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ホモシトルリン/シトルリン測定キット Cell Biolabs社 Homocitrulline/Citrulline Assay Kit

掲載日情報:2020/04/13 現在Webページ番号:69297

試料中のホモシトルリン(Homocitrulline)またはシトルリン(Citrulline)濃度を比色により簡便に測定するキットです。

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測定例

ヒト尿中のホモシトルリン/シトルリンの検出

ヒト尿中のホモシトルリン/シトルリンの検出

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ホモシトルリン(Homocitrulline)/シトルリン(Citrulline)とは

ホモシトルリン/シトルリンとは (クリックで開閉します)

ホモシトルリン(Homocitrulline)とは

ホモシトルリン(Homocitrulline)は、オルニチン(ornithine)(タンパク質中には見らないが、尿素サイクルに関与する別のアミノ酸)のフリーフォーム代謝産物として哺乳類の代謝に見られるアミノ酸です。カルバミル化のプロセスを介し、ホモシトルリンのアミノ酸残基をタンパク質中に形成することもできます。カルバミル化は、イソシアン酸と高濃度の尿素から自発的に生成されるアミノ基の結合から生じ、主にN末端カルバミル化タンパク質および/またはカルバミル化リジン側鎖(ホモシトルリン残基の形成)の形成につながります(図1A )。尿毒症患者および末期腎疾患患者において、カルバミル化プロセスにつながる高血中尿素濃度が検出されました。ホモシトルリンは、尿素サイクルに障害のある人の尿中で大量に検出されます。

ホモシトリル化(カルバミル化)の機構

図A ホモシトリル化(カルバミル化)の機構

シトルリン(Citrulline)とは

シトルリン(Citrulline)は、構造はホモシトルリンと非常に類似しているアミノ酸ですが、メチレン基が1つ短いのが特徴です。哺乳類では、一酸化窒素シンターゼ(NOS)による一酸化窒素(NO)の酵素的生成中に、遊離アルギニンから遊離シトルリンが生成されます(図1B)。

図B NOによるシトルリン形成機構

図B NOによるシトルリン形成機構

また、シトルリンは尿素サイクルの主要な反応の1つであるオルニチンとリン酸カルバモイルから合成され、アンモニアを排出させます。シトルリンは、通常はタンパク質に組み込まれていませんが、翻訳後修飾によってタンパク質中に見られます。酵素ペプジジルアルギニンデイミナーゼ(PADI, pepdidylarginine deiminase)は、カルシウム存在下でアルギニンをシトルリンに変換できます(図1C)。

図C PADIによるシトルリン形成機構

図C PADIによるシトルリン形成機構

関節リウマチ(RA)患者は、シトルリンを含むペプチドに対する自己抗体を産生することが多いため、PADI酵素が疾患に関与していることが示唆されています。最近、ハプロタイプPADI4がRAへの感受性と関連していることが示されています。ホモシトルリンは、シトルリン化タンパク質/ペプチドを標的とする関節リウマチ抗体の交絡抗原と考えられています。ホモシトルリン含有配列に結合する抗体は、関節リウマチ患者の血清で発見されています。 ホモシトルリン含有タンパク質は、関節リウマチ(RA)関節に存在することも示されています。

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測定原理

測定原理

ホモシトルリン/シトルリンの測定原理

試料をドデシル硫酸ナトリウム(SDS)とプロテイナーゼKで処理し、ホモシトルリン/シトルリン残基を遊離させる。ホモシトルリン/シトルリンと反応し、色素を生成する試薬をウェルに添加し、生じた色素によるOD540~560 nmを測定する。

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特長

  • 測定試料:血清、血漿、尿、細胞培養上清、細胞ライセート
  • フォーマット:96-wellプレート
  • 必要試料量:50μl
  • 測定方法:比色
  • 測定波長:540~560 nm
  • 測定範囲:37.5~2,400μM(ホモシトルリンまたはシトルリン)
  • 検出限界:37.5μM(ホモシトルリンまたはシトルリン)
  • アッセイ数:100 assays

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検量線例

ホモシトルリン検量線例

ホモシトルリン検量線例

シトルリン検量線例

シトルリン検量線例

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キット内容

  • Homocitrulline standard
  • Citrulline standard
  • SDS solution
  • Assay reagent A/B
  • Proteinase K solution

キットには96well マイクロプレートは含まれていません。別途、ご用意下さい。

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引用文献

  1. Park, C.J., et al., Gastroenterology Res., 12(2), 88~92, doi: 10.14740/gr1146 (2019). [PMID:31019618]
    "Serum Citrulline Levels Exhibit Circadian Variation and Fluctuations in Relation to Food Intake in Mice."
  2. Sun, J.T., et al., J. Am. Heart Assoc. 5:e004700.(2016). [PMID:27986757]
    "Cyanate-impaired angiogenesis: association with poor coronary collateral growth in patients with stable angina and chronic total occlusion. "

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関連製品

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品名 商品コード 測定試料 測定方法 測定波長 アッセイ数 製品概要
Homocysteine ELISA Kit STA-670 血清、血漿(EDTA、ヘパリン処理)、組織ホモジネート、細胞ライセート、各種生体液 比色 450 nm 100 assays 試料中のホモシステイン(Homocysteine)を、競合法により定量するELISAキット
Protein Carbamylation Sandwich ELISA Kit STA-877 血清、血漿、細胞ライセート 比色 450 nm
(補正波長 620 nm)
96 assays 試料中のタンパク質のカルバミル化を比色法により測定するキット

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価格

[在庫・価格 :2024年05月04日 14時35分現在]

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詳細 商品名
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納期 文献数
Homocitrulline/Citrulline Assay Kit(100 assays)
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説明文
法規制等 医薬用外劇物
保存条件 室温,-20℃ 法規備考
掲載カタログ

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Homocitrulline/Citrulline Assay Kit(100 assays)

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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