DMSOフリーで高生存率の細胞用凍結保存液フナコシ

クライオスカーレスDMSOフリーは，タンパク質やDMSOを含まない，各種細胞用の凍結保存液です。解凍後も様々な培養細胞で高い生存性を示し，幹細胞の多分化能（未分化状態）も維持されます。
※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。

MEMO

DMSOを含む保存液の問題点について

DMSOは一般的に細胞凍結保護成分として保存液に添加されていますが，人体に有害な成分としても知られており，特に皮膚からの吸収性が高くなっています。細胞毒性を有するほか，下記の報告のように，細胞の分化に影響を及ぼす因子の一つであることが明らかとなっています。より正確な実験結果を得るためには，DMSOを含まない条件での保存が必須です。

ヒト前骨髄性白血病細胞株HL-60はDMSOにより顆粒球へ分化する¹
マウスの骨髄間葉系幹細胞はDMSOにより心筋細胞へ分化する²
ヒトES細胞をDMSO含有保存液で凍結保存すると，未分化マーカーであるOct-4の発現が低下する³

参考文献
1. Jiang, G., et al., Int. Immunopharmacol., 6 (7), 1204～1213 (2006).
2. Young, D. A., et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 322 (3), 759～765 (2004).
3. Katkov, I. I., et al., Cryobiology, 53 (2), 194～205 (2006).

■特　長

血清およびタンパク質成分は含まれていないため，アルブミンやグロブリンなどのタンパク質による影響を受けません。
DMSOによる毒性やタンパク質の影響が無いため，安全かつ高い生存率での細胞の凍結保存が可能です。
ほとんどの細胞で，凍結・融解後でも90％以上の生存率を示します。
ヒト／マウスの正常細胞，腫瘍細胞株，幹細胞など，様々な細胞で凍結保存効果が示されています。
幹細胞も分化能を維持したまま凍結保存できます。
無血清培養にも適しています。
無菌試験により細菌，真菌，マイコプラズマの混入がないことを確認しています。
本製品は4℃で長期間安定に保存できます（有効期間2年）。

■実験例

ラット間葉系幹細胞の分化能
本製品で凍結保存したラット間葉系幹細胞の解凍後の分化能を調べ，非凍結群と10％DMSOの場合と比較した。本製品で凍結した細胞は，いずれの分化能も良く維持されていることがわかる。

DMSOフリーで高生存率の細胞用凍結保存液クライオスカーレス（CryoScarless（R）） DMSOフリーラット間葉系幹細胞の生存率

DMSOフリーで高生存率の細胞用凍結保存液クライオスカーレス（CryoScarless（R）） DMSOフリーラット間葉系幹細胞の生存率

ラット間葉系幹細胞の生存率
本製品で凍結保存（1週間）したラット間葉系幹細胞の解凍後の生存率と，6時間後の生存率を測定し，10％DMSOの場合と比較した。解凍直後（0 h），接着後（6 h）の生存率も共に本製品で凍結した場合の方が高い生存率を示した。

■使用実績のある細胞と凍結保存効果

細胞株		生存率（％）^＊
L929	マウス線維芽細胞	97.5 ± 1.2
MG63	ヒト骨肉腫細胞	93.1 ± 2.3
HT1080	ヒト線維肉腫細胞	90.2 ± 4.3
Colon26	マウス結腸癌細胞	92.3 ± 2.3
B16F1	マウスメラノーマ細胞	94.2 ± 0.6
KB	ヒト口腔癌細胞	91.8 ± 0.9
Caco2	ヒト結腸癌細胞	93.7 ± 1.9
MC3T3	マウス骨芽細胞	94.4 ± 0.5
Jurkat E6-1	ヒト白血病細胞	88.4 ± 2.5
HUVEC	ヒト臍帯静脈内皮細胞	89.9 ± 0.4
HCAEC	ヒト冠状動脈内皮細胞	90.1 ± 1.6
MEF	マウス胎児線維芽細胞	94.4 ± 0.8
hACh	ヒト軟骨細胞	93.5 ± 0.7

＊－80℃で3か月凍結保存・融解後24時間目

■操作方法概略

培養細胞をチューブに入れ，遠心分離し，上清を除去する。
本製品を加えて5×105～5×106 cells/mlになるように細胞を懸濁し，1 mlずつ保存用チューブに分注する。
－80℃のディープフリーザーに入れて凍結させる。

※長期保存の場合には液体窒素中で保存する。

3. の状態で保存された細胞を，37℃の恒温槽中で振とうしながら速やかに解凍し，適切な培地（10 ml程度）で遠心洗浄する。

■価　格

サンプルあります！
本製品は，小包装のサンプル品をご用意しています。ご希望の方は当社テクニカルサポート（試薬担当）までお問い合わせ下さい。お申し込みの際は，お申し込み用紙へ必要事項をご記入の上，ご利用の販売店担当者にお渡しください。

[掲載日情報：2011/07/25 現在]

●	お問い合わせ先

	テクニカルサポート（試薬担当） [TEL] 03-5684-1620　[FAX] 03-5684-1775 製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。

DMSOフリーで高生存率の細胞用凍結保存液

クライオスカーレス（CryoScarless（R）） DMSOフリー

■特 長

■実験例

■使用実績のある細胞と凍結保存効果

■操作方法概略

■価 格

クライオスカーレス（CryoScarless^（R）） DMSOフリー

■特　長

■価　格