GFPのシグナル増幅，安定化用試薬 | GFP-Booster, ATTO 488 | 蛍光および標識試薬 | 蛍光／標識用試薬 | タンパク質分析 | タンパク質分析

: クロモテック / Chromotek GmbH

[掲載日情報：2012/02/02 現在]

GFPのシグナル増幅，安定化用試薬 GFP-Booster, ATTO 488

免疫細胞染色において，GFPのシグナルを増幅し，安定化する試薬です。GFP融合タンパク質を用いた細胞内局在観察などに有用です。

MEMO

GFPを用いた細胞染色の問題点

GFP（Green Fluorescent Protein）はオワンクラゲ由来の緑色蛍光タンパク質です。組換え技術によるGFP融合タンパク質を用いた細胞内局在の観察など，バイオイメージングの分野で広く活用されています。しかしGFPの蛍光は，核染色試薬BrdUの検出に必要なHCl処理や，FISHのためのクリックケミストリー試薬による標識反応，熱変性処理などによりGFPシグナルが減弱してしまうという問題点があります。本製品は，これらの染色処理を行った細胞におけるGFPシグナルを増強します。

ラクダ科動物抗体とは

通常の抗体は，それぞれ2つの重鎖と軽鎖からなる，大きな複合体分子（～150 kDa）です。しかし，この複合体構造のばらつきにより抗体の使用が制限されたり，阻害される場合があります。一方，ラクダ科の動物が産生する抗体は軽鎖を欠き，重鎖のみで構成されています。そのため，1つの可変領域（V_HH）のみで抗原を認識することができ，そのサイズはわずか～13 kDaです。
GFP-Booster, ATTO 488

特長

本製品はGFPと特異的に結合するラクダ科動物抗体由来タンパク質「GFP-Trap」^＊を蛍光色素ATTO 488で標識した試薬です。細胞内のGFPに特異的に結合し，ATTO 488の蛍光によりGFPのシグナルを増幅します。
固定・透徹・ブロッキング処理を行った後，本製品をブロッキング溶液で1：200の濃度になるように希釈し，約１時間インキュベートするだけの簡単な操作です。
処理した細胞はDAPIなどのDNA染色試薬による染色も可能で，通常のプロトコルに容易に組み込めます。
wtGFPのほか，eGFP，YFP，eYFPのシグナル増幅にも使用できます（CFP，eCFPには使用できません）。
測定波長：励起501 nm ／蛍光523 nm

※GFB-Boosterは，GFPが変性する前にご使用下さい。
＊GFP-Trapの詳細については，フナコシホームページをご覧下さい。
GFP-Booster, ATTO 488

GFP-Dnmt1を恒常的に発現しているマウスC2C12細胞を用いて，クリックケミストリー試薬で処理後，本製品によるGFPシグナルの増強を行い，観察した。通常，クリックケミストリー試薬処理によりGFPの蛍光は消失するが，本製品で処理した細胞ではGFPシグナルが確認できた。
左：クリックケミストリー試薬によるDNA染色像（赤色）
中：GFP-Dnmt1の発現を本製品で増強した（緑色）
右：DAPI（青色）との三重染色像

GFP-Booster, ATTO 488