試薬記事カテゴリー
培養細胞上でリン酸化型／全型タンパク質を同時に蛍光検出できるキット Cell-Based Phosphoprotein ELISA Kit
※R&D Systemsはテクネ コーポレイションの登録商標です。
特長
- 細胞抽出液の調製を行うことなく，固定した細胞上で直接測定できます。
- 1ウェル当たり，わずか104個の細胞から測定可能です。
- キナーゼ阻害物質のような，リン酸化タンパク質の調節に関与する物質のハイスループットスクリーニングに最適です。
- キットに含まれる抗体は，ウエスタンブロッティングにより特異性が確認されています。
- 測定波長：励起540 nm／蛍光600 nm（リン酸化型タンパク質）
：励起360 nm／蛍光450 nm（全型タンパク質）
操作法概略
キット内容
- 96 well microplate
- Phospho-specific antibody
- Total antibody
- HRP-conjugated secondary antibody
- AP-conjugated secondary antibody
- Substrate F1 concentrate
- F1 diluent
- Substrate F2
- Blocking buffer
- Wash buffer
- Plate sealer
解 析 例
■ リン酸化Akt（pThr308）検出用キット（#KCB8871）
マウス細胞におけるPDGF誘導性Aktリン酸化の解析例
NIH/3T3マウス線維芽細胞株を96ウェルプレートで培養し，各濃度の組換え体ヒトPDGF-BB（RSD社#220-BB）で10分間処理した。細胞を固定した後，308位のスレオニンがリン酸化されたAktをCell-Base ELISA（#KCB8871）を用いて測定した。また，キットに含まれている抗体でウエスタンブロッティングを行った。Cell-Base ELISAでは特に低濃度におけるシグナルも検出されていることがわかる。
ヒト細胞におけるIGF-I誘導性Aktリン酸化のPI3キナーゼ阻害物質による阻害効果
MCF-7ヒト乳腺癌細胞株を96ウェルプレートで培養し，各濃度のPI3キナーゼ阻害物質（LY294002）で20分間処理した。続いて組換え体ヒトIGF-I（RSD社#291-G1, 20 ng/ml）を添加して15分間刺激した。細胞を固定した後，308位のスレオニンがリン酸化されたAktをCell-Base ELISA（#KCB8871）を用いて測定した。
■ リン酸化RPS6（pSer235 / pSer236）検出用キット（#KCB3918）
ヒト細胞における血清誘導性RPS6リン酸化の解析例
HEK293ヒト胚性腎細胞株を96ウェルプレートで培養し，20％FBSで各時間処理した。細胞を固定した後，235位と236位のセリンがリン酸化されたRPS6をCell-Base ELISA（#KCB3918）を用いて測定した。また，キットに含まれている抗体でウエスタンブロッティングを行った。Cell-Base ELISAでは特に低濃度におけるシグナルも検出されていることがわかる。
マウス細胞における血清誘導性RPSリン酸化の解析例
Balb/3T3マウス線維芽細胞株を96ウェルプレートで培養し，20％FBSで各時間処理した。細胞を固定した後，235位と236位のセリンがリン酸化されたRPS6をCell-Base ELISA（#KCB3918）を用いて測定した。また，キットに含まれている抗体でウエスタンブロッティングを行った。Cell-Base ELISAでは特に低濃度におけるシグナルも検出されていることがわかる。
■ リン酸化Smad3（pSer423 / pSer425）検出用キット（#KCB3226）
ラット細胞におけるTGF-β3誘導性Smad3リン酸化の解析例
C6ラットグリア芽腫細胞株を96ウェルプレートで培養し，各濃度のヒトTGF-β1で30分間処理した。細胞を固定した後，423位と425位のセリンがリン酸化されたSmadをCell-Base ELISA（#KCB3226）を用いて測定した。また，キットに含まれている抗体でウエスタンブロッティングを行った。Cell-Base ELISAでは特に低濃度におけるシグナルも検出されていることがわかる。
マウス細胞におけるTGF-β3誘導性Smad3リン酸化のTGF-βレセプター阻害物質による阻害効果
C2C12マウス筋芽細胞株を96ウェルプレートで培養し，各濃度のTGF-βレセプターキナーゼの選択的阻害物質（A-83-01）で30分間処理した。続いてヒトTGF-β1（5 ng/ml）を添加して30分間刺激した。細胞を固定した後，423位と425位のセリンがリン酸化されたSmadをCell-Base ELISA（#KCB3226）を用いて測定した。
価格
| メーカー | 商品コード | 商品名 | 包装 | 価格 | 在庫 | リスト |
|---|---|---|---|---|---|---|
| RSDアールアンドディー システムス R&D Systems, Inc. | KCB1018 | ERK1(pThr202/pTyr204)/ERK2(pThr185/pTyr187), Phosphorylated, Human/Mouse/Rat, Cell-Based ELISA Kit (96well) | 1kit | \83,000 | 2個以上 | 追加 |
| RSDアールアンドディー システムス R&D Systems, Inc. | KCB1095 | EGF Receptor (pTyr1068), Phosphorylated, Human, Cell-Based ELISA Kit (96well) | 1kit | \94,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| RSDアールアンドディー システムス R&D Systems, Inc. | KCB2316 | PDGF Receptor β (pTyr1021), Phosphorylated, Human, ELISA Kit, Cell-Based (96well) | 1kit | \94,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| RSDアールアンドディー システムス R&D Systems, Inc. | KCB1767 | PDGF Receptor β (pTyr751), Phosphorylated, Human, ELISA Kit, Cell-Based (96well) | 1kit | \94,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| RSDアールアンドディー システムス R&D Systems, Inc. | KCB887 | Akt(pSer473), Phosphorylated, Human/Mouse/Rat, Cell-Based ELISA Kit (96well) | 1kit | \94,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| RSDアールアンドディー システムス R&D Systems, Inc. | KCB869 | p38 MAP Kinase (pThr180/pTyr182), Phosphorylated, Human/Mouse, ELISA Kit, Cell-Based (96well) | 1kit | \94,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| RSDアールアンドディー システムス R&D Systems, Inc. | KCB3226 | Smad3 (pSer423/pSer425), Phosphorylated, Human/Mouse/Rat, ELISA Kit, Cell-Based (96well) | 1kit | \94,000 | 1個 | 追加 |
| RSDアールアンドディー システムス R&D Systems, Inc. | KCB8871 | Akt(pThr308), Phosphorylated, Human/Mouse/Rat, ELISA Kit, Cell-Based (96well) | 1kit | \94,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| RSDアールアンドディー システムス R&D Systems, Inc. | KCB3918 | RPS6 (pSer235/pSer236), Phosphorylated, Human/Mouse, ELISA Kit, Cell-Based (96well) | 1kit | ---- | ---- |
| メーカー | 商品コード | 商品名 | 包装 | 価格 | 在庫 | リスト | |||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| RSDアールアンドディー システムス R&D Systems, Inc. | KCB1018 | ERK1(pThr202/pTyr204)/ERK2(pThr185/pTyr187), Phosphorylated, Human/Mouse/Rat, Cell-Based ELISA Kit (96well) | 1kit | \83,000 | 2個以上 | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | アッセイ法：ELISA，アッセイ数：96 well，検出方法：蛍光，測定試料：細胞，測定波長：360/450, 540/600 nm，種交差性：Human/Mouse/Rat | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年8月15日号（No.496） p.15 | ||||||||||||||||||||
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| 説明文 | アッセイ法：ELISA，アッセイ数：96 well，検出方法：蛍光，測定試料：細胞，測定波長：360/450, 540/600 nm，種交差性：Human | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年8月15日号（No.496） p.15 | ||||||||||||||||||||
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| 説明文 | アッセイ法：ELISA，アッセイ数：96 well，検出方法：蛍光，測定試料：細胞，測定波長：360/450, 540/600 nm，種交差性：Human | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年8月15日号（No.496） p.15 | ||||||||||||||||||||
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| 説明文 | アッセイ法：ELISA，アッセイ数：96 well，検出方法：蛍光，測定試料：細胞，測定波長：360/450, 540/600 nm，種交差性：Human | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年8月15日号（No.496） p.15 | ||||||||||||||||||||
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| 説明文 | アッセイ法：ELISA，アッセイ数：96 well，検出方法：蛍光，測定試料：細胞，測定波長：360/450, 540/600 nm，種交差性：Human/Mouse/Rat | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年8月15日号（No.496） p.15 | ||||||||||||||||||||
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| 説明文 | アッセイ法：ELISA，アッセイ数：96 well，検出方法：蛍光，測定試料：細胞，測定波長：360/450, 540/600 nm，種交差性：Human/Mouse | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年8月15日号（No.496） p.15 | ||||||||||||||||||||
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| RSDアールアンドディー システムス R&D Systems, Inc. | KCB3226 | Smad3 (pSer423/pSer425), Phosphorylated, Human/Mouse/Rat, ELISA Kit, Cell-Based (96well) | 1kit | \94,000 | 1個 | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | アッセイ法：ELISA，アッセイ数：96 well，検出方法：蛍光，測定試料：細胞，測定波長：360/450, 540/600 nm，種交差性：Human/Mouse/Rat | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年8月15日号（No.496） p.15 | ||||||||||||||||||||
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| 説明文 | アッセイ法：ELISA，アッセイ数：96 well，検出方法：蛍光，測定試料：細胞，測定波長：360/450, 540/600 nm，種交差性：Human/Mouse/Rat | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年8月15日号（No.496） p.15 | ||||||||||||||||||||
| 製品記事 | New Cell-Based ELISAs for Phospho-Akt (T308) and Phospho-RPS6 (S235/S236) | ||||||||||||||||||||
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| 説明文 | アッセイ法：ELISA，アッセイ数：96 well，検出方法：蛍光，測定試料：細胞，測定波長：360/450, 540/600 nm，種交差性：Human/Mouse | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年8月15日号（No.496） p.15 | ||||||||||||||||||||
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お問い合わせ先（テクニカルサポート 試薬担当）
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