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Cas9タンパク質とガイドRNAの導入専用のトランスフェクション試薬 jetCRISPR

掲載日情報:2017/11/01 現在Webページ番号:65129

Cas9タンパク質とガイドRNA(RNP:リポ核タンパク質)の導入専用のトランスフェクション試薬です。

本製品は取扱中止になりました。研究室で広く用いられているのは、Cas9とガイドRNA をコードしたプラスミドの導入によるゲノム編集です。
DNA導入用トランスフェクション試薬 jetOPTIMUSはこちらをご覧下さい。

特長

  • Cas9とガイドRNAの複合体であるリボヌクレオタンパク質(Ribonucleoprotein:RNP)の導入に最適化されています。
  • Cas9タンパク質を高効率で細胞に導入できるため、迅速かつ高い効率でゲノム編集を行えます。
  • 導入後も細胞の生存率と形状を維持します。
  • 接着細胞、遊離細胞問わず、様々な細胞で使用できます。
  • 血清や抗生物質の存在下でも使用できます。
  • 通常のトランスフェクション法に加え、Reverse Transfection法で迅速な導入を行うことも可能です。
  • 使用回数:1.5 ml当たり最大1,250回分(24ウェルプレートの場合)、300回分(6ウェルプレートの場合)

本製品にCas9タンパク質は含まれていません。別途ご用意下さい。

Cas9タンパク質とガイドRNAの導入に最適化されたトランスフェクション試薬

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使用例

高いゲノム編集効率

Cas9タンパク質とガイドRNAの導入に最適化されたトランスフェクション試薬

HeLa細胞へのCas9/gRNA複合体の導入

本製品を用いてCas9タンパク質とHPRT1 sgRNAまたはネガティブコントロールの複合体(RNP)を各濃度でHeLa細胞へ導入した。導入48時間後、DNAを抽出し、ゲノム編集のターゲットとした領域をPCR増幅した。T7エンドヌクレアーゼ処理によりミスマッチした二本鎖を形成した産物を切断した後、アガロースゲルで電気泳動した。
トランスフェクションされた細胞由来の産物(ゲノム編集により変異が生じている)と未導入細胞由来の産物から、ゲノム編集効率を算出できる。
1083 bp:切断されていない断片, 827 bp:切断された長い断片、256 bp:切断された短い断片

Cas9タンパク質とガイドRNAの導入に最適化されたトランスフェクション試薬

他社製品との比較

同量(0.3μl)の本製品または他社製品を用いて、Cas9タンパク質とHPRT1 sgRNAの複合体(RNP) をA549細胞とHEK-293細胞に導入し、48時間後のゲノム編集効率を算出した。

高い細胞生存率

導入後も細胞の生存率と形状が維持されます。

Cas9タンパク質とガイドRNAの導入に最適化されたトランスフェクション試薬

本製品を用いたトランスフェクション48時間後の細胞形態観察

0.3 µl /ウェル(96ウェルプレート)の本製品を用いて、30 nMのCas9タンパク質/HPRT1 sgRNA複合体(RNP ) をHEK-293細胞とA549細胞に導入した。

迅速で確実なゲノム編集

Cas9タンパク質とガイドRNAの導入に最適化されたトランスフェクション試薬

本製品を用いたHEK293細胞でのゲノム編集

0.3 µl /ウェル(96ウェルプレート)の本製品を用いて、30 nMのCas9タンパク質/HPRT1 sgRNA複合体(RNP ) をHEK-293細胞に導入し、24~72時間後のゲノム編集効率を算出した。

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使用方法概略

通常のトランスフェクション法に加え、Reverse Transfection法で迅速な導入を行うことも可能です。

上図:Reverse法、下図:Forward法

Cas9タンパク質とガイドRNAの導入に最適化されたトランスフェクション試薬 Cas9タンパク質とガイドRNAの導入に最適化されたトランスフェクション試薬



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文献データベース

各製品の使用情報を検索できる Polyplus transfection 文献データベース
各製品の使用情報を検索できる Polyplus transfection 文献データベースはこちら(メーカーサイトにリンクします)

ユーザーレビュー

“jetCRISPR is preferred for its simplicity, lower cost, and higher efficiency.”
jetCRISPRは、シンプルで低コスト、さらに編集効率が高くて優秀です。
—  Olivia G., University of Chicago, USA  

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価格

[在庫・価格 :2024年03月29日 00時00分現在]

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詳細 商品名
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  • 商品コード:502-01
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Cas9タンパク質とガイドRNAの導入に最適化されたトランスフェクション試薬


vitro / vivo 導入分子 Cas9 ガイドRNA 品名
in vitro タンパク質/RNA タンパク質 RNA jetCRISPR(本製品)
in vitro DNA DNA DNA jetPRIME
in vitro DNA/RNA DNA RNA jetPRIME
in vitro RNA mRNA RNA jetMESSENGER
in vivo DNA DNA DNA in vivo-jetPEI


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メーカー動画:ゲノム編集におけるトランスフェクションのトレンド


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メーカーウェブセミナー: CRISPR-Cas9: overview, challenges and latest technologies

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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