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遺伝子発現に新たな選択肢!センダイウイルスベクター 作製受託サービス

掲載日情報:2023/09/15 現在Webページ番号:65978

Frontiers

Vol.94 遺伝子発現に新たな選択肢!センダイウイルスベクター 作製受託サービス

(株)レプリテックは、遺伝子ベクター技術や再生医療技術を有するバイオベンチャー企業です。
次世代型ウイルスベクターとしてセンダイウイルスベクターに着目し、従来の課題であった再構成効率を 1,000 倍以上改善させたベクターの開発に成功しました。

遺伝子発現の新たな選択肢:センダイウイルス

センダイウイルス(SeV)は、1950 年代に東北大学で分離された日本発のウイルスで、1990 年代にベクター化されました。 SeV ベクターは細胞膜上のシアル酸を利用して感染しており、 ほとんどの哺乳動物細胞において、分裂・非分裂を問わず遺伝子導入ができます。

また、細胞質発現型の RNA ベクターであり、iPS 細胞の作製、 細胞の分化転換、リコンビナーゼの一過性発現などに適しています。 原理的に宿主の染色体に組み込まれないといった安全面の特長 から、遺伝子ワクチン用のベクターや遺伝子治療用の開発ツールとしても注目されています。


SeV は導入細胞質内でレプリコンを複製するため、高い遺伝子 発現が期待できます。SeV ベクターとレンチウイルスベクター (LV)の遺伝子発現効率を蛍光タンパク質の輝度を指標に複数 の細胞で比較すると、SeV ベクターが数十倍から数百倍高くなります。

SeVベクターとレンチウイルスベクターの遺伝子発現比較

再構成効率の問題を克服し、安定的にご提供

SeV ベクターの調製には、SeV の RNA ゲノムと構成タンパク 質が必須であり、ヘルパープラスミドや産生細胞からの供給が 必要です。産生細胞内にこれらを遺伝子導入することで SeV が再構成されます。しかしながら、SeV が属するパラミクソウ イルスは再構成の効率が低いことが知られており、十分な感染 力価を得るためには時間を要します。

この点が、SeV ベクター技術の普及を妨げている課題の一つで した。 (株)レプリテックでは、SeV ベクターの再構成効率を向上 させ、簡便に SeV ベクターが得られるシステムの開発に成功 しました。 再構成効率は従来の SeV ベクター技術と比較すると 1,000 倍 以上向上しています。また、再構成開始 3 日目の 培養上清を標的細胞に感染させた場合においても、従来技術を はるかに上回る高力価のベクター上清が得られています。再構成効率の向上により、手間と時間を短縮でき、こ れまで使用のハードルが高かった SeV ベクターの安定的な提 供が可能となりました。

再構成効率および感染力価の向上

(株)レプリテックのセンダイウイルスベクター

SeV から細胞への侵入に必要な F 遺伝子を欠失させており、二次感染を生じない非伝播型ウイルスベクターです。

SeV ベクターの作製方法

F 遺伝子を欠失させたSeV ゲノムプラスミドとパッケージングプラスミドを、F 遺伝子を発現する産生細胞に導入することでF 欠失型SeV ベクターが得られる。F 欠失型SeV ベクターは標的細胞に感染するが、F 遺伝子を欠失しているため、一度は感染できるがその後の二次感染はない。


ご希望の遺伝子配列を搭載したセンダイウイルスベクターを作製します

(株)レプリテックの SeV ベクターは細胞傷害性を低減する 変異を導入しており、長期発現が可能です。また、従来の SeV ベクターより迅速に細胞からベクターが消失する温度感受性ベクターを複数開発しています。これらのベクターは温度シフト を行うことでベクターの消失を実現しており、導入遺伝子の一過性発現が可能です。 SeV ベクターのパッケージングシステム提供を目指し、さらに 開発を進めています。


慶應義塾大学医学部生理学教室(岡野栄之教授)と (株)レプリテックの共同研究成果として、センダイウイルスベクターを用いた SARS-CoV-2 経鼻ワクチンの開発 についての論文が Genes to Cells 誌に掲載されました。

  • Morimoto, S., et al., Genes Cells, 28 (1), 29~41(2023). PMID:36401755

センダイウイルスベクター作製受託サービス

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レプリテック

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