浸潤能を持つ接着細胞を計数できるキットです。本製品は，96 ウェルプレートの各ウェルの中央部にシリコーン樹脂製のストッパーをセットすることで，浸潤検出領域を作ります。メンブレンフリーなため，より自然に近い状態で浸潤能を測定できます。

• 細胞浸潤時の形態や浸潤突起の観察にも使用できます。
• 特別な測定用装置を必要とせず，通常の倒立顕微鏡や蛍光マイクロプレートリーダーで測定できます。
• 柔軟性が高いシステムで，細胞の標識に呈色プローブ，蛍光色素などが使用できます。
• カイネティックアッセイおよび，エンドポイントアッセイのいずれの方法でも測定できます。
• プレートの各ウェル底面を基底膜抽出物（BME）でコートし，細胞を定着させた後，さらにBME で覆うことで，三次元 BME での浸潤測定ができます。

※検出には蛍光色素の使用を推奨します。発色色素の場合はプレート底面の傷などにより検出しにくくなる可能性があります。

■HT-1080 細胞の浸潤アッセイ


FBS 無添加（0％）または添加（10％）した重層 BME 中で，血清飢餓状態の HT-1080 細胞を 48 時間インキュベートした。細胞は Calcein AM で標識しておき，蛍光顕微鏡による観察（A）と，蛍光プレートリーダーによる定量（B）を行った。ネガティブコントロールとして，非浸潤性の NIH 3T3 細胞を用いた。
その結果，三次元BME 内で HT-1080 細胞に浸潤突起が形成された（A）。浸潤細胞は10％FBS 存在下で，25 〜 30％ 増加した（B）。

■HT-1080 細胞の浸潤突起

Oris Cell Invasion Assay 後の HT-1080 細胞を用いて免疫染色を行った。浸潤突起の形成を促進する Cortactin（左図）と，細胞骨格の主成分である F-actin（中図）に対する抗体を用いた。これらを重ね合わせ浸潤突起を観察すると（右図），Cortactin と F-actin が共局在化していることがわかる^1，2。

1. Weaver AM, Clin. Exp. Metastasis, 23, 97 〜 105（2006）.
2. Furmaniak-Kazmierczak, et al., Circulation Research, 100, 1328 〜 1336（2007）.