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アシル化/非アシル化グレリン測定キット(Bertin Bioreagent社) Ghrelin ELISA Kit シリーズ(Acylated / Unacylated)

掲載日情報:2021/01/20 現在Webページ番号:4641

ヒトおよびラットの血漿中のグレリン(Ghrelin)をサンドイッチ法により短時間で比色定量するELISAキットです。
グレリンは末梢循環器系において、アシル化型および非アシル化型の2種類が存在し、それぞれに特異的なELISAキットをご選択いただけます。

グレリンとは

グレリンの機能について

グレリン(Ghrelin)は、食事摂取を促すシグナルであり、肥満や神経性食欲不振症などの摂食障害の治療標的と考えられています。グレリンは、GH分泌促進物質レセプターの内因性リガンドとしてラットの胃で同定されました。主に胃で産生されますが、他の多くの臓器でも見られます。グレリンは、GH放出特性とそれ自身の作用に加えて、胃の運動性(ペプチドホルモンのモチリンと類似)、酸性分泌、心臓血管作用、抗増殖作用、膵臓およびグルコース代謝機能、および睡眠に影響を与えるホルモンとして作用する可能性があります。グレリン遺伝子は、前駆体117アミノ酸のプレプログレリン(Prepro-ghrelin)のmRNAを生じ、これが28アミノ酸(ヒト)に加工されて分泌前にSer3がオクタノイル化されます。このステップは、生物活性に不可欠です。

グレリンの代謝と疾病との関連性

グレリンは、心血管系、骨、胃腸、免疫系などの他の多くの生理学的システムや、気分、筋肉量維持、心不全、心筋梗塞、悪液質、がん、プラダーウィリー症候群(Prader Willi syndrome)などのいくつかの生理学的状態にも関係しています。内因性ペプチドが摂食行動に直接関連すると考えられる場合において、グレリンは食物摂取の調節因子のみならず、骨粗鬆症、不妊症および排卵誘発、その他いくつかの心血管疾患にも関与していると考えられます。

肥満と糖尿病は、今世紀の最大の公衆衛生における問題の1つです。実際に、肥満は過去30年間で2倍以上になり、150万人に達しました。肥満は、すべての人口(子供、大人、高齢者)とすべての社会経済的地位に関わらず影響を及ぼします。肥満は、複雑な状態であり、2型糖尿病を含む深刻な食事関連の非感染性疾患の大きなリスクをもたらします。これらのことから、グレリンは内分泌学の標的になりつつあります。

グレリンの発見

グレリンは、1999年に、異なるアプローチで2つのチームによってほぼ同時に発見されました。日本で児島および寒川が、逆薬理学的アプローチを用いて初めてグレリンを発見し、特許が出願されています。ペプチドホルモンがアシル化されて活性化することが示されたのは、これが最初でした。フランスではTomasettoらが分子生物学の手法を使用し、児島らによって(パリ条約に基づく)優先特許が出願された翌日にグレリン(モチリン様ペプチド)の発見を発表しました。

2つのチームの発見から、このペプチドは成長おける良い候補となる可能性に加え、食欲、食物摂取、およびグルコース恒常性(糖尿病/肥満)において重要な役割を果たす腸ペプチドホルモンでもあることが解明されました。

アシル化/非アシル化グレリンについて

グレリンには非アシル化(Unacylated)/アシル化(Acylated)の2つのタイプの存在が知られています。アシル型は活性型ペプチドであり、そのレセプターが唯一同定されています。一方で、臨床試験では非アシル化型が使用されています。これらがどのように機能するかはまだわかっておらず、現在、世界中のいくつかのチームがその解明に当たっています。

児島の論文報告出版後、研究者達はすぐに生物学的試料(血液/血漿)中のホルモンの循環濃度の測定に着目しました。グレリンの測定法は非常に短期間で設定されましたが、多くの場合においてアシル化グレリンと両方の形態(アシル化グレリンと非アシル化グレリン)の混合量については気にされませんでした。そのため、早くから市販されたアッセイでは、非特異的(アシル化および非アシル化形態の測定)であったり、グレリンの脱アシル化/分解により実際より低い値を示すものでした。しかし、これらの偏った測定結果の一方で、グレリンが食前に上昇することや、食後の下降は十分に確立されています。そのため、多くの科学者は、バイオマーカーとしてのグレリンへの信頼を失墜しました。しかし、まだ興味を維持している人にとっては、試料を適切に収集するという課題は依然として問題でした。

アシル化/非アシル化グレリンについて

アシル化/非アシル化グレリンについて

BertinPharma社(当時SPI-Bio社)は、グレリンの発見からの5年後に、2つのグレリンの形態を測定できる最初のGhrelin ELISAを市販しました。さらに2014年には、グレリン測定に付随する問題を解決するために、試料採取の際の各種プロテアーゼ阻害物質の使用に対応可能なGhrelin Easy Sampling ELISAシリーズを追加しました。



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製品ラインナップ

インキュベーション時間の短い「Ghrelin Express ELISA 」シリーズ、血液試料採取の際に使用可能なプロテアーゼ阻害物質の幅が広い「Ghrelin Easy Sampling ELISA」 シリーズがあります。
商品コードをクリックすると各製品の価格表、検量線例の図をクリックすると拡大図をご覧いただけます。

キット種別 測定動物種 測定因子 適応プロテアーゼ阻害物質 インキュベーション
時間(温度)
測定範囲 フォーマット 商品コード 検量線例
Ghrelin Express ELISA Human Acylated Ghrelin PHMB, PMSF, Aprotinin 3 hrs
(室温)
2~250 pg/ml 384 well A05106 A05106-384well
96 well A05106 A05106-384well
Unacylated Ghrelin A05119 A05119
Mouse/Rat Acylated Ghrelin A05117 A05117
Unacylated Ghrelin A05118 A05188
Ghrelin Easy Sampling ELISA Human Acylated Ghrelin 各種タンパク質
阻害物質(AEBSF, PMSF, Aprotinin, Pefabloc,P800, PHMB)
2×2 hrs
(室温)
2~250 pg/ml 96 well A05306 A05306
Unacylated Ghrelin A05319 A05319
Mouse/Rat Acylated Ghrelin A05317 A05317
Unacylated Ghrelin A05318 A05318
Dog Acylated Ghrelin A05321 A05321
Unacylated Ghrelin A05320 A05320
Ghrelin ELISA Pig Acylated Ghrelin PHMB, PMSF, Aprotinin 18 hrs
(4℃)
3.9~500 pg/ml 96 well A05401 A05401
Unacylated Ghrelin A05402 A05402


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測定原理

Ghrelin Express ELISA(Human, Mouse/Rat) / Ghrelin ELISA(Pig

測定原理A

Ghrelin Easy Sampling ELISA(Human, Mouse/Rat, Dog

測定原理B

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特長

  • アシル化 (活性型) グレリン, もしくは非アシル化 (不活性型) グレリンを選択的に定量可能
  • 測定試料:血漿(EDTA処理)
  • 測定原理:サンドイッチELISA
  • 測定方法:比色
  • 測定波長:405~414 nm

プロテアーゼ阻害物質適合表

プロテアーゼ阻害物質 PHMB PMSF Aprotinin AEBSF Pefabloc P800
Ghrelin Express ELISA
Ghrelin ELISA
× × ×
Ghrelin Easy Sampling ELISA

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キット内容

キット種別 Ghrelin Express ELISA
Human, Mouse/Rat
Ghrelin Easy Sampling ELISA
Human, Mouse/Rat, Dog
Ghrerin ELISA
Pig
測定因子 Acylated Ghrelin Unacylated Ghrelin Acylated Ghrelin Unacylated Ghrelin Acylated Ghrelin Unacylated Ghrelin
キット内容 96/384 well strip well microtiter plate, placoated with anti-Ghrelin mouse monoclonal antibody*1
96 well strip well microtiter plate, placoated with anti-Ghrelin mouse monoclonal antibody Easy Sampling
96 well strip well microtiter plate, placoated with anti-Ghrelin mouse monoclonal antibody(pig)*1
Acylated Ghrelin tracer Express*1
Unacylated Ghrelin tracer Express*1
Acylated Ghrelin tracer Easy Sampling*1
Unacylated Ghrelin tracer Easy Sampling*1
Acylated Ghrelin tracer
Unacylated Ghrelin tracer
Acylated Ghrelin standard*1
Unacylated Ghrelin standard*1
Acylated Ghrelin quality control*1
Unacylated Ghrelin quality control*1
Acylated Ghrelin EIA buffer
EIA buffer
Wash buffer concentrate
Tween 20
Ellman's reagent
Well cover sheet

*1 キットにより内容は異なります。

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採取した試料中のシステインプロテアーゼによるバイオマーカーの分解を迅速に防止するため、4-(ヒドロキシメルリ)安息香酸(PHMB)をあらかじめ適量添加したサンプリングチューブです。チューブには目盛りが付いており、1 mlの試料の採取に最適化されています。シリコンワッシャーと雄ねじが組み合わされており、-80℃での保存が可能です。従来の採決管で血液試料を採取した後に、本製品に分注し保存することもできます*2

*2 本製品は、血液試料を直接採取する目的での使用には適しません。

Sampling tubes with PHMB

Sampling tubes with PHMB(#D31009

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価格

Ghrelin Acyrated/Unacylated Express ELISA(Human, Mouse/Rat

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種交差性:Human,測定試料:血漿(EDTA),感度:0.3 pg/ml,測定範囲:2-250 pg/ml,検出方法:呈色,測定波長:405~414 nm,アッセイ法:サンドイッチEIA,アッセイ数:96 wells
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アシル化グレリンの測定キット。サンプル調製時に幅広いプロテアーゼ阻害剤を使用可能。種交差性:Human,測定試料:血漿(EDTA),測定範囲:2.0-250 pg/ml,検出方法:呈色,測定波長:405~414 nm,アッセイ法:サンドイッチEIA,アッセイ数:96 wells
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