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StemXVivo Neural Progenitor Differentiation Kit
ヒト多能性幹細胞を神経前駆細胞へ分化させるキット StemXVivo Neural Progenitor Differentiation Kit
掲載日情報：2017/08/28 現在Webページ番号：67524
ヒト多能性幹細胞を神経前駆細胞（neural progenitor cell：NPC）に分化させるキットです。分化用培地添加物と分化確認用のマーカー抗体がセットになっています。
ヒトiPS細胞をNPCに分化させた例
本製品を使用してヒトiPS細胞株iPSK3をNPCに分化させた後、分化マーカーの発現を免疫細胞染色により確認した。
（A）分化7日後の明視野像。
（B）抗ヒトSOX1抗体染色像。二次抗体：NorthernLights 557-Conjugated Donkey Anti-Goat Secondary Antibody(#NL001)
（C）抗体ヒトPax6抗体(#AF8150)染色像。二次抗体：NorthernLights 557-Conjugated Donkey Anti-Sheep Secondary Antibody(#NL010)
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特長
- NPCへの分化に最適化された試薬を使用して7日間でNPCを作製できます。
- 高度に均質化されたNPC細胞集団が得られます。
- 得られたNPCはアストロサイトやオリゴデンドロサイト等の多様な神経系サブタイプへの分化誘導が可能です。
- 標準化したプロコトルで高い再現性でのNPCへの分化が行えることにより、コストや時間を節約し、作業の効率化が行えます。
- 260 mlの分化誘導培地を作製するのに充分な量の試薬が含まれています。
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使用例
ヒトiPS細胞由来のNPCを神経細胞、アストロサイト、オリゴデンドロサイトに分化させた例
本製品を使用してヒトiPS細胞株JOY6をNPCに分化させた後、増殖因子除去によりランダムに分化誘導を行い、分化マーカーの発現を免疫細胞染色により確認した。
（A）抗神経細胞特異的βⅢ Tubulin抗体(#MAB1195)で染色された神経細胞。二次抗体：NorthernLights 557-Conjugated Donkey Anti-Mouse Secondary Antibody(#NL007)
（B）抗ヒトGFAP抗体(#AF2594)で染色されたアストロサイト。二次抗体：NorthernLights 557-Conjugated Donkey Anti-Sheep Secondary Antibody(#NL010)
（C）抗ヒトオリゴデンドロサイトマーカーO4抗体(#MAB1326)で染色されたオリゴデンドロサイト。二次抗体：NorthernLights 557-Conjugated Goat Anti-Mouse Secondary Antibody(#NL019)
（左）未分化状態（Undifferentiated）および本製品を使用して分化誘導（StemXVivo Kit）したiPS細胞株iPSK3におけるNPCマーカーSOX1(#AF3369)およびPax6(#AF8150)の発現を免疫染色により確認した。
（右）上記細胞試料におけるSOX1およびPax6陽性細胞量をハイコンテンツイメージング（Operetta, PerkinElmer）により定量した。
本製品により作製したNPCを最大6回まで継代し、未分化iPS細胞、継代3回NPC、継代6回NPCにおけるNestin(#MAB1259)およびN-カドヘリン(#AF6426)の発現を免疫染色により確認した。核染色：DAPI(#5748)
（左）本製品（StemXVivo Kit）および他社製品（Competitor 1, 2）を使用して分化誘導したiPS細胞株JOY6におけるNPCマーカーSOX1およびPax6の発現を免疫染色により確認した。
（右）上記細胞試料におけるSOX1およびPax6発現量をHigh Content Analysisにより定量した。
本製品はSOX1およびPax6発現NPSを他社製品よりも高い割合で得られた。
未分化状態のiPS細胞株JOY6および本製品により作製したNPCにおけるOct-3/4およびPax6発現を、Milo Single-cell Western Technology（ProteinSingle）により1細胞レベルで検出した。
結果として、未分化状態のiPS細胞株は同時にOct-3/4を発現した。本製品により作製したNPCはPax6発現でOct-3/4発現は欠損していた。
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操作法概略
- プレートにBasement Membrane Extract（BME）を加え、1～2時間インキュベートしてコートする。
- コートしたプレートにヒト多能性幹細胞を播種し、維持培地で80～90％コンフルエントになるまで培養する。
- 維持培地から完全NPC分化培地に培地交換し、18～24時間培養する。
- 24時間ごとに培地交換し、1～7日間培養する。
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キット内容
- NPC differentiation base media supplement
- NPC differentiation cocktail I
- Anti-human SOX1
※ キットに細胞や培地、BME、培養用プレートは含まれていません。別途ご用意下さい。
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参考文献
- Tabar, V. and Studer, L., Nature Rev. Genetics, 15, 82～（2014）.
- Kelava, I. and Lancaster, M., Cell Stem Cell, 17, 736～（2016）.
- Marchetto, M.C., et al., Human Molecular Genetics, 20, R109～（2011）.
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価格
[在庫・価格 ：2024年05月09日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||
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StemXVivo Neural Progenitor Differentiation Kit |
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[在庫・価格 ：2024年05月09日 00時00分現在]
StemXVivo Neural Progenitor Differentiation Kit
文献数： 0
- 商品コード：SC035
- メーカー：RSD
- 包装：1kit
- 価格：¥67,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：医薬用外毒物
| 説明文 |
ヒト多能性幹細胞を神経前駆細胞（neural progenitor cell：NPC）に分化させるキット。分化用培地添加物と分化確認用のマーカー抗体がセットになっている。キット内容：NPC differentiation base media supplement, NPC differentiation cocktail I, Anti-human SOX1。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | 医薬用外毒物 | ||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2021年5月15日号 p.8 ニュース2020年6月15日号 p.8
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| 製品記事 |
神経科学特集 |
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