フィターゼ活性測定キット QuantiChrom Phytase Assay Kit
掲載日情報：2022/09/16 現在Webページ番号：70227
試料中のフィターゼ（Phytase）活性を比色法により簡便、迅速に測定できるキットです。
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使用例
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BioAssay Systems社では、2018年1月1日より緑化推進のために製品へのプロトコルの添付を廃止しました。各製品のプロトコルについては、BioAssay Systems社ホームページよりダウンロードしてご利用下さい。 |
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フィターゼ（Phytase）とは
フィターゼ（Phytase）は、ミオイノシトール-(1,2,3,4,5,6)-6リン酸（フィチン酸またはIP6）のリン酸エステル結合の加水分解を触媒し、それによってイノシトールとリン酸塩を放出します。フィチン酸は、植物におけるリン酸塩の主な貯蔵庫です。フィターゼは、小麦や大麦などの穀物に豊富に含まれており、単胃動物によるフィチン酸の加水分解は、動物の栄養面において非常に重要です。また、単胃動物におけるフィターゼの欠如は、未消化のフィチン酸による環境への過度のリン浸出につながる恐れがあります。
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測定原理
フィチン酸は、試料中のフィターゼにより加水分解し遊離リン酸を産生します。本製品は、遊離リン酸測定キットである☞ Malachite Green Phosphate Assay Kit（#POMG-25H）をベースとしています。マラカイトグリーン、モリブデン酸およびオルトリン酸が緑色の複合体を形成し、この吸光度（OD620 nm）を分光光度計で計測します。
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特長
- 試薬を混合するだけで測定でき、洗浄操作は不要です。100テスト分の試薬が含まれています。
- フォーマット：96ウェルプレート
- 測定試料：酵素抽出物、農業および生物試料（小麦、大麦など）
- 測定方法：比色
- 測定波長：600～660 nm（ピーク波長：620 nm）
- 操作時間：約60分
- 検出限界：0.01 U/L
- 測定範囲：0.01～20 U/L
※ 本製品は、試料中に遊離リン酸が存在すると測定結果に大きく影響します。フィターゼ抽出物の調製において、リン酸を含有する界面活性剤やバッファーの使用は避けて下さい。もし試料にリン酸を含有する場合は、10 kDa NMWLメンブレンフィルター（Amicon Ultra 0.5 ml Ultracelなど）を使用して3回以上洗浄してリン酸を除去することをお勧めします。
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操作方法概略
- データシート記載のプロトコルに従って、測定試料数に合わせて十分量のPhytic acid working reagent（WR）とColor development reagentを測定前に調製する。
- 各試料溶液5 μlとブランク（5 μlバッファー、酵素無添加）をプレートの別々のウェルに入れ、WR 75 μlを加えて反応を開始する。プレートを軽くタップして内容物を混合する。
- 室温下、または任意の温度で30分間インキュベートする。
- データシート記載のプロトコルに従って、リン酸標準溶液を調製する。
- 30分後、Color development reagent 20 μlを各ウェルに加え、プレートを軽くタップして内容物を混合する。
- 室温下、30分間インキュベートする。
- プレートリーダーで600～660 nm（ピーク波長：620 nm）の吸光度を測定する。
フィターゼ活性の算出
Phytase Activity = ODSample - ODBlankSlope × Reaction vol（L）/ time /Sample vol（L）
= ODSample - ODBlankSlope × 80 × 10-6L/30 min/（5 × 10-6L）
= ODSample - ODBlankSlope × 0.533（U/L）
- ODSample：試料の吸光度
- ODBlank：ブランクの吸光度
- Slope：リン酸標準曲線の傾き（μM-1）
酵素活性の定義
アッセイ条件下（pH 5.5）で1分あたり1 μMの基質の放出を触媒する酵素活性を1Uと定義します。
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キット内容
- Assay buffer（pH 5.5）
- POMG reagent A / B
- Phytic acid
- Standard（1 mM Phosphate）
※ キットには、☞ 透明平底96 wellマイクロプレートは含まれていません。別途ご用意下さい。測定にはマイクロプレートリーダーが必要です。
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月29日 00時00分現在]
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Phytase Assay Kit, QuantiChrom |
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[在庫・価格 ：2024年04月29日 00時00分現在]
Phytase Assay Kit, QuantiChrom
文献数： 0
- 商品コード：DPHT-100
- メーカー：BAS
- 包装：1kit
- 価格：¥91,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：医薬用外劇物
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | 医薬用外劇物 | ||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2023年3月15日号 p.13
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| 製品記事 |
BioAssay Systems社 アッセイキット選択ガイド／製品リスト |
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