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高感度な免疫組織染色に ウサギモノクローナル抗体

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:2254

リチャード アラン サイエンティフィック パワード バイ エプレディア /
Richaerd-Allan Scientific Co. Powered by Epredia
[メーカー略称:LVC]

ウサギモノクローナル抗体は、マウスモノクローナル抗体よりも抗原に対するアフィニティが高く、ロット間の差が少なくなっています。

特長

  • 免疫組織染色の際に高い希釈倍率で使用でき、高感度な染色結果が得られます。
  • 二重染色やマウス組織の免疫染色も容易に行えます。

ヒトマントル細胞リンパ腫のホルマリン固定パラフィン包埋組織を抗Cyclin D1抗体(#RM-9104)を用いて染色した。腫瘍細胞の核が染色されている。

ヒト乳癌のホルマリン固定パラフィン包埋組織を抗Estrogen Receptor 抗体(#RM-9101)を用いて染色した。腫瘍細胞の核が染色されている。

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ウサギモノクローナル抗体の有用性

モノクローナル抗体は、昔からマウスで作られてきました。その理由は、免疫動物としてコストパフォーマンスが良く、管理がしやすく、様々な生物工学実験においてまさにスタンダードであるからです。

しかしマウスモノクローナル抗体の欠点として、アフィニティが低いこと、つまり標的タンパク質への結合力が弱いことが挙げられます。このようなアフィニティが低い抗体が抗原に結合するためには、組織切片を煮沸するといった抗原側を変化させる手段、いわゆる抗原賦活化処理を行う必要があります。

別の手段として、抗原と抗体の結合力を高めるための特別な反応液や希釈液を使用することもあります。具体的にはこれらのpH や塩濃度を変えることにより、抗体の結合状態を改善することができます。しかしこの方法は抗原賦活化処理と同様に、もともとアフィニティの低い抗体を最適化するだけのことで、根本的な解決にはなりません。

従って、抗原の状態や希釈液を工夫する代わりに、よりアフィニティの高い抗体を作製することに意義があると考えられます。

このような理由から作製されたのがウサギモノクローナル抗体です。コンセプトはいたってシンプルで、マウスよりもアフィニティの高い抗体を産生することで知られているウサギを使用することにしたのです。その結果、クローニング技術の進歩により特異性の高い抗体が産生され、マウスでは免疫原性を示さない抗原に対する抗体でも作製が可能となりました。

ウサギモノクローナル抗体はマウスモノクローナル抗体の約 10 倍のアフィニティを有し、結果としてより特異性が高く、より感度の優れた抗体となりました。

産生されたウサギモノクローナル抗体をテストしたところ、組織切片ごとに条件の最適化は必要ですが、抗原賦活化処理は必須ではなくなりました。ウサギモノクローナル抗体の作製技術は、これまでに組織染色での可視化が困難とされてきたKi67(#RM-9106)、Cyclin D1(#RM-9104), Cyclin D3 といった重要なマーカー抗体の産生に活用されています。


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Anti-Estrogen Receptor, Rabbit-Mono(SP1)
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Anti-Estrogen Receptor, Rabbit-Mono(SP1)

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