miRNA などの small RNA（18 ～ 28 mer）を包括的にクローニングするキットです。キットに含まれる試薬は Ready-to-use で，ラジオアイソトープを用いずにクローニングを行えます。新規 miRNA の探索や配列決定に有用です。 ■特 長 - miRNA の脱リン酸化，再リン酸化のステップが不要となり，より効率的なクローニングが可能です。
- クローニング過程での small RNA のライゲーション産物は，着色済みのサイズマーカー（Colored guide size marker）により可視光条件下で確実に除去でき，クローニングで問題となる副生成物を除くことができます。ゲルの染色は不要です。
- 詳細な step-by-step のプロトコルが添付されています。
■キット内容 - MI-A3' linker
- MI-R5' linker
- Control RNA (21 mer)
- Ligase 3'
- Ligase 3' buffer
- Ligase 5'
- Ligase 5' buffer
- RNA loading buffer PA
- Colored guide size marker
- PEG solution
- RT buffer
- 10 mM dNTPs mixture
- Reverse transcriptase
- Taq DNA polymerase
- Amplification buffer
- Nuclease-free water
- 3' RT primer
- 5' Primer
- Glycogen
- Sodium acetate solution
- RNA extraction buffer
※キットに T ベクターは含まれていません。 DynaExpress TA Cloning Kit（#DS125）のご使用をお勧めします。 ■操作方法概略  - miRNA を直接 MI-A3' linker とライゲーションさせ，ガイドサイズマーカーを指標にポリアクリルアミドゲルで電気泳動する。miRNA の脱リン酸化は不要。
- MI-A3' linker 結合 miRNA をゲルから抽出し，MI-R5' linker とライゲーションする。miRNA の再リン酸化は不要。
- MI-R5' および MI-A3' linker と結合した miRNA をゲルから抽出後に逆転写する。
- PCR を行うことにより，T ベクターにクローニング可能な cDNA が得られる。
- T ベクターにクローニングする。
■価 格 |
| [掲載日情報：2010/01/25 現在] |
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お問い合わせ先 |
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テクニカルサポート（試薬担当）
[TEL] 03-5684-1620 [FAX] 03-5684-1775
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