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膜タンパク質を高密度に保持した脂質粒子 ReadyReceptor Lipoparticle

掲載日情報:2017/12/27 現在Webページ番号:6120

GPCR(Gタンパク質共役型レセプター)やイオンチャネルなどの膜タンパク質レセプターを保持した脂質粒子(Lipoparticle)です。一般的に使用されている膜タンパク質安定発現細胞株や、膜タンパク質調製画分よりも高密度にタンパク質を発現しており、様々な目的に適用可能です。

特長

  • Lipoparticleはレトロウイルスの出芽システムをベースに形成された、感染力のないウイルス様粒子です。コアタンパク質としてGagを有し、目的膜タンパク質を過剰発現させた宿主細胞を介して出芽します。宿主細胞の脂質二重膜をそのまま用いるため、Lipoparticleの膜タンパク質は正しい配向性を保持しています。
  • 通常の膜タンパク質安定発現細胞株や膜タンパク質調製画分と比較すると、およそ10~100倍高い密度で膜タンパク質を保持しています(50~200 pmol/mg)。
  • 粒径は約150 nmで、ばらつきがなく均一です。
  • 膜調製画分のように界面活性剤などを使用しないため、Lipoparticleの膜タンパク質は生理機能を有しており、様々なアプリケーションに使用できます。
  • 未標識品と、ビオチン標識品、蛍光標識品があります。ビオチンまたは蛍光で標識したLipoparticleは、ビーズやプレートにコーティングできるため、フローサイトメトリーやELISA、アレイ解析、ファージ・酵母ディスプレイなどに応用できます。
  • 各種GPCRやイオンチャネル、トランスポーター、ウイルスタンパク質を保持した製品があります。
  • 各膜タンパク質を保持したLipoparticle(10,000 units)に、膜タンパク質を保持していないコントロール用Null Lipoparticle(2,000 units)が添付されています。
  • CXCR4、CCR5、CD20については、レセプターを保持したLipoparticle(400 units)と、Null Lipoparticle(400 units)をセットにした「Sample Kit」もあります。

Lipoparticleは目的膜タンパク質を過剰発現させた細胞を介して、感染力のないウイルス様粒子として産生される。

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アプリケーション例

  • 抗膜タンパク質抗体作製のための免疫原
  • ELISAによるハイブリドーマスクリーニング
  • バイオセンサーによる抗体のカイネティックアッセイ
  • リガンドバインディングアッセイ
  • ファージおよび酵母のディスプレイライブラリー

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使用例

免疫原としての利用

各種Lipoparticleを免疫原として採取した抗血清を用いてウエスタンブロットを行った。目的タンパク質を特異的に認識する抗血清が得られた。

ハイブリドーマスクリーニングへの利用

CXCR4 Lipoparticleを免疫原として作製したハイブリドーマを、各種Lipoparticleを用いた化学発光ELISAによってスクリーニングした。

Lipoparticleと膜タンパク質調製画分の比較

GPCRの一種であるセロトニンレセプター5HT1Aを過剰発現させたHEK293細胞を用いて、Lipoparticleと膜タンパク質調製画分を作製した。Lipoparticle(A)と膜タンパク質調製画分(B)それぞれを、動的光散乱法(Dynamic light scattering:DLS)と電子顕微鏡観察により解析した。Lipoparticleの粒子径が均一で(~150 nm)、精製度も高いことがわかる。

蛍光プローブを用いたGPCR活性のモニタリング

GPCRの一種であるセロトニンレセプター5HT1Aを過剰発現させたHEK293細胞を用いて、Lipoparticle(A)と膜タンパク質調製画分(B)を作製した。蛍光GTPアナログを用いてレセプターシグナリングアッセイを行った。5HT1Aにリガンドである5HTが結合し、GTPアナログが活性型Gタンパク質に結合すると蛍光を発する。Lipoparticleではリガンド特異的な5HT1Aの活性化が見られたが、膜タンパク質調製画分では見られなかった。これは膜タンパク質調製画分に、非特異的な細胞成分が混入しているためと考えられる。

ビオチン標識Lipoparticleの抗体スクリーニングと結合アッセイへの応用

左図:ビオチン標識CXCR4 Lipoparticleを、ストレプトアビジンコートしたプレートに濃度を変えて結合させ、抗CXCR4抗体を用いてELISAを行った。
右図:ビオチン標識CXCR4 Lipoparticleを、ストレプトアビジンコートしたバイオセンサーチップに結合させ、抗CXCR4抗体の標的結合能についてカイネティックアッセイを行った。

FITC標識CXCR4 LipoparticleをWGAコーティングアガロースビーズに固定化し、蛍光顕微鏡で観察した(励起485 nm/蛍光535 nm)。抗CXCR4抗体を用いた免疫染色でも検出できる(左下図、赤色)。

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製品ラインナップ

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ReadyReceptor Lipoparticle

  • 包装:10,000 units
  • 価格:ご照会下さい

2,000 unitsのNull Lipoparticleが添付されます。

下記項目をクリックすると、該当製品をご覧いただけます。

GPCR イオンチャネル レセプターチロシンキナーゼ(RTK)
膜1回貫通型タンパク質 膜4回貫通型タンパク質 ウイルスタンパク質
トランスポーター

レセプタークラス 種類 レセプター名 商品コード
未標識 ビオチン 蛍光
GPCR αアドレナリンレセプター A2AR RR-0910 RR-0910B RR-0910F
βアドレナリンレセプター B2AR RR-0574 RR-0574B RR-0574F
補体レセプター C5aR RR-0362 RR-0362B RR-0362F
カルシウム感受性レセプター CaSR RR-0562 RR-0562B RR-0562F
ケモカインレセプター CCR1 RR-0968 RR-0968B RR-0968F
CCR2b RR-0125 RR-0125B RR-0125F
CCR5(Human) RR-0190 RR-0190B RR-0190F
CCR5(Mouse) RR-0835 RR-0835B RR-0835F
CCR5(Rhesus) RR-0895 RR-0895B RR-0895F
CCR6 RR-0822 RR-0822B RR-0822F
CCR10 RR-0193 RR-0193B RR-0193F
CXCR2 RR-0943 RR-0943B RR-0943F
CXCR3 RR-0132 RR-0132B RR-0132F
CXCR4(Human) RR-0830 RR-0830B RR-0830F
CXCR4(Mouse) RR-2194 RR-2194B RR-2194F
CXCR5 RR-0930 RR-0930B RR-0930F
CXCR7 RR-0656 RR-0656B RR-0656F
グルカゴン様ペプチド-1レセプター GLP-1R RR-1090 RR-1090B RR-1090F
グルカゴンレセプター GCGR RR-0999 RR-0999B RR-0999F
ニューロペプチドレセプター Galanin-1 RR-1067 RR-1067B RR-1067F
セロトニンレセプター 5-HT2C RR-1498 RR-1498B RR-1498F
Wnt経路 Fizzled-4 RR-1302 RR-1302B RR-1302F
イオンチャネル 電位依存性H+チャネル HV1 RR-0678 RR-0678B RR-0678F
カリウムチャンネル K2P1.1 RR-1225 RR-1225B RR-1225F
K2P4.1 RR-1331 RR-1331B RR-1331F
プリン作動性レセプター P2X3 RR-1062 RR-1062B RR-1062F
非特異性カチオンチャネル TRPC4 RR-1054 RR-1054B RR-10549F
TRPM4 RR-1333 RR-1333B RR-1333R
レセプターチロシンキナーゼ(RTK) Activinレセプター ACVR1 RR-0850 RR-0850B RR-0850F
膜1回貫通型タンパク質 B細胞活性化 CD19 RR-0553 RR-0553B RR-0553F
CD27 RR-0655 RR-0655B RR-0655F
レクチン DC-SIGN RR-0057 RR-0057B RR-0057F
DC-SIGNR RR-0056 RR-0056B RR-0056F
TNF-ファミリーレセプター DR5(TRAIL-R2) RR-0818 RR-0818B RR-0818F
IL-1レセプターファミリー ST2L RR-0653 RR-0653B RR-0653F
Wnt経路 LRP6 RR-0853 RR-0853B RR-0853F
TNFリガンド hTL1A RR-0819 RR-0819B RR-0819F
mTL1A RR-0817 RR-0817B RR-0817F
膜4回貫通型タンパク質 B細胞活性化 CD-20 RR-1179 RR-1179B RR-1179F
タイトジャンクション Claudin-1 RR-0825 RR-0825B RR-0825F
Claudin-3 RR-0733 RR-0733B RR-0733F
Claudin-4 RR-0686 RR-0686B RR-0686F
ウイルスタンパク質 Hepatitis C Virus 結合 CD81 RR-0341 RR0341B RR-0341F
Viral Envelope Chikungunya Virus RR-0945 RR-0945B RR-0945F
Ross River Virus RR-1136 RR-1136B RR-1136F
Respiratory Syncitial Virus RSV-F RR-0891 RR-0891B RR-0891F
イオンチャネル Influenza M2, A/Udorn/307/1972 RR-0929 RR-0929B RR-0929F
Influenza M2, A/HK/156/1997 RR-0179 RR-0179B RR-0179F
トランスポーター グルコーストランスポーター Glut-1 RR-0777 RR-0777B RR-0777F
Glut-4 RR-0961 RR-0961B RR-0961F

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FAQ

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Sample Kit

レセプターを保持したLipoparticle(400 units)と、Null Lipoparticle(400 units)のセット。

[在庫・価格 :2024年03月29日 00時00分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
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  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Lipoparticle Sample Kit, GPCR, CXCR4, Chemokine
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説明文
種類:ケモカインレセプター,レセプタークラス:GPCR,レセプター名:CXCR4
法規制等
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種類:ケモカインレセプター,レセプタークラス:GPCR,レセプター名:CXCR4
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種類:ケモカインレセプター,レセプタークラス:GPCR,レセプター名:CXCR4
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種類:ケモカインレセプター,レセプタークラス:GPCR,レセプター名:CCR5
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種類:ケモカインレセプター,レセプタークラス:GPCR,レセプター名:CCR5
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種類:ケモカインレセプター,レセプタークラス:GPCR,レセプター名:CCR5
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種類:ケモカインレセプター,レセプタークラス:GPCR,レセプター名:CD20
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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