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※掲載されているすべての製品は研究用です。

PI3 キナーゼの活性測定や，阻害物質のスクリーニングに有用なキット

PI3-Kinase Assay Kit

PI3 キナーゼの活性測定や，阻害物質のスクリーニングを行う際に有用なキットです。PI3 キナーゼの阻害活性は，Lipid substrate へ取り込まれた[ γ 32P]-ATP 量を測定することにより決定します。

■操作方法概略

前処理
  1. [ γ 32P ]-ATP mix *1 と Lipid substrate vesicle を調製する。
キナーゼアッセイ
  1. Kinase assay mix*2 を調製し，室温で 5 分間インキュベーションする。
  2. 2. に[ γ 32P ]-ATP mix*1 を加え，反応を開始する。
  3. 37 ℃で 15 分間インキュベーションする。
  4. 塩酸を加え，反応を停止する。
Lipid substrate の抽出
  1. 5. にクロロホルム／メタノール溶液を加える。
  2. 撹拌した後，遠心して二層に分離し，水層（上層）を捨てる。
  3. 有機層（下層）を塩酸で洗浄し，水層（上層）を捨てる。
定量*3
  1. 8. の有機層を TLC プレートで分離（展開溶媒／酢酸：イソプロパノール＝ 1：2）する。
  2. プレート上の PI 3-Kinase のスポットを可視化させて定量する。
＊1 キットに[ γ 32P]-ATP は含まれていません。
＊2 Reaction buffer ＋ Lipid substrate vesicle ＋ PI 3-Kinase sample
＊3 有機層を液体シンチレーションカウンターで測定することも可能です。

■キット内容

  • Reaction buffer
  • ATP
  • Lipid substrate
  • Control PI 3-Kinase
在庫 ： 2012年02月10日 12:15 現在
メーカー商品コード品名包装価格(¥)在庫保存
条件		詳細
情報
　説明文法規制等
掲載カタログ
JBSPR-943PI3-Kinase Assay Kit (8×12asssays)1kit79,000お問合せ-20℃　
　　
総合カタログBS ［試薬・受託］ 2009-2010 (p. 612)
ニュース 2010年5月 1日号(No463) (p. 17)
試薬ニュース 2008年8月15日号(No420) (p. 14)　
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[掲載日情報：2008/08/18 現在]

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テクニカルサポート（試薬担当）
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