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One-STrEP/One-TAP System
タンパク質複合体の精製システム One-STrEP/One-TAP System
掲載日情報：2020/06/12 現在Webページ番号：3271
ストレプトアビジンに結合するユニークなタグ（One-STrEP-tag） とストレプトアビジン変異体タンパク質（Strep-Tactin）との可逆的な結合を利用して、目的因子（bait）と相互作用するタンパク質（prey）と複合体を簡便に精製するシステムです。One-STrEP システムは 1 ステップで、One-TAP システムは 2 ステップで複合体を精製します。
追加しました。
特長
- キットに含まれるバッファーは生理的条件に近く、穏やかな条件で複合体を精製できます。
- One-STrEP システムは迅速に複合体を精製できます。低濃度のビオチンを含む穏和な条件で溶出するため、結合力の弱い prey タンパク質を含む複合体の精製に適しています。また、複合体の機能や立体構造を保持したまま精製することも可能です。
- One-TAP システムは、2 回の精製工程を経ることにより、One-STrEP システムよりも優れたシグナル／ノイズ比（S/N 比）で精製できます。また、より強固に複合体を形成している prey タンパク質の精製に適しています。
- 哺乳動物細胞用と、E. coli 用の製品があります。いずれも、One-STrEP-tag を bait タンパク質の C 末端に融合させて発現するベクターと、N 末端に融合させて発現するベクターが含まれています。
- 哺乳動物細胞用製品に含まれる発現ベクターの pESG-IBA は、CMV プロモーターにより One-STrEP-tag 融合組換え体 bait タンパク質を高レベルで恒常的に発現できます。また、ネオマイシン耐性遺伝子を含むため、安定化細胞の樹立が可能です。
- E. coli 用製品に含まれる発現ベクターの pASG-IBA は tetA オペロンを含み、無水テトラサイクリン（AHT）による誘導発現が可能なため、宿主に対して細胞毒性を示す bait タンパク質でも発現可能です。
- 相同組換えを利用した StarGate Cloning System により、簡便に発現ベクターのクローニングを行えます。
追加しました。
One-STrEP-tagとは
One-STrEP-tag は、ストレプトアビジンに結合する 8 アミノ酸残基（Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys）から成る StreptagII を改変したタグで、bait-prey 複合体の精製に大変便利なツールです。Strep-tagIIからの改変により、発現量の少ない bait-prey 複合体でも効率良く精製できるようになっています。また、Strep-tagII に比べ、様々な界面活性剤を含むバッファー中でも使用できるため、複合体の精製に最適なバッファー条件を検討できます。
追加しました。
原理
キットに含まれる発現ベクターに bait タンパク質をコードする DNA 断片を挿入し、One-STrEP-tag を有する組換え体 bait タンパク質を哺乳動物細胞、または E. coli で発現させ、細胞中で bait-prey 複合体を形成させます。One-STrEP システムでは Strep-Tactin 固相化カラムにより 1 ステップで複合体を精製します。One-TAP システムでは、引き続き One-STrEP-tag のモノクローナル抗体である StrepMAB Classic を固相化したカラムにより 2 ステップで複合体を精製します。
追加しました。
キット内容
- StarGate Standard Entry Cloning Kit
- StarGate Transfer Reagent Set
- Acceptor vectors*1, *2
- Gravity flow Strep-Tactin Superflow column（0.2 ml, 1 ml）
- Gravity flow StrepMAB-Classic MacroPrep column（One-TAP Set のみ）
- StrepMAB-Classic HRP conjugate
- Avidin
- Strep-tag II peptide（One-TAP Set のみ）
- Buffers
- Control donor vector
- AHT（ E. coli 用製品のみ）
- PP2Ac affinity-purified goat polyclonal antibody（哺乳動物細 胞用製品のみ）
＊1哺乳動物細胞用製品：pESG-IBA105, pESG-IBA103
＊2 E. coli 用製品：pASG-IBA105, pASG-IBA103
※すべてのキット構成品は、単独製品としても取り扱っています。
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月17日 08時55分現在]
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One-STrEP Set, for Mammalian Cell |
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One-STrEP Set, for E.coli Cell |
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One-TAP Set, for Mammalian Cell |
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One-TAP Set, for E.coli Cell |
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[在庫・価格 ：2024年04月17日 08時55分現在]
One-STrEP Set, for Mammalian Cell
文献数： 0
- 商品コード：2-1121-001
- メーカー：IBA
- 包装：1kit
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Strep-Tactin Superflow Column, Gravity Flow (0.2ml bed volume) |
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Anti-Strep-tag II, Mouse-Mono, HRP |
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