恒常的発現／一過性発現用レンチウイルスパッケージングキット Lentiviral Packaging Kit
掲載日情報：2017/04/03 現在Webページ番号：65567
第3世代のレンチベクターをウイルス粒子にパッケージングし、哺乳動物細胞内において目的のレンチウイルスコンストラクトを発現させるキットです。恒常的発現用（Lenti-vpak）と一過性発現用（IDLV：integration-deficient lentiviral particle）の2種類から目的に応じて選択いただけます。
左図：Lentiviral Packaging Kitの操作方法概略
右図：正常レンチウイルス（WT）（#TR30037）またはインテグレーション欠損ウイルス（IDLV）(#TR30036)を用いて作製したGFPレンチウイルスをHEK293細胞に形質導入した。GFPポジティブ細胞をフローサトメトリーで測定した。
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OriGene社のレンチウイルス関連製品
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| 品名 | 商品コード | 包装 | 製品概要 |
|---|---|---|---|
| Lenti ORF Clone | － | － | ヒト、マウスまたはラットのcDNA配列のうち、ORF（タンパク質をコードした部分）のみをレンチウイルス発現用ベクターに組み込んだcDNAクローンコレクションです。 |
| LentiORF Particles | － | － | ヒト、マウスまたはラットの目的遺伝子を、第3世代レンチウイルス粒子に予め組み込んだ製品です。Ready-to-useのフォーマットで、細胞に添加するだけで初代細胞などのトランスフェクションが困難な細胞にも簡便、迅速にほぼ100％の導入効率を得ることができます。 |
|
Lentiviral Packaging Kit Lenti-vpak （恒常発現用） |
TR30037 | 10/50 reactions | 多くの哺乳動物細胞内において第3世代のレンチベクターをウイルス粒子にパッキングし、目的のレンチウイルスコンストラクトを発現させるキットです。恒常的発現用と一過性発現用の2種類から、目的に応じて最適な方をご選択いただけます。 |
|
Lentiviral Packaging Kit IDLV （一過性発現用） |
TR30036 | ||
| TurboFectin Transfection Reagent | TF81001 | 1 ml | 真核細胞への核酸導入用トランスフェクション試薬です。DNAおよびshRNAを高効率で細胞へ導入できます。多くの細胞種に適用可能です。 |
| Lenti Concentrator | TR30025 | 50 ml | 低力価のウイルス粒子を、混合と遠心分離するだけの簡便な操作で最大100倍まで濃縮することができる試薬です。 |
| TR30026 | 4×50 ml |
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製品ラインナップ
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| 品名 | Lentiviral Packaging Kit | |||
|---|---|---|---|---|
| Lenti-vpak | IDLV | |||
| 包装 | 10 reactions | 5×10 reactions | 10 reactions | 5×10 reactions |
| 商品コード | TR30037 | TR30037P5 | TR30036 | TR30036P5 |
| 発現細胞 | 全哺乳動物細胞（幹細胞、初代培養細胞、神経細胞を含む） | |||
| 遺伝子 発現タイプ |
恒常的発現（constitutive） | 一過性発現（transient） | ||
| ウイルス 力価*1 |
2.9×107 TU/ml | 2.7×107 TU/ml | ||
| 発現システム |  |
 |
||
| キット内容 | Packaging plasmid*2 | |||
| TurboFectin | ||||
| 製品概要 | 目的遺伝子を含むpLenti-shRNAまたはpLenti-ORFを、本製品のPackaging vectorとともに宿主細胞にco-transfectionすることにより、目的遺伝子がパッケージングされる。産生されたPseudoviral particleを標的細胞へ導入すると、目的遺伝子が核内染色体に組み込まれ、目的タンパク質を恒常的に発現します。そのため、目的タンパク質を高発現する際に有用です。 | 目的遺伝子を含むpLenti-shRNAまたはpLenti-ORFを、本製品のPackaging vectorとともに宿主細胞にco-transfectionすることにより、目的遺伝子がパッケージングされる。産生されたPseudoviral particleを標的細胞へ導入すると、目的遺伝子が核内染色体に取り込まれず、目的タンパク質を一過的に発現します。Cas9やsgRNAによるゲノムの切断など、一過性発現が好ましい場合に有用です。 | ||
*1 Lenti vectorとしてpLenti-C-GFP（下図参照）を使用し、Lenti-vpak(#TR30037)またはIDLV(#TR30036)で HEK293T細胞にパッケージングを行った場合のウイルス力価。
*2 キットにより内容が異なります。
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特長
- 高力価のウイルス粒子を産生できます。
- キットには、多くの哺乳動物にDNAおよびshRNAを高効率で導入できるトランスフェクション試薬TurboFectin（#TF81001）が含まれています。
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使用例
tRFPを標的としたIDLV Cas9/gRNAのHEK-293-RFP細胞のウエスタンブロット像
tRFPを標的としたLenti-vpak Cas9/gRNAまたはIDLV Cas9/gRNAを、RFP発現細胞に導入した。導入3週間後にシングルセルコロニーにおけるRFPの発現をウエスタンブロットにより検証した。IDLV（右図）はLV（左図）同様に細胞におけるREF遺伝子のノックアウトがされているが、Cas9は検出されないことが示された。
Scramble control：RFP(+), RFP gRNA cell：RFP(-)
tRFPを標的としたIDLV Cas9/gRNAのHEK-293-RFP細胞への導入例
ネガティブコントロールとしてscramble gRNA(右図)を用いた。形質導入2週間後にシングルセルコロニーを単離した。RFPノックアウト細胞を緑色丸印で示した。
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FAQ
Q-1. Integration-deficient Lentiviral Particles (IDLV)について教えて下さい。
A-1. IDLVは、宿主ゲノムへの取り込み能を欠損したウイルス粒子で、Lenti IDLV Packaging Kit (#TR30036)を用いることで作製できます。
Q-2. IDLVは通常のレンチベクターと同様の細胞型に感染しますか？
A-2. はい。宿主細胞のスペクトルは変化しません。
Q-3. IDLVを媒介した遺伝子発現／ノックダウンは一過性ですか？
A-3. はい。レンチベクターは宿主細胞のゲノムには組み込まれないため、形質導入後1週間にはなくなります。
Q-4. IDLVはどのようなアプリケーションに利用できますか？
A-4. 一過性発現が必要で、かつ長期的またはゲノムへの挿入を避けたい場合に有用です。CRISPRによるゲノム編集において、IDLVはCRISPR / Cas9およびドナーベクターを送達するために使用することができます（使用例参照）。
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価格
[在庫・価格 ：2024年05月02日 17時35分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Lenti-vpak packaging kit - packaging plasmids and transfection reagent |
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32 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Lenti-vpak packaging kit - packaging plasmids and transfection reagent, 5 packs |
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1 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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IDLV Lenti packaging kit, integration deficient- packaging plasmids and transfection reagent |
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0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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IDLV Lenti packaging kit, integration deficient- packaging plasmids and transfection reagent, 5 packs |
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0 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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[在庫・価格 ：2024年05月02日 17時35分現在]
Lenti-vpak packaging kit - packaging plasmids and transfection reagent
文献数： 32
- 商品コード：TR30037
- メーカー：ORI
- 包装：10tests
- 価格：¥228,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
※専用注文書でご注文下さい。 第3世代のレンチベクターをウイルス粒子にパッケージングし，哺乳動物細胞内において目的のレンチウイルスコンストラクトを発現させるキット。恒常的発現用（Lenti-vpak）。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2018年12月1日号 p.25
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| 製品記事 |
Lenti Concentrator Human/Mouse/Rat Lenti ORF Clone ハンチントン病研究用製品（Origene社） |
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Lenti-vpak packaging kit - packaging plasmids and transfection reagent, 5 packs
文献数： 1
- 商品コード：TR30037P5
- メーカー：ORI
- 包装：1kit
- 価格：ご照会ください
- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
※専用注文書でご注文下さい。 第3世代のレンチベクターをウイルス粒子にパッケージングし，哺乳動物細胞内において目的のレンチウイルスコンストラクトを発現させるキット。恒常的発現用（Lenti-vpak）。 |
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| 保存条件 | 法規備考 | ||
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- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
※専用注文書でご注文下さい。 第3世代のレンチベクターをウイルス粒子にパッケージングし，哺乳動物細胞内において目的のレンチウイルスコンストラクトを発現させるキット。一過性発現用（IDLV）。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
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- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
※専用注文書でご注文下さい。 第3世代のレンチベクターをウイルス粒子にパッケージングし，哺乳動物細胞内において目的のレンチウイルスコンストラクトを発現させるキット。一過性発現用（IDLV）。 |
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| 法規制等 | |||
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TurboFectin Transfection Reagent |
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2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
[在庫・価格 ：2024年05月02日 17時35分現在]
TurboFectin Transfection Reagent
文献数： 89
- 商品コード：TF81001
- メーカー：ORI
- 包装：1ml
- 価格：¥167,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 別包装品 | 別包装品あり | ||||||
| 法規制等 | |||||||
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真核細胞への核酸導入用トランスフェクション試薬 Turbofectin 8.0 |
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