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T7 システムを用いた強力な誘導発現システム Bacillus megaterium High Yield T7 Gene Expression Kit

掲載日情報:2012/11/28 現在Webページ番号:4312

強力なT7 RNAポリメラーゼのプロモーターを有するE. coli / B. megateriumシャトルベクター(pPT7)と、B. megateriumプロトプラストを用いた、非常に高収量(工業スケール)のタンパク質産生が可能な発現システムです。

特  長

  • タンパク質の発現調節はキシロースオペロンによって厳密に行われ、キシロース添加時の誘導発現量は、従来のキシロースオペロン制御システムの8倍にも達する高レベルになります。
  • アルカリプロテアーゼが合成されないため、誘導後5時間まで産生タンパク質は加水分解されません。
  • B. megateriumの細胞壁にはエンドトキシンがないため、タンパク質産生に適しています。
  • B. megateriumはプロトプラスト化してあり、そのまま形質転換に使用できます。
  • 別売りのpPT7-SPLipA Secretion Vectorは、目的配列のN末端側にLipA Signal Sequenceを有し、目的配列を発現させて分泌させることができます。

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原  理

1. キシロースオペロンの下流にT7 RNAポリメラーゼ遺伝子が組み込まれたベクターpT7-RNAPが、あらかじめ宿主であるB. megateriumに導入されている。

2. 目的遺伝子を組み込んだシャトルベクターpPT7を宿主に導入する。

3. キシロースを添加すると、pT7-RNAPよりT7 RNAポリメラーゼが発現され、T7 RNAポリメラーゼにより目的遺伝子が発現する。

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参考文献

1. Gamer, M., et al., Appl. Microbiol. Biotechnol, 82, 1195-1203 (2009).
2. Bunk, B., et al., Bioengineered Bugs, 1 (2), 1~7 (2010).

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キット内容

  • Bacillus megaterium protoplast, strain MS941, pretransformed with pT7-RNAP
  • pPT7 cloning vector
  • pPT7-GFP control vector

[在庫・価格 :2024年03月29日 00時00分現在]

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Bacillus megaterium High Yield T7 Gene Expression Kit
3~4週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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Bacillus megaterium High Yield T7 Gene Expression Kit

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キット別売品

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Bacillus megaterium Protoplast, Strain MS941, Pretransformed with pT7-RNAP
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Bacillus megaterium Protoplast, Strain MS941, Pretransformed with pT7-RNAP

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T7 Gene Expression System 関連製品ご購入時のご注意

本製品はT7 発現システム関連製品のため、購入時にご使用者確認書が必要です。詳細については、フナコシホームページをご参照下さい。

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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