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XStamp Exosome Targeting Technology / Lentivectors
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XStamp Exosome Targeting Technology / Lentivectors
目的タンパク質をエクソソーム表面に提示させるシステム XStamp Exosome Targeting Technology / Lentivectors
掲載日情報：2015/11/17 現在Webページ番号：64445
標的リガンドタンパク質をコードする遺伝子をクローニングすることにより、エキソソーム表面上に様々なタンパク質を発現させ、そのエキソソームを対応するレセプターを有する細胞に効果的にデリバリーします。in vivo またはin vitro における、エキソソームを介した細胞への特異的なデリバリーやワクチン産生の促進、薬物スクリーニングなどに応用できます。
追加しました。
- XStamp Exosome Targeting Technology
- XStampクローニング用／リガンドタンパク質発現用Lentivector
- XStamp Expression Lentivectorの特長
- 参考文献
- XStamp Expression Lentivectorの使用例
- XStamp Expression Lentivectorの価格
XStamp Exosome Targeting Technology
エキソソームは、細胞間のコミュニケーションを促進する細胞外ナノシャトルです。System Biosciences（SBI）社が独自に開発したXStampでは、ヒトのMFG-E8タンパク質のほとんどがエキソソーム表面に局在することに着目しました。
蛍光標識抗MFG-E8,CD58,CD81を用いてフローサイトメトリーで解析した。CD58マーカーはエキソソームにない細胞表面マーカーとして知られている。CD81は細胞にもエキソソームにも存在する。フローサイトメトリーによる解析の結果、MFG-8はエキソソームでは検出されるが、細胞には存在ないことがわかる。
XStamp Expression Lentivector（#XSTP710PA-1）の配列図
MFG-E8タンパク質のC1C2（XStamp ドメイン）をSBI社のMSCV-MCS-EF1-PuroLentivector（#CD710B-1）にクローニングし、さらに5’分泌シグナル配列（SS）をMCS内に組み込むことによりXStamp Expression Lentivector（XStamp）を構築しました。このベクターでは、標的リガンドタンパク質をコードする配列をMCSにクローニングすることでC1C2ドメインとの融合タンパク質として、エキソソーム表面上に発現させることができます。また、XStampは選別および安定発現株の産生のため、下流域にEF1-ピューロマイシンカセットを設定しています。
XStampの発現カセットはMSCVプロモーターにより読み取りが開始されるため、初代細胞や幹細胞を含むほとんどの細胞で機能します。
Lentivirus Plasmid Map
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XStampクローニング用／リガンドタンパク質発現用Lentivector
System Biosciences社では上記のクローニング用Lentivectorに加えて、標的レセプタータンパク質に対するリガンドタンパク質をエキソソーム表面に発現する数種の発現ベクターを用意しています。
| 任意の配列を組み込めるLentivector | ||
|---|---|---|
| 品名 | 商品コード | |
| XStamp cloning and expression lentivector MSCV-Leader-MCS-C1C2-EF1-Puro | XSTP710PA-1 | |
| 特定のリガンドを発現させるためのLentivector | ||
| リガンドの種類 | 標的となる細胞 | 商品コード |
| Motilin | 消化管細胞 | XSTP720PA-1 |
| NCAM | 神経系細胞 | XSTP721PA-1 |
| BHP1 | 脳細胞 | XSTP722PA-1 |
| GE11 | がん細胞 | XSTP723PA-1 |
| Her2 | 乳がん細胞 | XSTP724PA-1 |
| CD40L / CD154 | 抗原提示細胞 | XSTP725PA-1 |
| IL-2 | 免疫細胞 | XSTP726PA-1 |
※各商品コードをクリックすると直接製品の価格表がご覧いただけます。
XStamp NCAM exosome brain targeting lentivector（#XSTP721PA-1）のプラスミドマップ
※上記にない標的タンパク質リガンドのXStamp Lentivector構築およびエキソソームの受託サービスも取り扱っています。詳細は当社受託・特注品担当までお問合せ下さい。
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XStamp Expression Lentivectorの特長
- エキソソーム表面に様々な標的リガンドタンパク質を発現するready-to-useのエキソソームを産生する安定細胞株を作製できます。
- 標的リガンドタンパクをエキソソーム表面に発現させることにより、対応するレセプターを有する細胞に対してin vitro またはin vivo において特異的なデリバリーが可能になります。
- エキソソームの表面での発現により、ワクチン産生や薬物スクリーニングの効率を向上できます。
追加しました。
参考文献
- Increasing vaccine potency through exosome antigen targeting. Hartman ZC, et al., Vaccine, 29(50), 9361～9367（2011）.
- Exosome nanovesicles displaying G protein-coupled receptors for drug discovery. Estelles A, Int. J. Nanomedicine, 2(4), 751～760（2007）.
- Exosomes as novel therapeutic nanodevices. Delcayre A, et al., Curr. Opin. Mol. Ther., 8(1), 31～38（2006）.
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XStamp Expression Lentivectorの使用例
（1）Motilin-XStamp HEK293 エキソソームの産生と乳がん細胞または結腸がん細胞へのsiRNAのトランスフェクション
Motilin-XStamp construct (#XSTP720PA-1)をHEK293細胞にトランスフェクションし、48時間後にExoQuick-TCを用いてエキソソームを回収した。翌日、XStamp -Motilinエキソソームにテキサスレッド標識siRNAを導入しエキソソームの結合とsiRNAのデリバリーをモニターした。その結果、MotilinレセプターポジティブのHT-29結腸がん細胞は、MB-231乳がん細胞（Motilinレセプターネガティブ）に比べはるかに早い速度でXStamp-Motilinエキソソームが取り込まれsiRNAがデリバリーされたことがわかる。
（2）XStampとエキソソームを用いたニューロンの標的化
NCAM-XStamp（#XSTP721PA-1）またはBHP1-XStamp（#XSTP722PA-1）をそれぞれ、エキソソーム内部に蛍光追跡用のGFPをパッケージさせることができる。XPack-GFP（#XPAK530PA-1）とともにマウスのMSCにトランスフェクションした。48時間後にエキソソームを回収し、コントロール（XStampなし）、NCAM-XStampまたはBHP1-XStamp MSCエキソソーム（すべてXPack-GFPで標識）各100μgをNuero 2a神経芽細胞種の培養液中に添加した。24時間インキュベーションを行った後、エキソソームの導入とGFPのデリバリーを確認するためにニューロンを位相差およびGFPで画像化した。その結果、NCAMポジティブのNeuro2a神経芽細胞は、コントロールに対してはるかに高い割合でXStamp -NCAMまたはXStamp-BHP1エキソソームを取り込んだことがわかる。
※BHP1, from “Organ targeting in vivo using phage display peptide libraries.” Pasqualini R., et al., Nature, 6572, 364～366.
※本手法は、”Pack and Stamp”システムとして呼ばれ、どのカーゴやデリバリー標的にも適応できます。
※エキソソーム抽出試薬ExoQuick-TC（#EXOTC10A-1、#EXOTC50A-1）およびエキソソーム除去済みFBS、Exo-FBS（#EXO-FBSHI-50A-1）はXStamp vectorには含まれていません。別途ご購入下さい。
※通常のFBSにはウシ由来のエキソソームが混入しています。エキソソーム作製細胞株を培養する際はエキソソーム除去済みFBSのExo-FBS（#EXO-FBSHI-50A-1）のご使用をお勧めします。
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XStamp Expression Lentivectorの価格
XStamp クローニング用Lentivector
[在庫・価格 ：2024年04月25日 14時15分現在]
[在庫・価格 ：2024年04月25日 14時15分現在]
XStamp cloning and expression lentivector MSCV-Leader-MCS-C1C2-EF1-Puro
文献数： 0
- 商品コード：XSTP710PA-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥160,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
XStamp リガンドタンパク質発現用Lentivector
[在庫・価格 ：2024年04月25日 14時15分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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XStamp MLN exosome Motilin receptor GI tract targeting lentivector |
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XStamp NCAM exosome brain targeting lentivector |
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XStamp BHP1 exosome brain homing peptide targeting lentivector |
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XStamp GE11 exosome EGFR targeting lentivector |
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XStamp Her2 ligand exosome Her2 receptor targeting lentivector |
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XStamp CD40L exosome CD40 receptor targeting lentivector |
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XStamp IL2 exosome IL-2 receptor targeting lentivector |
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[在庫・価格 ：2024年04月25日 14時15分現在]
XStamp MLN exosome Motilin receptor GI tract targeting lentivector
文献数： 0
- 商品コード：XSTP720PA-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥166,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年10月15日号 p.33
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XStamp NCAM exosome brain targeting lentivector
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- 価格：¥166,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
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ニュース2022年10月15日号 p.33
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- 価格：¥166,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
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- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
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| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
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- 価格：¥166,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
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| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年10月15日号 p.33
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- 価格：¥166,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
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- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年10月15日号 p.33
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