ADP測定キット EnzyChrom ADP Assay Kit
掲載日情報：2020/11/16 現在Webページ番号：69598
細胞および他の生物学的試料中のADP（アデノシン二リン酸, Adenosine diphosphate）を96-well plateフォーマットの蛍光法により簡便、迅速かつ高感度で定量するキットです。
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検量線例
ADPの検量線
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ADP（アデノシン二リン酸, Adenosine diphosphate）とは
ADPの役割
ADP（アデノシン二リン酸, Adenosine diphosphate）は、ATPaseによるATPの脱リン酸化産物です。ADPは、ATP合成酵素によってATPに戻すことができます。ADP濃度は、中間代謝に関与するいくつかの酵素を調節します。
ADP測定における問題点
従来のADP濃度の測定は、ADPがATPに変換された後にルシフェラーゼ／ルシフェリンを介したアッセイによって行われています。しかし、これらのアッセイではADPをATPに変換する前に、試料中のATPを測定する必要があるため、発生期のATP濃度がADP濃度よりも大幅に高い場合、ADPシグナルがATPシグナルに打ち消されてしまいます。
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測定原理
本アッセイでは、ATP存在下でもADP濃度を測定できます。ADPは、まずATPとピルビン酸に変換されます。生成されたピルビン酸は、キットに含まれる非蛍光試薬と反応することで蛍光シグナル（Ex 530 nm／Em 590 nm）を発し、この蛍光強度を測定することによりADPを定量することができます。
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特長
- 測定は簡便かつ高感度で、ハイスループットアッセイにも適応しています。
- ATPの存在下でも、ADPレベルの測定が可能です。
- 測定試料：細胞および他の生物学的試料
- 必要試料量：40μl
- 測定方法：蛍光法
- 測定波長：励起 530 nm／蛍光 590 nm
- 測定時間：30分
- 測定範囲：6～20μM
- 検出限界：0.1μM
- アッセイ数：100 tests
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操作方法概略
- Standardを製品データシートに記載された通りに蒸留水で希釈して標準試料を調製する。
- タンパク質を多く含む試料（特にATPase活性の高い試料）は、10％TCAを添加してボルテックスする。次に、遠心分離によって上清を回収し、中和剤を添加して中和する*。
- 各試料40μlを96 wellプレート（黒色平底）の各ウェルに分注する。測定試料にピルビン酸が含まれる場合、ブランク用に2つの別々のウェルに試料を添加する。
- Reagent A/BおよびEnzymeを所定の比率で混合する。試料にピルビン酸が含まれる場合には、ブランク試料を別に用意する。
- 4.で作製した混合溶液80μlを添加し、暗所で30分間インキュベートする。
- 蛍光強度（Ex 530 nm／Em 590 nm）を測定する。
＊ 細胞アッセイでは、少なくとも1×105個の細胞を使用する必要がある。細胞を10％TCAを含むdH2O中でホモジナイズし、上述した方法により除タンパク処理を行う必要がある。除タンパクした試料の測定においては、ΔRFUに所定の希釈率を乗じる必要がある。
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キット内容
- Reagent A/B
- Enzyme
- Standard
- 10％ TCA
- Neutralizer
※ キットにはマイクロプレート（黒色、平底）は付属していません。
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関連製品
品名をクリックすると製品の詳細、商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。
| 品名 | 商品コード | 適応 | 測定方法 |
|---|---|---|---|
| EnzyLight ADP Assay Kit | EADP-100 | 濃度測定、薬効評価 | 化学発光 |
| EnzyLight ATP Assay Kit | EATP-100 | ||
| EnzyLight ADP：ATP ratio Assay Kit | ELDT-100 | 存在比（モル比）の決定 |
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月28日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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EnzyChrom ADP Assay Kit (100tests) |
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[在庫・価格 ：2024年04月28日 00時00分現在]
EnzyChrom ADP Assay Kit (100tests)
文献数： 1
- 商品コード：E2ADP-100
- メーカー：BAS
- 包装：1kit
- 価格：¥96,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2021年7月15日号 p.8 ニュース2020年6月1日号 p.4
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| 製品記事 |
BioAssay Systems社 アッセイキット選択ガイド／製品リスト Obesity／Diabetes Research Kits（BioAssay Systems社） Metabolism Research Kitシリーズ |
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