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血液，組織，細胞などの試料DNA 中の非メチル化シトシンを，亜硫酸水素塩により短時間でほぼ完全にウラシルに変換して精製するキットです。変換処理前にDNA 精製操作を必要とせず，細胞／組織試料をそのまま変換処理に使用できます。

ZYMO RESEARCH 社ニュースレター『 Peanuts Vol.9 Issue 1 2009 -Epigenetic Special Edition - 』には，エピジェネティクス関連のレビュー，テクノロジー解説などの他，本誌品の使用文献も掲載されています。詳細はこちらをご覧下さい。

特長

• 固形組織，培養組織，白血球，バフィーコート，生検標本，レーザーキャプチャーマイクロダイセクション（LCM）から得られた試料，ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）試料などに使用できます。
• わずか 10 個の細胞，または 50 pg の DNA からの処理が可能です。
• 試料 DNA 中の非メチル化シトシンの 99.5％以上がウラシルに変換されます。ウラシル変換は非メチル化シトシン特異的で，メチル化シトシンの 99.5％以上が保護されて変換されません（図1 参照）。
• 高純度の変換 DNA が高い回収率（＞80％）で回収できます。
• 精製した変換 DNA は PCR で増幅後，エンドヌクレアーゼ処理，シークエンシング，メチレーションマイクロアレイなどによるメチル化 DNA 解析に有用です。
• チューブフォーマットと96 ウェルフォーマットの製品があり，更に96 ウェルフォーマットの製品はプレートの深さが異なる 2 種類の製品があります（表1 参照）。

図1：変換反応後のDNA の塩基配列

5 番目のシトシンがメチル化されているDNA を本製品により変換し，PCR で増幅した後，
ダイレクトシークエンシングを行った。メチル化シトシン（5 番目）はシトシンのまま，
非メチル化シトシン（7, 9, 11, 14, 15 番目）はウラシルに変換されている。

表1：EZ-96 DNA Methylation-Direct Kit のBinding plate の仕様

商品コード	#D5022	#D5023
Binding plate	Silicon-A binding plate	Zymo-spin I -96 binding plate
形状	Shallow-Well	Deep-Well
Binding plate の高さ	19 mm	35 mm
Binding plate と Collectionplate を組み合わせた時の高さ	43 mm	60 mm
DNA 結合量／最小溶出量	5 μg／30 μl	5 μg／15 μl

操作法概略

EZ DNA Methylation Kit シリーズ各キットの操作法概略

キット内容

共通

• Proteinase K and storage buffer
• M-digestion buffer
• M-dilution buffer
• CT conversion reagent
• M-solubilization buffer
• M-wash buffer
• M-reaction buffer
• M-binding buffer
• M-elution buffer
• M-desulphonation buffer

#D5020, #D5021

• Zymo-spin IC column
• Collection tube

#D5022, #D5023

• Collection plate
• Elution plate
• Conversion plate with pierceable cover film
• Silicon-A binding plate（#D5022）
• Zymo-spin I -96 binding plate（#D5023）

※96 ウェルフォーマットの製品は，対応した遠心分離機およびローターが別途必要です。

価格

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