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核酸／ウイルスのin vivo導入が可能なMagnetofection試薬 In vivo用トランスフェクション試薬 In vivo Magnetofection Kit

掲載日情報：2015/02/20 現在Webページ番号：6188

オズ バイオサイエンス /
OZ Biosciences
[メーカー略称：OZB]

核酸／ウイルスのin vivo導入に最適なトランスフェクションキットです。核酸と試薬の混合液を、実験動物に注射（静脈、腹腔、脳内）し、磁力により組織へ導入します。

※ご注意
導入には専用マグネットが必要です。 Trial Kit, Starting Kit 以外の製品には含まれておりませんので、別途お求め下さい。

※トランスフェクション試薬をお探しの方必見! トランスフェクション試薬選択ガイドはこちらをご覧ください。

※In vitro 用のMagnetofection試薬も多数取りそろえています。
PolyMag/CombiMag
ViroMag/ViroMag R/L
SilenceMag

※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
※ペースメーカーを装着されている方は、本製品のご使用は避けて下さい。

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In vivoトランスフェクションキットの特長

共通

  • 導入効率が優れているため、導入に用いる核酸／ウイルス量を抑えることができます。
  • 磁気を利用することにより、核酸／ウイルスの導入部位をターゲティングすることが可能であり、導入中に核酸／ウイルスが生体に拡散するのを防ぎます。
  • 細胞毒性を低減させることができます。
  • すべての核酸およびウイルスベクターに使用できます。
  • 核酸／磁気粒子複合体、またはウイルス／磁気粒子複合体を様々な方法で容易にin vivo導入できます。
  • 導入方法：全身投与（静脈、動脈）、局所投与（腹腔、腫瘍、脳室、筋肉）

In vivo PolyMag

  • カチオン性ポリマーをベースとした磁気粒子を用いるMagnetofection試薬です。
  • 様々な核酸（プラスミドDNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、mRNA、shRNA、siRNAなど）に使用できます。
  • 使用量：1μl/μg DNA

In vivo DogtorMag

  • カチオン性脂質をベースとした磁気粒子を用いるMagnetofection試薬です。
  • カチオン性脂質のDogtorと、磁気粒子CombiMagを組み合わせています。
  • 様々な核酸（プラスミドDNA、アンチセンスオリゴヌクレオチド、mRNA、shRNA、siRNAなど）に使用できます。
  • 使用量：1μl/μg DNA

In vivo ViroMag

  • ウイルスベクターの導入に最適化された磁気粒子を用いるMagnetofection試薬です。
  • 特に、レンチウイルス、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス（AAV）などのウイルスベクターに適しています。
  • 使用量：10～20μl/1×106ウイルス粒子

In vivo SilenceMag

  • siRNAやmiRNAなどのsmall RNAの導入に最適化された磁気粒子を用いるMagnetofection試薬です。
  • 高い発現抑制効果が得られます。
  • 使用量：1 μl/μg RNA

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試薬の推奨使用量（核酸／ベクターの導入）

※下記は参考値です。実験に合わせて、最適な導入条件を検討して下さい。
※マウス（体重20 g）へ導入した場合の例です。

標的組織 導入ルート 導入部位 導入量
（核酸量／試薬量＊）		 マグネットの形状 マグネットの
使用部位
腫瘍 ・静脈
・腫瘍内		 ・尾静脈
・腫瘍部位		 ・40μg/200μl
　（10～50μg in 0.5μl/mm3）		 全種類 ・体外（皮下腫瘍、脳腫瘍、局所化した腫瘍の場合）
・体内（臓器内腫瘍の場合）
血管内皮細胞 ・静脈
・動脈		 ・耳動脈
　（ウサギ）
・大腿動脈
　（マウス）		 ・400μg/1.5 ml
　（ウサギ）
・5μg/200μl
　（マウス）		 全種類 ・体外（耳動脈の場合）
・体内（深部血管の場合）
心臓 ・静脈
・動脈		 ・尾静脈
・頚動脈		 ・50μg/200μl Cylinderタイプ ・体外
・体内
肝臓 ・静脈
・動脈		 ・尾静脈
・頚動脈		 ・40μg/200μl Cylinder、Squareタイプ ・体外
・体内
肺 ・静脈 ・尾静脈 ・40μg/200μl Squareタイプ ・体外
腸 ・回腸内腔 ・腸
　（ラット）		 ・200μg/1 ml Cylinder、Squareタイプ ・体内
脳 ・脳室内 ・脳室 ・0.5μg/2μl Small Cylinderタイプ ・体外

＊In vivo PolyMagまたはIn vivo Dogtor

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In vivo操作方法概略

※インキュベーション時間は、導入に用いる動物の種類、標的組織の種類、導入方法、使用するマグネットの種類によって異なります。

皮下腫瘍への遺伝子デリバリーを目的とした静脈内インジェクション

皮下腫瘍への遺伝子デリバリーを目的とした静脈内インジェクション

1. マウスを麻酔する。

2. DNAとDogtorを混合する。

3. 室温で5分間インキュベートする。

4.2.とIn vivo CombiMagを混合する。

5. 室温で20分間インキュベートする。

6. 尾静脈に4.の混合液をゆっくりと注入する。

7. 注入中に、Cylinder magnetを腫瘍表面に1分置き、注入後さらに15分間静置する。

8. 24時間後に解析する。

心臓への遺伝子デリバリーを目的とした静脈内インジェクション

心臓への遺伝子デリバリーを目的とした静脈内インジェクション

1. マウスを麻酔させた後、挿管し人工呼吸させる。

2. 左開胸によって心臓を露出させる。

3. Cylinder magnetをマウスの心臓から肺の間に置く。

4. DNAとIn vivo PolyMagを混合する。

5. 室温で20分間インキュベートする。

6. 尾静脈に 5. を注入する。

7. Cylinder magnetとマウスを20分間静置させる。

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試薬の推奨使用量（ウイルスの導入）

※下記は参考値です。実験に合わせて最適な導入条件を検討して下さい。
※マウス（体重20 g）へ導入した場合の例です。

ウイルスの種類 ウイルス粒子力価
（プラーク形成単位）		 In vivo ViroMag
使用量（μl）
アデノウイルス 1×106～5×108 10～20
アデノ随伴ウイルス 1×106～1×1010 10～20
レンチウイルス 1×106～5×108 10～20

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In vivoトランスフェクションキットの操作方法概略

※インキュベーション時間は、導入に用いる動物の種類、標的組織の種類、導入方法、使用するマグネットの種類によって異なります。

ラット胚の脳室内へのインジェクション

ラット胚の脳室内へのインジェクション

1. 妊娠ラット（15日胚）を麻酔する。

2. アデノウイルス粒子とIn vivo ViroMagとDyeを混合する。

3. 室温で15～30分間インキュベートする。

4. 子宮角を露出させる。

5. ガラスキャピラリーとマイクロインジェクターを用いて、マウス胚の脳に2.の混合液を注入する。

6. Small cylinder magnetを胚の頭蓋に30秒間あてる。

7. 術後、子宮角をラット母体に戻す。

8. 2日後に解析する。

肝臓への遺伝子デリバリーを目的とした動脈内インジェクション

肝臓への遺伝子デリバリーを目的とした動脈内インジェクション

1. マウスを麻酔する。

2. レンチウイルス粒子とIn vivo ViroMagを混合する。

3. 室温で20分間インキュベートする。

4. 肝臓に近い右側の腹壁に、Square magnetを置く。

5. カテーテルを用いて、頚動脈に 2.の混合液を注入する。

6. Square magnetとマウスを30分間静置させる。

7. 48時間後に解析する。

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試料に適したマグネットの種類

In vivo Magnetofection Kit    試料に適したマグネットの種類

マグネットの種類 トランスフェクションに適した組織
Extra small cylinder
（φ2×5H mm）		 ・脳
・内皮細胞
・小腫瘍
・リンパ節
・卵巣
・副腎
Small cylinder
（φ5×5H mm）		 ・皮下腫瘍
・唾液腺
・脳
Cylinder
（φ10×5H mm）		 ・皮下腫瘍
・膵臓
・脾臓
Square
（18×18 mm）		 ・サイズの大きな臓器
・大きな腫瘍
・筋肉
・肺
・皮膚弁

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使用実績

標的組織 動物種 導入試料 試薬種類 導入ルート 使用文献
（下記リストNo.参照）
核酸／ベクターの導入
耳動脈 ウサギ DNA In vivo PolyMag 動脈 1
ブタ
筋血管 マウス オリゴヌクレオチド In vivo PolyMag 動脈 2
心筋 ブタ DNA In vivo PolyMag 動脈 ―
心筋／
内皮細胞		 マウス DNA In vivo PolyMag 静脈 10
乳癌細胞 ハムスター DNA In vivo PolyMag 腫瘍内 4
線維肉腫 ネコ DNA In vivo PolyMag 腫瘍内 4 , 5 , 6 , 7
皮下腫瘍 マウス DNA In vivo Dogtor 腫瘍内 8
腸 ラット DNA In vivo PolyMag 腸内腔 3
泌尿生殖隆起 マウス DNA In vivo Dogtor ex-vivo 9
肺 マウス DNA In vivoo PolyMag 噴霧 12
皮膚 マウス DNA In vivo PolyMag 皮下 11
ウイルスの導入
胚の脳 ラット レトロウイルス In vivo ViroMag 脳室内 13
レンチウイルス 14
胃 マウス アデノウイルス In vivo ViroMag 胃内腔 3
心臓 ラット レンチウイルス In vivo ViroMag ex-vivo 15
内皮細胞 マウス レンチウイルス In vivo ViroMag ex-vivo 16
small RNAの導入
皮下腫瘍 マウス siRNA In vivo SilenceMag 腫瘍内 ―

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使用文献

1. Plank, C., et al., Expert Opin. Biol. Ther., 3, 745～758 (2003).
2. Krötz, F., et al., Mol. Ther., 7, 700～710 (2003).
3. Scherer, F., et al., Gene Ther., 9, 102～109 (2002).
4. Schillinger, U., et al., J. Mag. Mag. Mater., 293, 501～508 (2005).
5. Schillinger, U., et al., Mol. Ther., 13 (1), 105 (2006).
6. Jahnke, A., et al., J. Vet. Med. A Physiol. Pathol. Clin. Med., 54, 599～606 (2007).
7. Hüttinger, C, et al., J. Gene Med., 10, 655～667 (2008).
8. Svingen, T., et al., Dev. Dyn., 238 (4), 956～964 (2009).
9. Wang, C., et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 410, 537～542 (2011).
10. Li, W., et al., Nanomed., 311, 336～341 (2007).
11. Holzbach, T., et al., J. Cell. Mol. Med., 14, 587～599 (2010).
12. Dames, P., et al., Nat. Nanotechnol., 2 (8), 495～499 (2007).
13. Sapet, C., et al., Pharm. Res., 29 (5), 1203～1218 (2012).
14. Sapet, C., et al., Drug Delivery Technol., 10, 24～29 (2010).
15. Burdorf, L., et al., Xenotransplantation, 14, 372 (2007).
16. Hofmann, A., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 106, 44～49 (2009).

ユーザーレビュー

■In vivo DogtorMag
“Systemic delivery and activation of the TRAIL gene in lungs, with magnetic nanoparticles of chitosan controlled by an extrenal magnetic field.”
—Ungureanu B.S. et al - Int.J.Nanomedicine. 2016

■In vivo PolyMag
“Neuron-derived neurotrophic factor functions as a novel modulator that enhances endothelial cell function and revascularization processes.”
—Ohashi K. et al - J Biol Chem. 2014

■In vivo ViroMag
“Brain infection with Lentivirus “Virus stamping for targeted single-cell infection in vitor and in vivo.”
—Schubert R. et al - Nature Biotechnol. 2018

“Magnetic nanoparticles for efficient cell transduction with Semliki Forest virus.”
 —Kurena B. et al - J Viral Methods. 2017

■In vivo SilenceMag
“Kidney-specific Csf2 knockdown. In vivo gene silencing achieved by transfecting siRNA using in vivo SilenceMag.”
—Fujiu K. et al - Nature Medicine. 2017

““In vivo SilenceMag enables to knock-down hVEGF expression into tumors bringing angiostatic & antitumoral effects.””
Chen et al - BMC Cancer. 2014

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使用例

In vivoトランスフェクションキットの使用例1

レポーター遺伝子としてルシフェラーゼを組み込んだ発現ベクターを、本製品を用いて組織に導入し、42時間後にルシフェラーゼの発現量を測定した。マグネットを設置した部位（赤）の発現量が最も多く、マグネットから離れた部位（青、緑）では発現量が少なかった。コントロールとしてマグネットを用いなかった例では、ルシフェラーゼの発現が見られなかった。

In vivoトランスフェクションキットの使用例2

子宮内のラット胚（E16）の側脳室に、GFP-レンチウイルス(109粒子)とIn vivo ViroMagを混合物を注入してから8日後の脳切片を観察した。
（A）GFPが脳全体で発現した。
（B）、（C）導入時にマグネットを使用すると、マグネットを当てた標的部位にウイルス粒子の蓄積が生じ、局所的なGFP発現が観察された。（B）は、胚の頭蓋表面にMagnetをあてた。（C）は、脳の端からMagnetをあてた。

In vivoトランスフェクションキットの使用例3

ラット腸に、In vivo PolyMagを用いて、lac Z遺伝子をコードしたプラスミドを導入した。導入して48時間後に、X-Gal染色を行い、lac Z遺伝子の発現を確認した。
（A）導入時にマグネットを使用しなかった場合、 lac Z遺伝子の局所的な発現は認められなかった。
（B）導入時にマグネットを使用した場合、腸においてlac Z遺伝子が局所的に発現した。

In vivoトランスフェクションキットの使用例4

マウス皮下腫瘍にIn vivo SilenceMagを使用してVEGFに対するsiRNAを導入し、腫瘍の増殖を体積測定により解析した。

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In vivo Magnetofectionスターティングキット


[在庫・価格 ：2024年04月20日 00時00分現在]

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In vivo PolyMag Starting Kit
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In vivo PolyMag（500μl）と，Magnet Set（#IV-MAG1）を含む。
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In vivo Dogtor（500μl）とIn vivo CombiMag（500μl），Magnet Set（#IV-MAG1）を含む。
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In vivo Magnetofectionトライアルキット


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In vivo Magnetofection試薬


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In vivo PolyMag 500

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専用マグネット

[在庫・価格 ：2024年04月20日 00時00分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
 納期 文献数
in vivo Magnets Set
 10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 30
説明文
Extra small cylinder（φ2 mm），Small cylinder（φ5 mm），Cylinder（φ10 mm），Square（18×18 mm）タイプのマグネットをそれぞれ1個ずつ含む。
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年8月15日号 p.7
ニュース2017年7月1日号 p.7

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in vivo Square magnets Set
 10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 1
説明文
Square（18×18 mm）タイプのマグネットを4個含む。
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年8月15日号 p.7
ニュース2017年7月1日号 p.7

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in vivo Cylinder magnets Set
 10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 1
説明文
Extra small cylinder（φ2 mm），Small cylinder（φ5 mm），Cylinder（φ10 mm）タイプのマグネットをそれぞれ4個ずつ含む。
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年8月15日号 p.7
ニュース2017年7月1日号 p.7

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[在庫・価格 ：2024年04月20日 00時00分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

in vivo Magnets Set

文献数： 30

説明文 Extra small cylinder（φ2 mm），Small cylinder（φ5 mm），Cylinder（φ10 mm），Square（18×18 mm）タイプのマグネットをそれぞれ1個ずつ含む。
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年8月15日号 p.7
ニュース2017年7月1日号 p.7

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in vivo Square magnets Set

文献数： 1

説明文 Square（18×18 mm）タイプのマグネットを4個含む。
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年8月15日号 p.7
ニュース2017年7月1日号 p.7

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文献数： 1

説明文 Extra small cylinder（φ2 mm），Small cylinder（φ5 mm），Cylinder（φ10 mm）タイプのマグネットをそれぞれ4個ずつ含む。
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年8月15日号 p.7
ニュース2017年7月1日号 p.7

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お問い合わせ先

（テクニカルサポート 試薬担当）

reagent@funakoshi.co.jp

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