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反応終了まで活性制御可能な PCR 用酵素 HotMaster Taq DNA Polymerase

掲載日情報:2009/08/24 現在Webページ番号:3714

ファイブプライム /
5 PRIME GmbH
[メーカー略称:FPR]

5 PRIME 社が独自に開発した Taq polymerase 制御物質「HotMaster」(特許出願中)を配合し、非特異的な増幅を極限まで抑えた新しいタイプのホットスタート式 PCR 用酵素です。従来のホットスタート式 PCR 酵素で制御していた初期ステップだけでなく、各サイクルのアニーリングステップにおいてもミスアニーリングによる非特異的増幅を防ぎます。

特長

  • HotMaster は熱に安定な物質で、温度依存的に DNA ポリメラーゼ活性を PCR の最終サイクルまで制御することができます。
  • 各 PCR サイクルのアニーリングステップで低温となった際に HotMaster が Taq polymerase の基質結合部位に結合して活性を阻害し、ミスアニーリングを防ぎます。一方、温度が上昇すると HotMaster が解離し、Taq polymerase が活性化し DNA が増幅されます。
  • 100 bp ~ 5 kb までの幅広いサイズのテンプレート DNA に使用できます。
  • 従来の抗 Taq 抗体を用いたホットスタート式 PCR 用酵素のようなタンパク質の混入がありません。

反応温度 Taq polymerase
に対する結合親和性
Taq polymerase の状態
< 40℃ HotMaster >テンプレート DNA HotMaster が基質結合部位に
結合し、活性が阻害される。
40℃~ 55℃ HotMaster =テンプレートDNA HotMaster とテンプレート
DNA で平衡的競合が起き、活
性型/不活性型が混在する。
55℃< HotMaster <テンプレートDNA HotMaster が解離して阻害が
解除され、テンプレート DNA
と結合し DNA が合成される。

本製品を含む 4 種類の Taq polymerase を用いて、ヒト TFN 遺伝子を増幅した。本製品は、従来の製品に比べて増幅効率が高く、さらに非特異的な増幅産物の生成が抑えられているのがわかる。
lane 1 ~ 3 :通常の Taq polymerase
lane 4 ~ 6 :本製品
lane 7 ~ 9 :化学修飾を用いた従来のホットスタート酵素
lane 10 ~ 12 :抗 Taq 抗体を用いた従来のホットスタート酵素

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キット内容

  • HotMaster Taq DNA polymerase
  • HotMaster Taq buffer with 25 mM Mg2+

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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