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HOME > 試薬 > 遺伝子工学 > タンパク質発現システム > 原核細胞発現ベクター > LYTAG Two-Phase Purification System

溶媒抽出でタンパク質を精製できる発現システム LYTAG Two-Phase Purification System

掲載日情報：2020/06/12 現在Webページ番号：4176

コリン結合性の新規タグ配列LYTAG を融合した組換え体タンパク質をE. coli内で発現させた後、2種類の水溶液を用いた溶媒抽出により、発現タンパク質を簡便に分離精製するシステムです。製品には発現ベクター、発現宿主、発現誘導試薬、精製用水溶液、コリンを含む溶出バッファーが含まれています。

※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

LYTAGについて
特長
使用例
キット内容
価格

LYTAGについて

LYTAG はStreptococcus pneumoniaeのLytA（N-acetylmuramoyl-L-alanine amidase）に存在するコリン結合ドメインを基に開発された136個のアミノ酸残基からなるタグ配列で、コリンまたはコリンアナログ（3級または4級アミン）との非共有結合により穏和な条件下で精製できます。

Biomedal社の従来品であるC-LYTAG Purification System^＊などに用いられていたC-LYTAGと比べ、コリン結合ドメインと目的タンパク質の間にαヘリックスを形成するスペーサー配列が挿入され、精製時にコリンと目的タンパク質による立体障害が減少しました。

＊ C-LYTAG Purification Systemについての詳細は、C - LYTAG Protein Expression & Purification Systemをご覧下さい。

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特長

タンパク質を発現させたE. coliライセートをTop solution、Lower solutionの混合物に加え、穏やかに撹拌すると、LYTAG融合タンパク質のみがTop solutionに抽出されます。Top solutionを分取、洗浄後、Choline chloride溶液を加えて、LYTAG融合タンパク質を溶出します。
精製操作は、レジンを用いた従来法よりも、非常に簡便、安価、短時間で行え、またスケールアップが容易です。
精製操作に特別な装置は不要です。
95％以上の純度で目的タンパク質を精製できます。
精製操作を穏和な条件で行うため、目的タンパク質の変性が抑えられます。
発現ベクターpALEX2による目的タンパク質の発現は厳密に制御されており、サリチル酸の添加により発現が誘導されます。
製品には読み枠の異なる3種類の発現ベクター（pALEX2a、b、c）が含まれており、挿入配列の導入に便利です。
タグドメインは封入体を形成しません。
タグ配列はEnterokinaseで切除できます。