E. coli または小麦胚芽ライセートを用いた無細胞系のタンパク質合成キットです。迅速かつ高効率にタンパク質が合成できます。in vitro でタンパク質を合成するため，宿主に対して毒性を持つタンパク質の合成が可能です。

お知らせ これまで Roche Applied Science 社より販売しておりました RTS 無細胞系タンパク質合成キットは 2009 年 9 月 15 日より 5 PRIME 社が独占販売することになりました。商品コードの対応表はこちらをご覧下さい。

• E. coli または小麦胚芽ライセートにテンプレートと必要な試薬を混合してインキュベートするだけで，タンパク質が合成できます。
• 透析膜を利用した画期的なシステム，CECF（Continuous Exchange Cell Free Protein Synthesis）Reaction device がキットに含まれています（RTS 100 E . coli HY Kit 以外）。タンパク質合成の過程で生産されるタンパク質合成阻害物質を，透析膜を介して除去することにより，効率的で長時間の反応が可能となり，タンパク質の収量が格段に向上します。
• テンプレート DNA に 6 × His タグ等のエピトープタグ配列を挿入することにより，ウエスタンブロッティングによる発現の確認や精製が可能です。

■ E. coli 無細胞タンパク質合成システムの原理

テンプレート DNA① は E. coli ライセート中で T7 RNA ポリメラーゼにより転写後②，翻訳され③，目的タンパク質が合成される④。



CECF の使用により，タンパク質合成が継続して行われ，収量が劇的に増加している（右）。

■ RTS E. coli HY Kit
E. coli 用 T7 プロモーター発現系で制御されたプラスミドまたは PCR 産物を用いてタンパク質を効率的に合成できます。 E. coli 発現系に対応した T7 プロモーター，リボソーム結合部位，T7 ターミネーターを含む直鎖状 DNA^*1 または環状プラスミド^*2 をテンプレートとして使用できます。

■ RTS E. coli Disulfide Kit
反応液中で転写・翻訳とジスルフィド結合形成が行えるキットです。機能活性を有するタンパク質合成の収量を最大限に高めるために最適化された E. coli ライセート，GroE シャペロンやレドックスバッファーなどが含まれています。E. coli 発現系に対応した環状プラスミド^*2をテンプレートとして使用できます。

■ RTS Wheat Germ HT Kit CECF Kit
小麦胚芽無細胞タンパク質合成システムに対応した構造を持つ環状プラスミド^*3 ，直鎖状 DNA^*4 またはmRNA を用いてタンパク質を効率的に合成できます。真核生物由来 cDNA の発現に適しており，E. coli ライセートを用いた無細胞発現系において十分なタンパク質発現が得られなかった試料に用いることで，収量や可溶性の改善を期待できます。

＊1直鎖状 DNA の合成には RTS E . coli Linear Template Generation Set, His-tag（#2401000）の使用をお勧めします。
＊2発現プラスミドの構築には RTS pIVEX His 6 -tag, 2nd Generation Vector Set（#2401010）の使用をお勧めします。
＊3発現プラスミドの構築には RTS pIVEX Wheat Germ His6-tag, Vector Set（#2402010）の使用をお勧めします。
＊4 直鎖状 DNA の合成には RTS Wheat Germ Linear Template Generation Set, His-tag (#2402000)の使用をお勧めします。

商品コード	品　名	反応数	反応液の容量	反応液の容量期待収量 （1 反応あたり）*5	反応時間	使用可能な テンプレート
2401100	RTS 100 E. coli HY Kit	24	50 μl	～ 20 μg	～ 6 時間	L, P
2401110		96	50 μl	～ 20 μg	～ 6 時間	L, P
2401500	RTS 500 E. coli HY Kit, Proteo Master*6	5	1 ml	～ 6 mg	～ 24 時間	P
2401900	RTS 9000 E. coli HY Kit*6	1	10 ml	～ 50 mg	4 ～ 24 時間	P
2401120	RTS 100 E. coli Disulfide Kit*6	24	50 μl	～ 80 μg	～ 24 時間	P
2401520	RTS 500 E. coli Disulfide Kit*6	5	1 ml	～ 2 mg	～ 24 時間	P
2402100	RTS 100 Wheat Germ CECF Kit*6	24	50 μl	～数 10 μg	～ 24 時間	L, P, R
2402500	RTS 500 Wheat Germ CECF Kit*6	5	1 ml	～数 100 μg	～ 24 時間	L, P, R

L：直鎖状DNA，P：プラスミド，R：mRNA
＊5 テンプレートDNA の由来や配列の影響により，タンパク質合成量が期待収量に満たない場合があります。
＊6 Eppendorf Thermomixer comfort が必要です。詳細は当社テクニカルサポート（試薬担当：下記参照）までお問い合わせ下さい。

■特長

• 6 × His 融合タンパク質との高い結合能（5 ～ 50 mg 6×Histagged protein/ml resin）を有します。
• 非特異的な結合が抑えられています。
• 小スケールでも使用でき，またスケールアップも容易です。

■アプリケーション

• FPLC
• バッチ法を含むカラムクロマトグラフィー