常温反応用

1. 組織切片を蒸留水で水和する。

2. A液で酸化する（室温，1時間）。

3. 蒸留水で数分間洗浄する。

4. B液で1分間処理する。

5. 水道水で3分間洗浄する。

6. 蒸留水で十分に洗浄する。

7. 組織切片が黄～茶色（糸状菌は黒色）に変化するまで，15～20分間反応混合液に浸す。

8. 蒸留水で十分に洗浄する。

9. F液で色調を変化させる。

10. 蒸留水で洗浄する。

11. G液で2分間処理する。

12. 水道水で5分間洗浄する。

13. 調製したH液で15秒間処理し，対比染色（薄緑色）を行う。

14. アルコールで薄緑色に過染色された部分を洗い流す。

15. 脱水，透徹，封入する。

※反応混合液（C～E液）はプロトコルに従って調製した後，60℃のウォーターバスで加温しておく。
※色の変化は，切片を蒸留水で洗浄した後，顕微鏡で観察する。

マイクロウェーブ用

1. 組織切片を蒸留水で水和する。

2. A液（40 ml）を入れた染色瓶に緩くふたをして，スライドを入れて電子レンジで2分30秒間（500 W）加熱する。

3. スライドを染色瓶の中で上下させた後，2分間浸したままにしておく。

4. 水道水で3分間洗浄する。

5. B液で30秒間処理する。

6. 水道水で30秒間洗浄する。

7. 反応混合液を入れた染色瓶に緩くふたをして，電子レンジで60秒間（450 W）加熱する。

8. 常温反応用プロトコルの 9. へ進む。

※反応混合液（C～E液）はプロトコルに従って調製しておく。