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試薬記事カテゴリー
TUNEL法によるアポトーシス検出用キット TACS2 TdT in situ Apoptosis Detection Kit
MEMO
アポトーシスとネクローシス
アポトーシスを起こした細胞は，クロマチンの凝集，DNAの断片化，細胞膜のブレブ（突起物）形成などの様々な形態変化を示し，周囲の貪食細胞に貪食・分解されます。ネクローシスを起こした細胞は，核，細胞質，リソソーム膜が分解し，最終的には細胞が膨張し，破壊されます。
共通の特長
- 凍結／パラフィン包埋／プラスチック包埋組織，固定細胞中のアポトーシスを検出できます。
- 操作に必要な試薬がすべて含まれています。
- 標識反応に必要なカチオン試薬（コバルトイオン，マグネシウムイオン，マンガンイオン）の使用濃度は最適化済みです。カチオンの選択については各試料別の推奨試薬の組み合わせ（下表参照）を参考にしていただくか，当社テクニカルサポート（試薬担当）までお問い合わせ下さい。
- 各標識試薬にはTrevigen社独自のバッファーを採用しており，毒性のある成分は含まれていません。
- TdTは高純度の精製品です。
- ポジティブコントロール作製用試薬としてTACS-Nucleaseが，組織内に試薬を浸透させやすくするための試薬としてCytoninが添付されています。
- 抗体などとの二重染色も可能です。
各キットの特長
■ TACS2 TdT DAB Kit- ビオチン標識dNTP，HRP標識ストレプトアビジン，DAB基質を用い，光学顕微鏡で検出します。
- DAB基質は免疫組織染色で広く用いられています。
- アポトーシスを起こした細胞を赤褐色に染色します。 対比染色として用いるMethyl Green染色液もキットに添付されています。
■ TACS2 TdT Blue Label Kit
- ビオチン標識dNTP，HRP標識ストレプトアビジン，Blue Label基質を用い，光学顕微鏡で検出します。
- Blue Label基質は，DABで指摘されているような発癌性は報告されていません。
- アポトーシスを起こした細胞を青色に染色します。 対比染色として用いるNuclear Fast Redもキットに添付されています。
■ TACS2 TdT Fluorescein Kit
- ビオチン標識dNTP，FITC標識ストレプトアビジンを用い，蛍光顕微鏡で検出します。
- アポトーシスを起こした細胞を緑色蛍光に染色します。
検出原理
DNAの断片化により，DNAの末端に遊離3'-OH基が生じます。これは固定組織や固定細胞でも維持されます。TdT（Terminal deoxynucleotidyl transferase）はこの3'末端にヌクレオチドを転移する酵素で，標識ヌクレオチド（図中のN＊）を用いることで断片化DNAを標識し，可視化することができます。
検出例
各試料別の推奨試薬の組み合わせ例
| 試 料 | カチオン溶液 | 発色基質 | Cytonin | Proteinase K | ||||
| Co2＋ | Mn2＋ | Mg2＋ | DAB | Blue Label | 1：50 | 1：200 | ||
| 脳 | － | ● | － | ● | ● | ● | － | ● |
| 心臓＊ | ● | ● | － | － | ● | － | ● | － |
| 肺 | ● | － | － | ● | ● | ● | － | ● |
| 肝臓 | ● | ● | － | ● | － | － | ● | － |
| 腎臓 | － | ● | － | ● | ● | － | ● | － |
| 脾臓 | ● | － | － | ● | － | － | ● | － |
| 十二指腸 | ● | － | － | ● | － | － | ● | － |
| 大腸 | ● | ● | － | ● | － | ● | ● | － |
| 小腸 | ● | ● | － | ● | － | ● | ● | － |
| 結腸 | ● | － | － | － | － | ● | ● | － |
| 骨・軟骨 | － | ● | － | ● | ● | ● | ● | － |
| 神経＊ | － | － | － | ● | － | － | － | － |
| 皮膚＊ | － | ● | － | － | ● | － | ● | － |
| 培養細胞（乾燥） | ● | ● | － | － | － | ● | ● | － |
| 培養細胞（新鮮） | ● | ● | － | － | － | ● | － | ● |
| 上皮細胞 | － | ● | － | ● | － | － | ● | ● |
| 内皮細胞＊ | － | ● | － | － | ● | － | ● | ● |
| 線維芽細胞 | － | ● | － | ● | ● | － | － | － |
| 造血細胞 | ● | － | － | ● | － | － | － | － |
| 肝細胞 | ● | ● | － | ● | － | － | － | － |
| 単球 | － | ● | － | － | ● | － | － | － |
| 腫瘍＊ | － | ● | ● | ● | － | － | － | － |
※使用するカチオンは1種類のみです。
※上表の組み合わせは一例です。
キット内容
| TACS2 TdT Kit | DAB | Blue Label | Fluorescein | Core | Replenisher | キット別売品 | ||
| 商品コード | 4810-30-K | 4811-30-K | 4812-30-K | 4810-30-CK | 4810-30-R | 商品コード | ||
| 標識試薬 | ヌクレオチド標識用 | TdT labeling buffer | ● | ● | ● | ● | － | 4810-30-02 |
| TdT stop buffer | ● | ● | ● | ● | － | 4810-30-03 | ||
| TdT dNTP mix | ● | ● | ● | ● | ● | 4810-30-04 | ||
| TdT enzyme | ● | ● | ● | ● | ● | 4810-30-05 | ||
| カチオン溶液 | Co2+ | ● | ● | ● | ● | ● | 4810-90-09 | |
| Mg2+ | ● | ● | ● | ● | ● | 4810-30-10 | ||
| Mn2+ | ● | ● | ● | ● | ● | 4810-90-14 | ||
| 検出試薬 | 標識ヌクレオチド検出用 | Streptavidin-HRP | ● | ● | － | ● | ● | 4800-30-06 |
| Streptavidin-fluorescein | － | － | ● | － | － | 4800-30-14 | ||
| 発色基質 | DAB solution | ● | － | － | － | － | 4800-30-07 | |
| DAB enhancer | ● | － | － | － | － | － | ||
| TACS Blue Label | － | ● | － | － | － | 4800-30-BL | ||
| Blue streptavidin-diluent | － | ● | － | － | － | |||
| 対比染色 | Methyl green solution | ● | － | － | － | － | 4800-30-18 | |
| Nuclear fast red | － | ● | － | － | － | 4800-30-17 | ||
| その他 | 試料処理用 | Proteinase K | ● | ● | ● | － | ● | 4800-30-01 |
| Cytonin | ● | ● | ● | － | － | 4876/5/1 | ||
| ポジコン作製用 | TACS-Nuclease | ● | ● | ● | － | － | 4800-30-N | |
| TACS-Nuclease buffer | ● | ● | ● | － | － | |||
価格
| メーカー | 商品コード | 商品名 | 包装 | 価格 | 在庫 | リスト |
|---|---|---|---|---|---|---|
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4800-30-01 | Proteinase K Solution | 30μl | \6,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4800-30-06 | Streptavidin, HRP Conjugate | 30μl | \9,000 | 1個 | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4800-30-BL | Blue Label & Strep-Diluent (30 samples) | 1set | \9,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4800-30-14 | Streptavidin, FITC Conjugate | 30μl | \11,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4800-30-07 | DAB Solution <Diaminobenzidine> | 3.75ml | \6,000 | 2個以上 | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4800-30-17 | Nuclear Fast Red | 50ml | \8,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4800-30-18 | Methyl Green | 50ml | \8,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4800-30-N | TACS Nuclease and Buffer | 1set | \10,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4810-30-K | TACS 2 TdT Kit, HRP-DAB (30 samples) | 1kit | \57,000 | 無 (発注済) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4810-90-09 | Cobalt Cation | 3x30μl | \6,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4810-90-14 | Manganese Cation | 3x30μl | \6,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4810-30-04 | TdT dNTP Mix | 30μl | \17,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4810-30-05 | TdT Enzyme (450 units) <Apoptosis Grade TdT Enzyme> | 30μl | \25,000 | 1個 | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4810-30-02 | TdT Labeling Buffer, 10× | 100ml | \11,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4810-30-03 | TdT Stop Buffer, 10× | 100ml | \7,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4810-30-CK | TACS 2 TdT Core Kit (30 samples) | 1kit | \48,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4810-30-R | TACS 2 TdT Replenisher Kit (30 samples) | 1kit | \43,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4810-30-10 | Magnesium Cation | 30μl | \5,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4811-30-K | TACS 2 TdT Kit, Blue Label (30 samples) | 1kit | \57,000 | 無 (発注済) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4812-30-K | TACS 2 TdT Kit, Fluorescein (30 samples) | 1kit | \57,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4876-05-01 | Cytonin | 5ml | \10,000 | 無 (未発注) | 追加 |
| メーカー | 商品コード | 商品名 | 包装 | 価格 | 在庫 | リスト | |||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4800-30-01 | Proteinase K Solution | 30μl | \6,000 | 無 (未発注) | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | TACS1 Klenow,TACS2 TdT,TumorTACS,CardioTACS in situ Apoptosis Detection Kit,TACS-XL-BrdUTP based in situ end labeling(TUNEL) Assay Kitのキット別売品。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4800-30-06 | Streptavidin, HRP Conjugate | 30μl | \9,000 | 1個 | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | TACS1 Klenow,TACS2 TdT,NeuroTACS,TiterTACS 96 well Plate Assay,TumorTACS,CardioTACSの in situApoptosis Detection Kitのキット別売品。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4800-30-BL | Blue Label & Strep-Diluent (30 samples) | 1set | \9,000 | 無 (未発注) | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | Blue Label(#4800-30-11),Strep Diluent(#4800-30-12)のセット。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4800-30-14 | Streptavidin, FITC Conjugate | 30μl | \11,000 | 無 (未発注) | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | TACS1 Klenow,TACS2 TdT,Flow TACS in situ Apoptosis Detection Kitのキット別売品。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4800-30-07 | DAB Solution <Diaminobenzidine> | 3.75ml | \6,000 | 2個以上 | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | |||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4800-30-17 | Nuclear Fast Red | 50ml | \8,000 | 無 (未発注) | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | TAC 2 TdT Kit(#4810-30-K)のキット別売品。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4800-30-18 | Methyl Green | 50ml | \8,000 | 無 (未発注) | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | counterstain色素。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4800-30-N | TACS Nuclease and Buffer | 1set | \10,000 | 無 (未発注) | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | TiterTACS 96 well Plate Assays,TACS-XL-BrdUTP based in situ end labeling(TUNEL)Assay,TumorTACS,CardioTACS,NeuroTACS,FlowTACS in situ Apoptosis Detection Kitのキット別売品。バッファー(#4800-30-16)添付。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4810-30-K | TACS 2 TdT Kit, HRP-DAB (30 samples) | 1kit | \57,000 | 無 (発注済) | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | アポトーシスで断片化したDNAをTUNEL法(TdT mediated dUTP nick end labeling)により標識,検出するキット。DABをHRPの基質とする。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4810-90-09 | Cobalt Cation | 3x30μl | \6,000 | 無 (未発注) | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | |||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | |||||||||||||||||||||
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| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4810-90-14 | Manganese Cation | 3x30μl | \6,000 | 無 (未発注) | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | TACS 2 TdT Kit(#4810-30-K)のキット別売品。50×Mn2＋(#4810-30-14)の3本パック。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | |||||||||||||||||||||
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| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4810-30-04 | TdT dNTP Mix | 30μl | \17,000 | 無 (未発注) | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | FlowTACS,TumorTACS,CardioTACS,in situ Apoptosis Detection Kitのキット別売品。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4810-30-05 | TdT Enzyme (450 units) <Apoptosis Grade TdT Enzyme> | 30μl | \25,000 | 1個 | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | TACS-XL-BrdUTP based in situ end labeling(TUNEL) Assay,FlowTACS,TumorTACS,CardioTACS,in situ Apoptosis Detection Kitのキット別売品。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| TRZトレビジェン TREVIGEN, Inc. | 4810-30-02 | TdT Labeling Buffer, 10× | 100ml | \11,000 | 無 (未発注) | 追加 | |||||||||||||||
| 説明文 | TACS-XL-BrdUTP based in situ end labeling(TUNEL) Assay,TumorTACS,CardioTACS,in situ Apoptosis Detection Kitのキット別売品。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| 説明文 | TACS-XL-BrdUTP based in situ end labeling(TUNEL) Assay,TumorTACS,CardioTACS,in situ Apoptosis Detection Kitのキット別売品。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| 説明文 | 染色試薬を含まないキット。免疫組織染色用に任意の染色試薬を選択可能。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| 説明文 | 試薬補充用。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| 説明文 | アポトーシスで断片化したDNAをTUNEL法(TdT mediated dUTP nick end labeling)により標識,検出するキット。強い青色シグナルを生じるBlue LabelをHRPの基質とする。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| 説明文 | TUNEL法(TdT mediated dUTP nick end labeling)により標識,検出するキット。取り込まれたビオチン標識ヌクレオチドを蛍光標識アビジンで観察。 | ||||||||||||||||||||
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| 掲載カタログ | ニュース 2011年9月 1日号（No.497） p.22 | ||||||||||||||||||||
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| 説明文 | TACS in situ Apoptosis Detection Kitシリーズの別売品。 | ||||||||||||||||||||
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