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TUNEL法によるアポトーシス検出用キット TACS2 TdT in situ Apoptosis Detection Kit

掲載日情報:2020/01/31 現在Webページ番号:471

アポトーシスの過程で生じる断片化DNAを、TUNEL法(TdT-mediateddUTPnickendlabeling)により検出するキットです。組織スライド中の断片化DNAをビオチン標識ヌクレオチドで標識した後、HRP標識ストレプトアビジンを反応させて染色します。検出試薬としてDAB、BlueLabel、FITCのいずれかを含む3種類の製品があります。TUNEL法によるアポトーシスした組織・細胞を染色する原理もご紹介します。

アポトーシスとネクローシス

アポトーシスを起こした細胞は、クロマチンの凝集、DNAの断片化、細胞膜のブレブ(突起物)形成などの様々な形態変化を示し、周囲の貪食細胞に貪食・分解されます。ネクローシスを起こした細胞は、核、細胞質、リソソーム膜が分解し、最終的には細胞が膨張し、破壊されます。
アポトーシスの詳細については、アポートシス特集をご覧ください。


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共通の特長

  • 凍結/パラフィン包埋/プラスチック包埋組織、固定細胞中のアポトーシスを検出できます。
  • 操作に必要な試薬がすべて含まれています。
  • 標識反応に必要なカチオン試薬(コバルトイオン、マグネシウムイオン、マンガンイオン)の使用濃度は最適化済みです。カチオンの選択については各試料別の推奨試薬の組み合わせ(下表参照)を参考にしていただくか、当社テクニカルサポート(試薬担当)までお問い合わせ下さい。
  • 各標識試薬にはTrevigen社独自のバッファーを採用しており、毒性のある成分は含まれていません。
  • TdTは高純度の精製品です。
  • ポジティブコントロール作製用試薬としてTACS-Nucleaseが、組織内に試薬を浸透させやすくするための試薬としてCytoninが添付されています。
  • 抗体などとの二重染色も可能です。

染色試薬を含まないキット(Core Kit)や、試薬補充用のキット(Replenisher Kit)もあります。

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各キットの特長

■ TACS2 TdT DAB Kit

  • ビオチン標識dNTP、HRP標識ストレプトアビジン、DAB基質を用い、光学顕微鏡で検出します。
  • DAB基質は免疫組織染色で広く用いられています。
  • アポトーシスを起こした細胞を赤褐色に染色します。 対比染色として用いるMethyl Green染色液もキットに添付されています。

■ TACS2 TdT Blue Label Kit

  • ビオチン標識dNTP、HRP標識ストレプトアビジン、Blue Label基質を用い、光学顕微鏡で検出します。
  • Blue Label基質は、DABで指摘されているような発癌性は報告されていません。
  • アポトーシスを起こした細胞を青色に染色します。 対比染色として用いるNuclear Fast Redもキットに添付されています。

■ TACS2 TdT Fluorescein Kit

  • ビオチン標識dNTP、FITC標識ストレプトアビジンを用い、蛍光顕微鏡で検出します。
  • アポトーシスを起こした細胞を緑色蛍光に染色します。

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TUNEL法によるアポトーシスした組織・細胞を染色する原理

TUNEL法の検出原理

DNAの断片化により、DNAの末端に遊離3'-OH基が生じます。これは固定組織や固定細胞でも維持されます。TdT(Terminal deoxynucleotidyl transferase)はこの3'末端にヌクレオチドを転移する酵素で、標識ヌクレオチド(図中のN*)を用いることで断片化DNAを標識し、染色することができます。

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染色・検出例

DABで検出したマウス胸部のアポトーシス

DABで検出したマウス胸部のアポトーシス
試料:ホルマリン固定/パラフィン包埋マウス胸部組織切片
茶色(DAB):本製品により検出したアポトーシスを起こした細胞


Blue labelで検出したアルツハイマー患者の前頭皮質のアポトーシス

Blue labelで検出したアルツハイマー患者の前頭皮質のアポトーシス
試料:アルツハイマー病患者の前頭皮質
青色(Blue Label):本製品により検出したアポトーシスを起こした細胞


Blue labelで検出したラット心筋のアポトーシス</span><br/>
試料:ラット心筋

Blue labelで検出したラット心筋のアポトーシス
試料:ラット心筋
青色(Blue Label):本製品により検出したアポトーシスを起こした細胞

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各試料別の推奨試薬の組み合わせ例

試 料 カチオン溶液 発色基質 Cytonin Proteinase K
Co2+ Mn2+ Mg2+ DAB Blue Label 1:50 1:200
心臓
肝臓
腎臓
脾臓
十二指腸
大腸
小腸
結腸
骨・軟骨
神経
皮膚
培養細胞(乾燥)
培養細胞(新鮮)
上皮細胞
内皮細胞
線維芽細胞
造血細胞
肝細胞
単球
腫瘍

心臓(CardioTACS)、皮膚(DermaTACS)、神経(NueroTACS)、腫瘍(TumorTACS)、血管(VasoTACS)用に最適化されたキットもあります。詳細はフナコシホームページの製品検索をご利用いただくか、当社テクニカルサポート(試薬担当)までお問い合わせ下さい。
使用するカチオンは1種類のみです。
上表の組み合わせは一例です。

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キット内容

Tacs2 TdT Kit
(商品コード)
DAB
(4810-30-K)
Blue Label
(4811-30-K)
Fluorescein
(4812-30-K)
Core
(4810-30-CK)
Replenisher
(4810-30-R)
キット別売品
商品コード
TdT labeling buffer 4810-30-02
TdT stop buffer 4810-30-03
TdT dNTP mix 4810-30-04
TdT enzyme 4810-30-05
カチオン溶液(Co2+ 4810-90-09
カチオン溶液(Mg2+ 4810-90-10
カチオン溶液(Mn2+ 4810-90-14
Streptavidin-HRP 4800-30-06
Streptavidin-fluorescein 4800-30-14
DAB solution 4800-30-07
DAB enhancer
TACS Blue Label
Blue streptavidin-diluent
Methyl green solution 4800-30-18
Nuclear fast red 4800-30-17
Proteinase K 4800-30-01
Cytonin 4876-05-01
TACS-Nuclease 4800-30-N
TACS-Nuclease buffer

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価格

■TACS2 TdT Kit

[在庫・価格 :2024年03月29日 18時15分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
TdT In Situ Apoptosis Detection Kit - DAB
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 84
説明文
ブランド:Trevigen
法規制等 医薬用外劇物
保存条件 4℃,-20℃ 法規備考
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法規制等 医薬用外劇物
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法規制等 医薬用外劇物
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法規制等
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[在庫・価格 :2024年03月29日 18時15分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

TdT In Situ Apoptosis Detection Kit - DAB

文献数: 84

説明文 ブランド:Trevigen
法規制等 医薬用外劇物
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文献数: 3

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法規制等
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■キット別売品

[在庫・価格 :2024年03月29日 18時15分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
TdT Labeling Buffer, 10×
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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法規制等 医薬用外劇物
保存条件 4℃ 法規備考
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TdT Stop Buffer, 10×
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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変更先製品
本製品は製品内容等が変更されました
変更先製品
0
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10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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ブランド:Trevigen
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保存条件 -80℃ 法規備考
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Streptavidin, HRP Conjugate
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 35
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TACS in situ Apoptosis Detection Kitシリーズの別売品。ブランド:Trevigen
法規制等
保存条件 4℃,凍結禁止 法規備考
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10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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法規制等
保存条件 -80℃,暗所保存 法規備考
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DAB Solution <Diaminobenzidine>
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 3
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Cytonin
中止
本製品は取扱中止になりました 0
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[在庫・価格 :2024年03月29日 18時15分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

TdT Labeling Buffer, 10×

文献数: 0

説明文
法規制等 医薬用外劇物
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TdT Stop Buffer, 10×

文献数: 0

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TdT dNTP Mix

文献数: 0

  • 商品コード:4810-30-04
  • メーカー:RSD
  • 包装:35μl
  • 本製品は製品内容等が変更されました 変更先製品

説明文
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Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (TdT) Enzyme

文献数: 0

説明文 ブランド:Trevigen
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Streptavidin, HRP Conjugate

文献数: 35

説明文 TACS in situ Apoptosis Detection Kitシリーズの別売品。ブランド:Trevigen
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Streptavidin, FITC Conjugate

文献数: 0

説明文 TACS in situ Apoptosis Detection Kitシリーズの別売品。ブランド:Trevigen
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DAB Solution <Diaminobenzidine>

文献数: 3

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Methyl Green

文献数: 1

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Cytonin

文献数: 0

  • 商品コード:4876-05-01
  • メーカー:RSD
  • 包装:6ml
  • 本製品は取扱中止になりました

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TACS Nuclease

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(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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