神経細胞染色用トレーサーフナコシ

NEUROBIOTIN Tracer は神経の細胞内染色に有用なビオチンのアミノ誘導体です。Biocytin 等の一般的なトレーサーと比較して水溶性が高く，導入効率に優れています。

NEUROBIOTIN Tracer による神経細胞の染色画像

記録電極の作製
ミクロフィラメントの入ったガラスキャピラリー（外径： 1〜2mm）を牽引し，記録電極を作製する。これに電極内液として 2％ NEUROBIOTIN Tracer/1.0M メチル硫酸カリウム（または 1.0M 塩化カリウム）溶液を充填させる。
細胞内への導入
脳スライス標本中のニューロンに記録電極を刺入し，脱分極性の矩形波を2〜10分間通電することによりNEUROBIOTIN Tracer を細胞内に拡散させる。
切片の作製
脳スライス標本を 4％ PFA で一晩固定し，Vibratome で薄切するか凍結切片（40μm）を作製する。PBS で洗浄後，0.4％ Triton-X100/PBS 溶液で 1〜2 時間処理する。
各種染色法による検出
- VECTASTAIN ABC 試薬＋ DAB 基質（発色による観察）
- アビジン＋酵素標識ビオチン＋ DAB 基質（発色による観察）
- 蛍光標識アビジン（蛍光による観察）

H. Kita, W. Armstrong, J . Neurosci. Methods. Apr; 37 (2):141〜150（1991）.

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[掲載日情報：2008/03/31 現在]

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神経細胞染色用トレーサー