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ABC / SLCトランスポーターのVesicle Uptake Assay用膜小胞 ABC Transporter ProVesicles / Uptake Assay Reagent

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:8506

ヒトまたはイヌの組換え体トランスポータータンパク質を発現させたSf9細胞から調製した、膜小胞です。標識した基質がトランスポーターを介して小胞内にどれだけ取り込まれるかを測定する、Vesicle Uptake Assayに使用できます。トランスポーターの輸送活性や、阻害物質の評価に有用です。

ATPase Assay用の膜画分 「ProMembranes」の詳細についてはこちらをご覧下さい。

ABCトランスポーターとは

ABCトランスポーター(ATP-Binding Cassette Transporter)は、ATPase活性を有する膜タンパク質です。肝臓や腎臓、血液脳関門や腫瘍組織において、ATPの加水分解によって得られるエネルギーを用いて、各種薬剤や生体異物を輸送します。多剤耐性タンパク質(P-glycoprotein ; P-gp、MDR1)、BCRP(Breast Cancer Resistance Protein)、BSEP(Bile Salt Export Pump)などは排出型ABCトランスポーターとして知られており、薬剤の吸収・分布・排泄などに深く関与しています。
ABCトランスポーターと標的化合物の相互作用を解析する方法として、「ATPase Assay」と「Vesicle Uptake Assay」の2種類があります。


■ATPase Assay(左図):ABCトランスポーターを発現した膜画分を使用する。ABCトランスポーターが基質化合物と相互作用した際に上昇するATPase活性を検出する。標的化合物がABCトランスポーターと相互作用するかどうかをスクリーニングできる。ハイスループットフォーマットでの測定が可能。
ATPase Assay用の膜画分 「ProMembranes」の詳細についてはこちらをご覧下さい。

■Vesicle Uptake Assay(右図):ABCトランスポーターを発現した膜画分から調製した反転膜小胞(inside-out vesicle)を使用する。RIまたは蛍光標識した標的化合物がABCトランスポーターと相互作用し、ATP依存的に小胞に取り込まれるかを検証する(下記参照)。

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特長

  • バキュロウイルス発現系により、ヒトまたはイヌのトランスポーターを高発現させたSf9細胞から調製した膜小胞です。蛍光標識やRI標識した基質を外液に添加して、小胞内への取り込みを検出するUptake Assayに使用できます。
  • ATP依存的に化合物を輸送するABC(ATP-Binding Cassette)トランスポーター(BSEP、MRP2、MRP4、BCRP)を発現させた反転膜小胞(inside-out vesicle)と、シナプス小胞に存在するSLC(Solute Carrier)トランスポーターVMAT2を発現させた膜小胞があります。
  • 別売りで、Uptake Assay用のバッファーをセットにしたUptake Assay Reagentがあります。

標識基質は製品に含まれていません。別途ご用意下さい。

ABC Transporter ProVesicles


VMAT2 ProVesicles

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使用例

MRP2 Provesicles(#PV31003)を用いてVesicle Uptake Assayを行った。蛍光基質としてCDCFを用いた。
左図:ATPまたはAMP存在下でのCDCFの取り込みを測定した。
中図:ATP存在下でのCDCF (10μM)取り込み率を測定した(取り込み率=40 pmol/mg/min)。
右図:MRP2阻害物質 Benzbromarone存在下での取り込み率を測定し、IC50値を算出した(IC50=65μM)。

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製品ラインナップ

ABCトランスポーター動物種ProVesicles
商品コード
Uptake Assay Reagent
商品コード
BSEP (ABCB11)ヒトPV31001PB21001
イヌPV31002
MRP2 (ABCC2)ヒトPV31003PB21002
MRP4 (ABCC4)ヒトPV31004
BCRP (ABCG2)ヒトPV31005
イヌPV31006
SLCトランスポーター動物種ProVesicles
商品コード
Uptake Assay Reagent
商品コード
VMAT2 (SLC18A2)ヒトPV31008PB21009

価格

ProVesicles(ABC / SLCトランスポーター膜小胞)

[在庫・価格 :2024年03月29日 00時00分現在]

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BSEP, Human, Sf9-Membrane, for Uptake Assay, ProVesicles (5mg/ml)

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膜小胞(ProVesicles)は含まれていません。

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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