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ヒト多能性幹細胞を心筋細胞へ分化させるキット StemXVivo Cardiomyocyte Differentiation Kit

掲載日情報:2018/07/19 現在Webページ番号:53138

ヒト多能性幹細胞から心筋細胞への分化に有用な培地添加物や基質などのセットです。高品質な特殊培地と最大の分化効率、着実かつ信頼性の高い心筋細胞を樹立できる調製済分化誘導カクテルを使用することで、分化の時間とコストが削減できます。またStemXVivo Cardiomyocyte Maintenance Media Supplementの使用により、ヒト多能性幹細胞由来の心筋細胞の培養の延長や、健全な心筋細胞を長期間保持することができます。

特長

  • 最適化された組成により、高密度の心筋細胞を得ることができます。
  • 再現性の高い分化方法により、時間とコストを削減することができます。
  • 心筋細胞分化を標準化することで、高い作業効率が得られます。
  • 分化効率の確認用の抗体が含まれています。
  • 薬物毒性と小分子スクリーニングに有用です。
  • 24ウェルプレート2枚分相当の試薬が含まれています。
分化細胞

新キット(#SC032B)を用いた多能性幹細胞からiPSC分化の効率

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操作方法概略

(例) BG01Vヒト幹細胞(hES)(培養:MEF Conditioned Media (#AR005)、24ウェル培養皿とフタ使用時)

細胞種や培養条件が異なる場合には、別途条件検討が必要となります。ご留意下さい。

操作方法概略
  1. Stem Cell Qualified RGF BME, Pathclear (RGF BME)でプレートをコートし、室温で1~2時間培養する。
  2. FGF basic含有MEF培地に懸濁したヒト多能性幹細胞を接種し、細胞密度が80~90%になるまで培養する。
  3. 氷冷したRGF BME(1:60季釈)を含む新しい幹細胞培養用培地に交換し、37℃、5%CO2で18~24時間培養する。
  4. 分化0日目:氷冷したRGF BME(1:60季釈)を含む新しい幹細胞培養用培地に交換し、37℃、5%CO2で24時間培養する。
  5. 分化1日目:培地をDay 1分化用培地に交換し、37℃、5%CO2で4日間培地交換なしで培養する。
  6. 分化5日目:培地をDay 5分化用培地に交換し、37℃、5%CO2で2日間培地交換なしで培養する。
  7. 分化7日目:培地をCardiomyocyte Differentiation Base MediaⅠに交換し、37℃、5%CO2で培養し、必要に応じて1~2日毎に培地を交換する。
  8. 分化12日目:培地をCardiomyocyte Differentiation Base Media Ⅱに交換し、37℃、5%CO2で培養し、必要に応じて1~2日毎に培地を交換する。

各培地の調製方法については、製品データシートをご覧下さい。

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使用例

多能性幹細胞から心筋細胞への分化

JOY6(左図)およびiBJ6(右図)ヒトiPS細胞を本製品(#SC032B)を用いて心筋細胞に分化させた。収縮細胞の目視による比較とは別に、本製品に含まれる抗ヒト心臓トロポニンT抗体でラベルすることで心筋細胞との評価を行なった。

ヒトiPS細胞を心筋細胞へ分化

細胞をNorthernLight 557標識ロバ抗マウス二次抗体(#NL007;赤色)で、核をDAPI(青色)で対比染色を行なった免疫染色像。

ヒト多能性幹細胞を心筋細胞へ分化するキット ヒト多能性幹細胞を心筋細胞へ分化させるキット

細胞をPE標識抗マウス二次抗体(#F0102B)で染色し(青色ヒストグラム)、フローサイトメトリーを行なった。茶色ヒストグラムは、アイソタイプコントロールを示す。

Endothelin-1で誘導したAtrial Natriuretic Peptideの発現

Endothelin-1で誘導

JOY6ヒトiPCSを本製品(#SC032B)で心筋細胞に分化させた。分化21日後に、心臓肥大を誘導するために心筋細胞を5 nM Endothelin-1 (#1160)で25.5時間処理した。心臓肥大中に濃度が上昇するPro-Atrial Natriuretic peptide (ANP)濃度を検出した。Endothelin-1処理細胞で、Pro-ANPが増加したことが示された。
(A):ウエスタンブロット像、(B):ELISA (Human NTProANP Quantikine ELISA(#DANP00))の測定値

■Techniques for High Throughput Cardiotoxicity Studies Using Human Stem Cell-Derived Cardiomyocytes

StemXVivo Cardiomyocyte Differentiation Kitを用いた、ヒト多能性幹細胞から心筋細胞への分化誘導実験をまとめたポスターです。
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動画

Small Molecules Modulate Stem Cell-derived Cardiomyocytes



Synchronized Contractile Beating of iPSC-Derived Cardiomyocytes.
Cardiomyocytes were differentiated from JOY1 human induced pluripotent stem cells using the StemXVivo Cardiomyocyte Differentiation Kit. Waves of beating cardiomyocytes were visualized using brightfield microscopy.



iPSC-Derived Cardiomyocyte Contractions Visualized Using the Calcium Indicator, Fluo-4.

iPSC-Derived Cardiomyocyte Contractions Visualized Using the Calcium Indicator, Fluo-4.
Cardiomyocytes were differentiated from JOY1 human induced pluripotent stem cells using the reagents and protocol provided in this kit. They were assessed for their ability to contract using the Fluo-4 calcium binding assay.



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キット内容

  • Stem Cell Qualified RGF BME, Pathclear (RGF BME)
  • Cardiomyocyte Differentiation Base Media Supplement Ⅰ
  • Cardiomyocyte Differentiation Base Media Supplement Ⅱ
  • Cardiomyocyte Differentiation Cocktail Ⅰ
  • Cardiomyocyte Differentiation Cocktail ⅡA
  • Cardiomyocyte Differentiation Cocktail ⅡB
  • Cardiomyocyte Differentiation Cocktail Ⅲ
  • Anti-Human Cardiac Troponin T

[在庫・価格 :2024年05月30日 20時55分現在]

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StemXVivo Cardiomyocyte Differentiation Kit
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法規制等 カルタヘナ該当品
保存条件 法規備考
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StemXVivo Cardiomyocyte Differentiation Kit

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  • 商品コード:SC032B
  • メーカー:RSD
  • 包装:1kit
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多能性幹細胞由来の心筋細胞の培養時間延長に最適な培地添加物
StemXVivo Cardiomyocyte Maintenance Media Supplement

特長

  • 多能性幹細胞由来の心筋細胞の培養時間延長に最適化しています。
  • 健全な心筋細胞集団を200日以上保持します。
  • 栄養豊富な無血清の添加剤です。
  • ロット間差が少ないため、実験誤差を低減します。

[在庫・価格 :2024年05月30日 20時55分現在]

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詳細 商品名
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StemXVivo Cardiomyocyte Maintenance Media Supplement (50X)
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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多能性幹細胞由来の心筋細胞の培養時間延長に最適化された無血清の添加物。
法規制等
保存条件 -20℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ 細胞培養・再生医療研究カタログ2021-2022 p.34

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[在庫・価格 :2024年05月30日 20時55分現在]

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StemXVivo Cardiomyocyte Maintenance Media Supplement (50X)

文献数: 0

説明文 多能性幹細胞由来の心筋細胞の培養時間延長に最適化された無血清の添加物。
法規制等
保存条件 -20℃,暗所保存 法規備考
掲載カタログ 細胞培養・再生医療研究カタログ2021-2022 p.34

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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