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リガンド・レセプタースクリーニング用システム AP-TAG Kit

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:2306

目的とするリガンドまたはレセプターを、アルカリホスファターゼ(AP)との融合タンパク質として発現させます。発現させた融合タンパク質を標識プローブとして用いることにより、対応するレセプターやリガンドをヨウ素標識法と同程度の検出感度で、スクリーニングできます。

特長

  • 分泌性のポリペプチドリガンドまたはレセプターの細胞外ドメインをコードするcDNAを、pAPtagベクターのヒト胎盤由来分泌性APをコードしている遺伝子に読み枠を合わせてサブクローニングできます。
  • AP融合タンパク質は、293T細胞で発現させた場合、培養液中に高レベルで分泌され、AP活性測定、またはAnti-AP抗体を用いたウエスタンブロッティングにより簡単に検出可能です。
  • pAPtag-2 vectorおよびpAPtag-4 vectorにはsupF選択用マーカーがあります。宿主菌GH2/P3 Supercompetent cellはP3エピソームを含み、supFを有するプラスミドが組み込まれた場合のみアンピシリンとテトラサイクリン耐性となるため選択が可能です。

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pAPtag-2 vector

  • AP融合タンパク質を293T細胞中で一過的にまたは構成的に発現できます。
  • APタンパク質のN末端では分泌シグナルが除去されており、クローニングサイトが挿入されています。インサートの3'末端はベクターのBgl Ⅱサイトに結合させ、読み枠をそろえることをお勧めします。


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pAPtag-4 vector

  • 目的タンパク質のN末端側にAPを融合させたタンパク質を発現できます。
  • COS細胞や293T細胞を用いて一過的に発現できます。
  • APtag-2とは異なり、N末端に分泌シグナルが存在するため、非融合のAP自体も細胞外に分泌します。このため、結合実験でのネガティブコントロールとしても使用できます。


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pAPtag-5 vector

  • Zeocinによる選択ができ、宿主菌がP3エピソームを有する必要がありません。
  • 2か所のクローニングサイトを有し、APを目的タンパク質のN末端側とC末端側のどちらに融合させるかを選択できます。
  • 発現タンパク質には6×Hisおよびmycタグが付いているので精製、検出が容易です。


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本システムについて

AP-TAG Kitで用いられているAPtag Ligand-Receptor Interaction Detection Systemは、ハーバード大学のDr. John FlanaganとDr. Patric Lederによって開発された検出システムで、各種のレセプターおよびそのリガンドの分離・同定に威力を発揮してきました。本システムによってLeptinやSemaphorin Ⅲのレセプター、またKit、Mek4, Sekのリガンドがクローニングされています。

US Patent No. 5,554,499 and 5,801,000


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キット内容

  • pAPtag-2 vector(#Q201のみ)
  • pAPtag-4 vector(#Q201のみ)
  • pAPtag-5 vector(#Q202のみ)
  • Primers
  • Colony lysis buffer

本キットはシングルライセンス用です。増殖させて再配布することはできません。

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AP-TAG Vectorおよび関連製品ご購入時のご注意

AP-TAG Vector、AP-TAG Vectorを含むキット、および293T Cellは、大学・官公庁の研究所(Academic)にご所属の方と営利団体・企業(Commercial Entities)にご所属の方とで商品コードが異なるため、ご購入時にお客様のご所属の確認が必要な製品です。また、営利団体・企業(Commercial Entities)にご所属の方の場合は、ご所属確認の際に使用目的を確認させていただきます。

[在庫・価格 :2024年04月19日 20時55分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
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納期 文献数
AP-TAG Kit A
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
※国立機関・大学用(研究用)。 目的とするリガンドまたは受容体をAP融合タンパク質として発現させ,標識プローブとして用いることにより,対応する受容体やリガンドをスクリーニングすることができるキット。pAPtag-2,pAPtag-4 vectorを含む。
法規制等
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The AP-TAG Receptor/Ligand Interaction Detection System is covered by US patents 5,554,499 and 5,801,000 licensed to GenHunter Corporation which holds worldwide exclusive rights to the AP-TAG technology in the field of research applications. Purchase of an AP-TAG Kit or any pAPtag vector comes with a limited, single-user and non-transferable sublicense for use in research applications only. No part of the kit or pAPtag plasmid vectors shall be disseminated, propagated or distributed outside the user's own laboratory without written permission from GenHunter.

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関連製品:AP Western Blot Kit

培養液中に分泌されたアルカリホスファターゼ( AP )融合タンパク質をウエスタンブロッティングで検出する際に便利な抗体を含むキットです。

AP Western Blot Kit

■特長

  • 細胞培養液中に大量に含まれるアルブミンと単独のAP は、ほぼ同じ分子量のため、通常のSDS ポリアクリルアミドゲル染色では検出が困難ですが、本キットを使用することによりAPを感度良く染色できます。
  • ヒト胎盤の分泌型AP に特異的なウサギポリクローナル抗体を使用します。

■キット内容

  • AP Antibody (human placenta) - polyclonal from rabbit
  • Purified AP (western blot control) human placenta
  • Kit-AP fusion protein control media

[在庫・価格 :2024年04月19日 20時55分現在]

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詳細 商品名
  • 商品コード
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。