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EnzyChrom Acetylcholine Assay Kit
アセチルコリン測定キット EnzyChrom Acetylcholine Assay Kit
掲載日情報：2021/02/25 現在Webページ番号：69670
試料中のアセチルコリン（Acetylcholine）を比色法または蛍光法により簡便に測定できるキットです。アセチルコリンの代謝における薬物の影響の研究にも最適です。
※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
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検量線例
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BioAssay Systems社では、2018年1月1日より緑化推進のために製品へのプロトコルの添付を廃止しました。各製品のプロトコルについては、BioAssay Systems社ホームページよりダウンロードしてご利用下さい。 |
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アセチルコリンとは
アセチルコリン（Acetylcholine）は、アセチルコリン作動性ニューロンで生成される神経伝達物質で、骨格筋の動き、平滑筋、心筋の調節、学習、記憶、および気分において重要な役割を果たします。
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測定原理
本アッセイでは、アセチルコリンはアセチルコリンエステラダーゼによってコリンに加水分解されます。生成したコリンは、コリンオキシダーゼによってベタインとH2O2に酸化され、特異的な色素と反応してピンク色の生成物を形成します。570 nmでの吸光度または蛍光強度（Ex 530 nm / Em 585 nm）は、試料中のコリン濃度に正比例します。
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特長
- 蛍光法の測定では、比色法の約10倍の測定感度が得られます。
- ハイスループットアッセイまたはスクリーニングにも適応します。
- 測定動物種：全動物種
- 測定試料：血清、血漿、尿、唾液、ミルク、組織・細胞培養液
- 必要試料量：20μl
- インキュベーション時間：約30分
- フォーマット：96 wellプレート
- アッセイ数：100 assays
※ 試料中のSH含有試薬（β-メルカプトエタノール、ジチオスレイトール、＞5μM）などは測定を干渉するので、これらの化合物の混入を避けて下さい。
| 測定方法 | Colorimetric（比色） | Fluorometric（蛍光） |
|---|---|---|
| 測定波長 | 570 nm（550～585 nm） | 励起 530 nm／蛍光 585 nm |
| 測定範囲 | 10～200μM | 0.4～10μM |
| 検出限界 | 10μM | 0.4μM |
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操作方法概略
比色法
- すべての試薬を室温に置く。チューブを開封前に簡単に遠心分離して、フタに付着した試薬をチューブに落とす。融解したチューブは、試験中は氷上に置く。Assay buffer 120μlをEnzyme mixに加えて再構成する。再構成したEnzyme mixは、-20℃保存で1ヶ月間安定である。
- Standardを希釈して標準溶液を調製する。標準溶液（0、60、120、200μM acetylcholine）および試料の各20μlを、透明平底96 wellマイクロプレート（キットには含まれていない）の各ウェルに添加する。
- 製品データシートを参照しWorking reagent（WR）を調製する。WR 80μlを各標準溶液と試料のウェルに加え、プレートをタップして混合し、室温下で30分間インキュベートする。
- 吸光度570 nm（550～585 nm）を測定する。
※ 再構成したEnzyme mixの融解時に黄色沈殿を生じる場合がありますが、その場合は14,000 rpmで2分間の遠心分離を行い、透明な上清を使用して下さい。
蛍光法
- 前述の比色法の約1/10濃度の標準溶液（0、3、6、10μM acetylcholine）を調製し、使用する。
- 標準溶液20μlと試料20μlを黒色96 wellマイクロプレート（キットには含まれていない）の各ウェルに加える。
- 製品データシートを参照しWorking reagent（WR）を調製する。各ウェルにWR 80μlを加え、プレートをタップして混合し、室温下30分間インキュベートする。
- 蛍光強度（Ex 530 nm/Em 585 nm）を測定する。
※ 1 mMのアセチルコリンは、14.6 mg/dl、0.015％または146 ppmに相当します。
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キット内容
- Assay buffer
- ACHE enzyme
- Enzyme mix
- Dye reagent
- Standard（2 mM Acetylcholine）
※ キットには、透明平底96 wellマイクロプレートおよび黒色96 wellマイクロプレートは含まれていません。別途ご用意下さい。
※ 比色法による測定にはマイクロプレートリーダー、蛍光法による測定には蛍光プレートリーダーが必要です。
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月28日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Acetylcholine Assay Kit, EnzyChrom (100tests) |
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[在庫・価格 ：2024年04月28日 00時00分現在]
Acetylcholine Assay Kit, EnzyChrom (100tests)
文献数： 2
- 商品コード：EACL-100
- メーカー：BAS
- 包装：1kit
- 価格：¥100,000
- 在庫：2個
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
測定試料：血清,血漿，測定範囲：10-200μl (比色)/0.4-10μl (蛍光)，測定波長：570, 530/590 nm，感度：10μl (比色), 0.4μl (蛍光)，検出方法：呈色, 蛍光，アッセイ法：Assay，アッセイ数：100 tests |
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
BioAssay Systems社 アッセイキット選択ガイド／製品リスト |
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