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競合法ELISA測定の実習用キット Cayman社 Practice ELISA Kit

掲載日情報:2020/01/17 現在Webページ番号:2040

アセチルコリンエステラーゼ(AChE, Acetylcholineesterase)トレーサーを用いた競合法により簡便かつ迅速に比色定量できる、お求めやすい価格の実習用ELISAキットです。

本製品では競合法によるELISAの操作や原理を習得するための実習に最適なキットです。同じアセチルコリンエステラーゼ(AChE, Acetylcholineesterase)トレーサーを用いた、サンドイッチ法によるELISA実習用キット(Bertin Reagent社 ELISA Training Kit(#B05006))もあります。本製品との併用により、プレートリーダーを用いたELISAの測定操作に加えて、ELISAキットの代表的な競合法サンドイッチ法の測定原理の違いの学習にも有用です。

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特長

  • Cayman 社およびBirtin Bioeragent社の競合型ELISAキットと同じフォーマットになっており、本キットで操作法を習熟することにより、実際のキットを使用する際のミスを減らします。
  • キットには、実験に必要なすべての試薬が含まれています。
  • キットに含まれるプレートは抗体がコートされており、すぐに使用できます。




Practice ELISA Kit検量線例

Cayman Chemical社Practice ELISA Kitの検量線例

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アセチルコリンエステラーゼ(AChE, Acetylcholinesterase)標識のメリット

Cayman社の多くのELISAキットでは、主に酵素標識としてアセチルコリンエステラーゼ(AChE, Acetylcholinesterase)による方法が採用されています。AChEアッセイは、基質としてアセチルチオコリンを含むエルマン試薬を使用して発色させます。この酵素反応最終生産物(5-チオ-2-ニトロ安息香酸)は405~414 nmに吸収極大を持つ明るい黄色化合物です。AChEは、ELISA法で用いられる他の酵素に比べて以下のような長所を有しています。

  • AChEは、64,000 sec-1の代謝回転で真の一次速度を示すため、他の標識酵素に比べてカイネティック測定に適し、また高い感度が得られます。
  • HRP(Horse Radish Peroxidase)やAP(Alkaline Phosphatase)の約3倍の代謝回転速度に相当します。
  • バッファー中のアセチルコリンの非酵素的加水分解は本質的に起こらないため、低バックグラウンドでアッセイを行うことができます。
  • 高感度かつ低バックグラウンドにより、ELISAキットの測定に求められる高いS/N比を実現しています。
  • AChEは安定性に優れた酵素であり、その酵素活性は長時間維持されます。そのため、広いダイナミックレンジが得られます。
  • 他の酵素とは異なり、AChE自体に自殺性がないため、低~高濃度の試料の同時分析が可能です。

Practice ELISA Kit検量線例

Acetylcholinesteraseによる反応図

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測定原理

Practice ELISA Kit

    1. プレートにはマウスモノクローナル抗体がコートされている。
    2. トレーサー・抗体と、標準試料をインキュベートする。
    3. 洗浄し、非結合の試薬を除去する。
    4. Ellman's reagentを添加し検出する。

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キット内容

  • Practice ELISA antiserum
  • Practice AChE tracer
  • Practice ELISA standard
  • ELISA buffer concentrate
  • Tween 20
  • Mouse anti-rabbit IgG coated plate
  • Plate cover
  • Ellman's reagent
  • ELISA tracer dye
  • ELISA antiserum dye

本キットの試薬調製には高純度の水(有機物を含まないイオン交換水)を使用して下さい。UltraPure Water(#400000)としても販売しています。蒸留水、HPLCグレード水、滅菌水は使用できません。

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関連製品 Bertin Bioreagent社 ELISA Training Kit(サンドイッチ法)

Bertin Bioreagent社 ELISA Training Kit(クリックで開閉します)

試料中のβ-ラクトグロブリン(BLG、β-Lactoglobulin)を、アセチルコリンエステラーゼ(AChE, Acetylcholineesterase)トレーサーを用いたサンドイッチ法により簡便かつ迅速に比色定量できる、お求めやすい価格の実習用ELISAキットです。12人(#B05006)または24人(#B05005)の学生または研修者がそれぞれ4試料(各試料2回測定時)を測定することができます(Bertin Bioreagent社 ELISA Training Kit製品ページで見る)。

測定原理

本製品の測定原理は、サンドイッチ法による酵素免疫測定法(ELISA:Enzyme-Linked Immunosorbent assayまたはELISA:Enzyme Immunoassay)に基づいています。

Byonoy Absorbance 96 Plate Reader製品外観

  1. 本製品に含まれるプレートのウェルには、BLGに特異的なモノクローナル抗体でコーティングされています。
  2. BLGを含む標準試料または測定試料をウェルに添加すると、試料中のBLGが、ウェルにコーティングされたモノクローナルに結合します。
  3. BLG分子の異なるエピトープに選択的に結合するアセチルコリンエステラーゼ(AChE:acetylcholinesterase)-Fab'コンジュゲートをウェルに添加します。
  4. 2つの抗体は、BLGの異なるエピトープに結合することでサンドイッチを形成します。
  5. 洗浄により過剰な試薬を除去し、形成したサンドイッチだけがウェルに残ります。
  6. BLG濃度は、エルマン試薬(Ellman's reagent)を添加して、固定化されたトレーサー(Tracer)の酵素活性を測定することにより決定します。
  7. BLG濃度は、エルマン試薬と反応して405 nmまたは414 nmに吸光極大を有する黄色の化合物を形成します。
  8. プレートリーダーによって測定された吸光度は、免疫反応中にウェルに存在するBLG量に比例します。
  9. 濃度既知の1つまたは複数の標準試料の吸光度と未知濃度の測定試料の吸光度を比較して、測定試料中のBLG濃度を決定します。

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価格

[在庫・価格 :2024年04月20日 20時55分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Practice EIA Kit, Cayman
2週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
感度:11 pg/ml,測定範囲:67 pg/ml,検出方法:呈色,測定波長:405~420 nm,アッセイ法:競合ELISA,アッセイ数:96 tests
別名:Cayman Practice EIA Kit
法規制等 医薬用外毒物
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2023年4月1日号 p.14

製品記事 はじめてのELISA
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[在庫・価格 :2024年04月20日 20時55分現在]

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Practice EIA Kit, Cayman

文献数: 0

説明文 感度:11 pg/ml,測定範囲:67 pg/ml,検出方法:呈色,測定波長:405~420 nm,アッセイ法:競合ELISA,アッセイ数:96 tests
別名:Cayman Practice EIA Kit
法規制等 医薬用外毒物
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2023年4月1日号 p.14

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Check it out! Byonoy Absorbance 96 Plate Reader

超コンパクトで軽量(0.9 kg)なのに高性能(1波長の測定時間が2秒以内)な吸光マイクロプレートリーダーです。

特長

  • 本体がマイクロプレートとほほ同じサイズで、電源がUSB(2.5W)なのでPCに接続するだけで測定・分析結果が得られ、設置場所を選ばず携帯にも便利です。
  • 光源に4種類のLED(405, 420, 492, 620 nm)を搭載し、頻繁なランプ交換やオプションのフィルターの購入も必要ありません。
  • 専用ソフトウェアが標準で付属されており、PCにインストールして簡単に測定を行え、分析結果が得られます。
  • グループでのELISAの実習や、外出先でサンプリングした試料をその場ですぐに測定結果が得られるなど、実用性に優れています。
Byonoy Absorbance 96 Plate Reader製品外観

操作には別途PCが必要です。
詳細は「Byonoy Absorbance 96 Plate Reader」をご覧下さい。


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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。