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組織・培養細胞の剥離／分離／分散溶液 Accutaseシリーズ

掲載日情報：2024/04/05 現在Webページ番号：2334

イノベーティブ セル テクノロジーズ /
Innovative Cell Technologies, Inc.
[メーカー略称：ICT]

接着細胞の剥離や、組織から初代培養細胞を分離、分散させるのに適した調製済み試薬です。ヒトES細胞、ヒト間葉系幹細胞（human mesenchymal stem cell）、ヒト神経幹細胞（human neural stem cell）などにおける使用実績があります。
溶液状でReady-to-useのAccutaseと、凍結乾燥粉末状のAccutaseLZがあります。

※ Accutaseのサンプルをご用意しています。サンプルをご希望の方は☞ 当社テクニカルサポート（試薬担当）までお問い合わせ下さい。
※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

処理前：モノレイヤーの細胞層（100×）
処理後：細胞は剥離している（100×）
処理前：モノレイヤーの細胞層（100×）   処理後：細胞は剥離している（100×）

Accutaseの使用例（図をクリックすると拡大します（🔍））

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特長

  • プロテアーゼ活性とコラゲナーゼ活性が最大限に効果を発揮するように組み合わせてあります。
  • 穏やかかつ迅速に作用するので、高い細胞生存率を示します。
  • 哺乳動物細胞や微生物由来の物質は含んでいません。
  • 反応停止や中和操作は不要です。
  • Accutaseを用いて剥離、分散させた細胞は、さまざまなアプリケーションに使用できます。

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製品ラインナップ

品名をクリックすると製品の詳細、商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

品名 Accutaseシリーズ ☞ Accumax（関連製品）
 ☞ サンプル 
Accutase
 ☞ サンプル 		 AccutaseLZ AccutaseGMP
製品外観 Accutase製品外観🔍 AccutaseLZ製品外観🔍 AccutaseGMP製品外観🔍 Accumax製品外観🔍
製品概要 Dulbecco's PBS（0.5 mM EDTA-4Na、フェノールレッド含有）で調製済みのReady-to-useフォーマットです。 凍結乾燥品で、省スペースで保管できます。蒸留水を加えて溶解し、ろ過滅菌を行って調製します。1バイアルで500 mlのAccutaseが調製できます。
（☞ 調製方法）		 ISO13485:2106 認定品質管理システムに基づいたGMP製造プロトコルに準拠して製造し、Accutaseと同様の細胞剥離性能を発揮するように配合されています。また、20 nmのフィルターでウイルスろ過済みです。 プロテアーゼ、コラゲナーゼおよびDNaseの活性が組み合わされた調製済みの細胞分離／分散溶液です。
包装 100 ml 500 ml 500 ml 100 ml 500 ml 100 ml 500 ml
商品コード AT104 AT104-500 AT106-500 AT107-100 AT107-500 AM105 AM105-500
性状 溶液 凍結乾燥品 溶液 溶液
GMP準拠 − − ● −
分析証明書 ● ● ● ●
原産地証明書 − − ● −
BSE/TSEステートメント − − ● −
酵素活性 標準 強め
フェノールレッド 含有 不含
反応停止、中和操作 不要
動物・微生物由来成分 不含


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適用例

  • バイオリアクターによる細胞の大量培養
  • 細胞の継代
  • フローサイトメトリー
  • 細胞表面マーカーの解析
  • 血清飢餓による細胞周期同調
  • がん遺伝子導入による形質転換
  • ウイルス増殖試験
  • 神経冠細胞移動アッセイ
  • 細胞増殖アッセイ
  • 細胞の接触走性アッセイ
  • 腫瘍細胞の遊走アッセイ

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使用実績のある細胞

  • 線維芽細胞      
  • ケラチノサイト    
  • 血管内皮細胞        
  • 血管平滑筋細胞      
  • 肝細胞   
  • 肝前駆細胞   
  • ヒトES細胞（human embryonic stem cell）   
  • ヒト間葉系幹細胞（human mesenchymal stem cell）   
  • ヒト神経幹細胞（human neural stem cell）   
  • ニワトリ初代培養神経細胞  
  • 骨髄幹細胞  
  • マクロファージ     
  • マウス精巣胚細胞  
  • 293    
  • 3T3    
  • A375   
  • BHK   
  • CHO    
  • COS    
  • D54     
  • HeLa  
  • HT1080  
  • L929  
  • M24   
  • NT2   
  • MG63  
  • U251  
  • Sf9   
  • Vero   

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使用例

Accutaseによる細胞の剥離

図をクリックすると拡大します（🔍）

Accutaseによる細胞の剥離

培養用ディッシュを用いてDMEM（10% FBS含有）培地で培養したヒト線維肉腫MG63細胞株を、Accutaseを用いて剥離した。Accutase処理時間を変えて細胞を回収して計数を行い、細胞生存性を測定した。Accutaseでの処理により、迅速に細胞剥離が起こり（処理後5分）、単一細胞に分散し、その後の細胞生存性も高いことがわかる。Accutaseは穏やかに作用するため、45分間処理した細胞でも、97±3%と高い生存性を有していた。

Accutaseにより剥離したhES細胞の凍結後の生存性

図をクリックすると拡大します（🔍）

Accutaseにより剥離したhES細胞の凍結後の生存性

ヒトES細胞を培養後、Accutaseまたはコラゲナーゼで剥離し、凍結保存した。液体窒素中で2か月間保存後に播種し、1日後に全細胞数と生存細胞数を計数した。Accutaseで剥離処理を行った細胞（緑色）の方が、コラゲナーゼで剥離を行った細胞（青色）よりも、凍結保存後の生存細胞数が多いことがわかる。


Accutaseの使用動画

Semper Lenis "Always Gentle" reattachment of neuronal stem cells passaged with Accutase.

Etaluma-Human Neural Stem Cells in Culture 2

Accutaseにより分散したヒト神経幹細胞をWPI Fluorodishのカバーガラス底に播種し、6日間タイムラプス撮影を行った。

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操作方法概略

Accutase

※操作はすべて滅菌条件下で行って下さい。

  1. 接着性細胞を培養している容器から、培地を吸引除去する。
  2. 細胞全体を覆う量のAccutaseを添加する。
  3. 約5～10分間静置する。
  4. 顕微鏡下で細胞を観察し、細胞の形態が球状となって軽く浮遊していることを確認したら、容器の縁を何回かタッピングする（または穏やかに数回ピペッティングを行う）。
  5. 細胞数を計数し、継代する。酵素阻害物質の添加や洗浄は不要。

詳細プロトコル（英語）


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AccutaseLZ（調製方法）

  1. 400 mlの室温または冷蔵蒸留水を用意し、500 mlメスシリンダーに入れる。
  2. AccutaseLZのバイアルのふたを外し、冷蔵蒸留水40 mlを加える。ふたを閉めて1～2分間ボルテックスまたは転倒撹拌を行い、溶解させる。
  3. ピペットを用いてバイアル中のAccutase溶液をメスシリンダーに移す。
  4. 空になったバイアルに25 mlの冷蔵蒸留水を加え、すすいだ後、同様に溶液をメスシリンダーに移す。これをもう一度繰り返す。
  5. メスシリンダーに冷蔵蒸留水を加え、500 mlまでメスアップする。
  6. パラフィルムなどでメスシリンダーに封をして、転倒撹拌を複数回行い混合する。
  7. 0.22 μm のフィルターを用いてろ過滅菌を行う。セルロースメンブレンなど、タンパク質付着性の低いフィルターを用いる。
  8. 調製したAccutase溶液は、冷蔵（2～8℃）で約2か月保存可能。

詳細プロトコル（英語）


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使用文献リスト


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FAQ

Q-1. どの細胞株にAccutaseを使用できますか？☟

Q-2. 非接着細胞塊の分離にAccutaseを使用できますか☟

Q-3. 凍結したAccutaseは層状になったりして色が一様ではないようですが、正常ですか☟

Q-4. 一部解けてAccutase, Accumaxが納品されました。そのまま使用できますか☟

Q-5. 説明書を読まずに37℃で解凍してしまいました。そのまま使用できますか☟

Q-6. 酵素安定性について☟

Q-7. Accutaseのフェノールレッドはフローサイトメトリーに影響しますか☟

Q-8. エンドトキシンのレベルは☟

Q-9. Accumaxを処理後にDNAの抽出は出来ますか☟

Q-10. AccutaseとAccutaseの有効期限は☟

Q-11. アニマルフリーですか☟

Q-12. 哺乳動物由来の成分を含みますか☟

Q-13. AccumaxとAccutaseの違いは何ですか☟

Q-14. 解凍したAccutaseやAccumaxは分注して冷凍保存しないといけないのですか☟

Q-15. Accutaseを加える前に細胞を洗浄する必要はありますか☟

Q-16. Accutaseの使用後、血清による反応停止や中和操作は必要ですか☟

Q-17. 使用後Accutaseを洗い流す必要はありますか☟

Q-18. Accutaseは使用前に希釈する必要はありますか☟

Q-19. 細胞をAccutaseに浸して、どれくらい待てばいいですか☟

Q-20. Accutaseは何から作られているのですか☟

Q-21. AccutaseとAccumaxの違いはなんですか☟

Q-22. Accutaseの処理過多による細胞の影響はありますか☟


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価格

Accutase

[在庫・価格 ：2024年04月20日 12時15分現在]

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詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
 納期 文献数
Accutase
 2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 280
説明文
組織および培養細胞分離分散溶液。接着細胞の剥離や,組織からの初代培養用細胞を分離,分散させるのに用いる。調製済み溶液。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2023年2月15日号 p.19
ニュース2020年10月15日号 p.9

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Accutase
 2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 264
説明文
組織および培養細胞分離分散溶液。接着細胞の剥離や,組織からの初代培養用細胞を分離,分散させるのに用いる。調製済み溶液。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ 再生医療研究細胞培養カタログ2017-2018 p.68
ニュース2020年4月1日号 p.4
ニュース2020年3月1日号 p.23

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[在庫・価格 ：2024年04月20日 12時15分現在]

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Accutase

文献数： 280

説明文 組織および培養細胞分離分散溶液。接着細胞の剥離や,組織からの初代培養用細胞を分離,分散させるのに用いる。調製済み溶液。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
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Accutase

文献数： 264

説明文 組織および培養細胞分離分散溶液。接着細胞の剥離や,組織からの初代培養用細胞を分離,分散させるのに用いる。調製済み溶液。
別包装品 別包装品あり
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ 再生医療研究細胞培養カタログ2017-2018 p.68
ニュース2020年4月1日号 p.4
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AccutaseLZ

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詳細 商品名
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 納期 文献数
AccutaseLZ-Lyophilized Accutase (500ml)
 2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2020年3月1日号 p.23

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[在庫・価格 ：2024年04月20日 12時15分現在]

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AccutaseLZ-Lyophilized Accutase (500ml)

文献数： 0

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掲載カタログ ニュース2020年3月1日号 p.23

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Accutase GMP

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AccutaseGMP
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AccutaseGMP

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（テクニカルサポート 試薬担当）

reagent@funakoshi.co.jp

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