グルコース取り込み量の蛍光定量キット EnzyFluo Glucose Uptake Assay Kit
掲載日情報：2022/05/10 現在Webページ番号：64637
細胞内に取り込まれたグルコース類似体2-DG（2-deoxyglucose）を検出することで、細胞のグルコース取り込み量を蛍光法により定量するキットです。
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測定例
PANC-1細胞を10,000 cells/wellで播種、飢餓処理し、グルコースの取り込み量を測定した。
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BioAssay Systems社では、2018年1月1日より緑化推進のために製品へのプロトコルの添付を廃止しました。各製品のプロトコルについては、BioAssay Systems社ホームページよりダウンロードしてご利用下さい。 |
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測定原理
本キットは、2-デオキシリボース（2-DG, 2-deoxyglucose）をグルコーストランスポーターにより細胞内に取り込ませ、その後内在性ヘキソキナーゼによって2-デオキシグルコース6-リン酸（2-DG6P, 2-deoxyglucose 6-phosphate）に代謝される反応を利用します。2-DG6Pは、解糖系の次のステップであるホスホグルコースイソメラーゼの適切な基質ではないため、細胞内に蓄積します。細胞を溶解し、過剰なNADPとグルコース6-リン酸デヒドロゲナーゼ（G6PDH）を添加することにより、2-DG6Pを代謝して等モルのNADPHが産生されます。次にG6PDHリサイクル反応を利用してシグナルを増幅し、Resorufinの産生に伴い発生する蛍光シグナル（Ex 530 nm / Em 585 nm）によってNADPH量を測定します。
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特長
- 放射性同位体を用いず、操作も簡便です。
- 高感度で迅速に測定できます。
- 測定試料：哺乳動物の培養細胞
- 検出限界：0.1μM
- 測定方法：蛍光
- 測定波長：励起530 nm／蛍光585 nm
- 測定時間：約2時間
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操作方法概略
- 細胞を培養、飢餓、および薬剤などにより処理する。
- 細胞内で2-DG6Pに代謝される2-DGを添加する。
- 細胞を溶解して2-DG6Pを抽出し、酸化によりNADPHを産生させる。
- NADPHを抽出し、その蛍光強度を測定する。
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キット内容
- Assay buffer
- G6P reagent
- Enzyme A/B
- NADP
- 2-DG substrate
- Probe
- 2-DG6P standard
- NADP/NADPH extraction buffer
※ 測定には蛍光プレートリーダーおよび黒色平底96ウェルプレートが必要です。
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月28日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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Glucose Uptake Assay Kit, EnzyFluo(100 tests) |
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[在庫・価格 ：2024年04月28日 00時00分現在]
Glucose Uptake Assay Kit, EnzyFluo(100 tests)
文献数： 3
- 商品コード：EFGU-100
- メーカー：BAS
- 包装：1kit
- 価格：¥145,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
細胞内に取り込まれたグルコース類似体2-DG（2-deoxyglucose）を検出することで，細胞のグルコース取り込み量を定量するキット。アッセイ法：蛍光，測定時間：：約2時間, 測定試料：哺乳動物の培養細胞，検出限界：0.1μM，測定波長：励起530 nm／蛍光585 nm。 |
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2021年7月15日号 p.7 ニュース2020年6月1日号 p.5
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| 製品記事 |
BioAssay Systems社 アッセイキット選択ガイド／製品リスト Obesity／Diabetes Research Kits（BioAssay Systems社） |
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