 Double Stain 1 Polymer, Mouse-AP + Rabbit-HRP,Biocareコード:MRCT523G
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掲載カタログ ニュース2018年7月1日号 p.9
ニュース2018年2月15日号 p.26

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マウスおよびウサギ由来一次抗体検出用二重染色試薬。内容:MACH 2 Double Stain 1 Polymer, Mouse-AP + Rabbit-HRP,Biocareコード:MRCT523H
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マウスおよびウサギ由来一次抗体検出用二重染色試薬。内容:MACH 2 Double Stain 2 Polymer, Mouse-HRP + Rabbit-AP,Biocareコード:MRCT525L
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Double Stain Polymer Detection Reagent #1, Mouse-AP+Rabbit-HRP, MACH 2 (6ml) <MACH 2 Double Stain 1>

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組織染色用の内在性ペルオキシダーゼ活性ブロッキング試薬。過酸化水素/メタノール溶液と比較して安全性が高く,低毒性の安定化剤含有過酸化水素溶液。Ready-to-useで,特に赤血球ペルオキシダーゼ活性のブロッキングに有用。Biocareコード:PX968H
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2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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組織染色,ELISA,金コロイド標識試薬を用いた電子顕微鏡観察を行う際に問題となるバックグラウンドシグナルを抑制するための,カゼインベースのブロッキング試薬。組換え体タンパク質を含む。血清フリー。Biocareコード:BS966L
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2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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組織・細胞染色用の対比染色液(Ready-to-use)。核を青紫色に染色する。自動染色システムに使用可能。
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ヘマトキシリンで染色した組織切片用のブルーイング溶液(青み剤)。核は鮮青色を呈する。パラフィン包埋切片および凍結切片のいずれにも使用可能。Biocareコード:HTBLU-M
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説明文 組織染色用の内在性ペルオキシダーゼ活性ブロッキング試薬。過酸化水素/メタノール溶液と比較して安全性が高く,低毒性の安定化剤含有過酸化水素溶液。Ready-to-useで,特に赤血球ペルオキシダーゼ活性のブロッキングに有用。Biocareコード:PX968H
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Denaturing Solution, Elution Step

文献数: 0

説明文 MACH 2 HRP/AP Polymer Detection Kitシリーズを用いて多重染色を行う際に使用する。各染色の交差反応を防ぐ。Biocareコード:DNS001L
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CAT Hematoxylin

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説明文 組織・細胞染色用の対比染色液(Ready-to-use)。核を青紫色に染色する。Biocareコード:CATHE-M
別包装品 別包装品あり
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保存条件 室温 法規備考
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CAT Hematoxylin

文献数: 0

説明文 組織・細胞染色用の対比染色液(Ready-to-use)。核を青紫色に染色する。Biocareコード:CATHE-MM
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 室温 法規備考
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CAT Hematoxylin

文献数: 0

説明文 組織・細胞染色用の対比染色液(Ready-to-use)。核を青紫色に染色する。Biocareコード:CATHE-GL
別包装品 別包装品あり
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保存条件 室温 法規備考
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Tacha's Auto Hematoxylin

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説明文 組織・細胞染色用の対比染色液(Ready-to-use)。核を青紫色に染色する。自動染色システムに使用可能。
法規制等
保存条件 室温,暗所保存 法規備考
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Tacha's Bluing Solution, Ready-to-use

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説明文 ヘマトキシリンで染色した組織切片用のブルーイング溶液(青み剤)。核は鮮青色を呈する。パラフィン包埋切片および凍結切片のいずれにも使用可能。Biocareコード:HTBLU-M
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Tacha's Bluing Solution, 10×

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  • 商品コード:BRRHTBLUX-M
  • メーカー:BCM
  • 包装:500ml
  • 本製品は製品内容等が変更されました 変更先製品

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抗原賦活化装置

高性能な免疫組織染色用の抗原賦活化装置: 「Decloaking Chamber NxGen」 ⇒ 詳細は>こちら

抗原賦活化装置Decloaking Chamber NxGen

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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