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簡便・高感度, 特異性に優れたグルカゴン測定キット Glucagon ELISA Kit

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:8153

グルカゴンをサンドイッチ法で高感度に測定するELISAキットです。グリセンチンの影響を極限にまで排除したヒト用のキットと、ヒトを含むラットやマウスなど幅広い動物種に適応したキットがあります。

本製品にヒト試料での適用が新たに検証されました。詳細はこちらをご覧下さい。

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Mercodia社は糖尿病を初めとする代謝関連の高品質なELISA キットを製造しているスウェーデンのメーカーです。Mercodia社ELISAキットは世界中の研究者に広くご使用いただいており、数多くの名の知れた論文誌に掲載されています。中でもMercodia Insulin ELISA Kitは米国糖尿病学会(ADA)協賛のインスリン測定法標準化のワークショップで唯一、総合測定誤差基準を満たすキットとして認定されています
Clin. Chem., 55(5), 1011~1018 (2009). [PMID:19325009]

糖尿病の研究に インスリン/C-ペプチド/グルカゴン測定キット<特集> -Mercodia社 糖尿病研究 インスリン/C-ペプチド/グルカゴン測定キットMercodia

グルカゴン(Glucagon)とは

グルカゴン(Glucagon)は、膵臓のα細胞においてプログルカゴン(Proglucagon)から産生される29 アミノ酸のポリペプチドです(図1)。一般に、グルカゴンはインスリンとは逆に、血中グルコースレベルを上昇させます。グルカゴンは、肝臓においてグリコーゲンをグルコースに変換し血流中に放出します。肝臓におけるグルカゴンの作用が長期間にわたると、遊離脂肪酸の酸化およびケトン産生が促進されます。低血糖時にはグルカゴン分泌により、脳や神経におけるグルコース欠乏に対する生体防御フィードバック機構が働きます。また、近年では糖尿病における「グルカゴン中心説」が提唱され、注目を集めています。

膵臓のα細胞において分泌されたプログルカゴンは、腸のL細胞などにおいて切断され、グリセンチン(Glicentin)が生じます。グリセンチンは、さらに切断されオキシントモジュリン(Oxyntomodulin)が生じます。これらのペプチドは、各種の刺激によってグルカゴンと同時に分泌されます。また、グルカゴンのC末端部分の断片はミニグルカゴン(Mini-glucagon)とも呼ばれ、膵臓中において全グルカゴン含量に比べて少量ですが存在が報告されています。これらのペプチドはグルカゴンとの相同性が高いため(図2)、これまでグルカゴンのみを特異的に検出することは困難でした。

図1. プログルカゴンと類縁ペプチド

図1. プログルカゴンと類縁ペプチド

図2. グルカゴンと類縁ペプチドのアミノ酸配列の比較

図2. グルカゴンと類縁ペプチドのアミノ酸配列の比較



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特長

  • 高感度で精度の高い測定値が得られます。
  • 試料の前処理や精製は不要です。
  • モノクローナル抗体を使用しているため、ロット間の差が少なくなっています。
  • すべてのCalibrator(凍結乾燥品)は濃度別に調製されているため、標準曲線の作成が容易です。
  • ほとんどの試薬はReady-to-useフォーマットです*1
  • 試薬は着色されているため、分注操作のミスを減らすことができます。
  • #10-1281-01は検出用抗体に酵素標識抗体を用いているため、ビオチン標識抗体を用いている場合よりもインキュベーションの回数が1回少なくなっており、操作時間を短縮できます。
  • #10-1281-01はわずか10μlの少量試料で測定が可能です。げっ歯類など小動物試料中のグルカゴン測定に適しています。
  • 測定試料中に存在するグリセンチンの影響を極限まで排除したヒト用キットと、ヒトを含む幅広い動物種で使用可能なキットの2種類があります。
キットの種類測定試料中に存在するグリセンチンの影響を
極限まで排除したヒト用キット
ヒトを含む幅広い動物種で使用可能なキット
商品コード10-1271-0110-1281-01
測定動物種ヒトヒトを含む霊長類、マウス、ラット、ブタ
測定試料*2血清、血漿(EDTA処理)、細胞培養液
必要試料量25μl10μl
測定範囲1.5~130 pmol/L (5.95~453 pg/ml)2~180 pmol/L (7~627 pg/ml)
測定感度0.75 pmol/L1.5 pmol/L (5.2 pg/ml)
インキュベーション時間18~22時間(overnight)+1時間 30 分18~22時間(overnight)+15 分
キット内容
  • Coated plate
  • Calibrator 1~5
  • Calibrator 0
  • Assay buffer(#10-1271-01のみ)
  • Enzyme conjugate
  • Enzyme conjugate buffer
  • Wash buffer
  • Substrate TMB
  • Stop solution

*1 一部の試薬は調製が必要です。詳細は製品添付のマニュアルをご覧下さい。
*2 #10-1281-01において、ヘモグロビンを多く含む試料(500 mg/dL 以上)は正確に測定できない場合があります。

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グルカゴン関連ペプチドとの交差性

 Cross-reactivity(%)
商品コード10-1271-0110-1281-01
Mini-glucagon-n.d.
Glicentin, Humann.d.1.0
Glicentin, Mouse-7.0
Glicentin, Rat-4.0
Oxyntomodulin
Human/Rat/Mouse
4.0
(Humanのみ)
2.0
Oxyntomodulin
Bovine/Canine/Porcine
-n.d.
GLP-1 (7-36)-n.d.
GLP-1 (9-36)-n.d.
GLP-2-n.d.
Proglucagon 1-61n.d.-
Glucagon 3-29n.d.-

生体内にはグルカゴン全長と共通の配列を持つタンパク質が多数あります。よって、グルカゴン濃度の正確な測定は難しく、多くの市販キットは同時にグリセンチン(オキシントモジュリン)も検出してしまいます。研究にはインスリン単体よりインスリン:グルカゴン比が指標として用いられることが多いですが、非特異的な測定結果では真の値を出すことができません。
Mercodia社のキットはグルカゴンの両端を認識する2種類のモノクローナル抗体を使用することで、特異的かつ感度の高い測定を可能にしました。

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使用例

グルカゴン(Glucagon)測定ELISAキットの標準曲線

グルカゴン(Glucagon)測定ELISAキットの標準曲線の例
左:#10-1271-01、右:#10-1281-01

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使用文献

Rina Komazaki, R., et al., Sci. Rep., 7 (1), 13950 (2017) [PMID:29066788]

これまでの知見から、歯周病は2型糖尿病やアローム性動脈硬化などを発症するリスクを高めると考えられています。また、飲み込んだ歯周病菌は腸内フローラに影響を与える可能性があります。
Komazakiらはメジャーな歯周病菌のひとつであるAggregati-bacteractinomycetemcomitans(以下、Aa)の脂肪蓄積、グルコース代謝、腸内細菌への関わりについて解析し、「Aaは腸内フローラ環境を荒らすため、NAFLD(非アルコール性脂肪肝疾患)のリスク要因になりうる」と結論づけています。
Aa投与マウス血漿中のグルカゴン測定に、#10-1281-01が使用されました。

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Glucagonに関するホワイトペーパー

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テクニカルノート

Mercodia社では各製品について詳細な技術資料(テクニカルノート)をご用意しています。
●をクリックすると、テクニカルノートをダウンロードできます。

テクニカルノート 対象製品
Glucagon ELISA Kit Glucagon ELISA Kit, 10μl Human Glicentin ELISA Kit
#10-1271-01 #10-1281-01 #10-1273-01
tn34-161:Glucagon ELISA 測定方法(変更前)    
tn34-162:Glucagon ELISA特性を高める方法    
tn34-0108:トラブルシューティングガイド  
tn34-0106:マニュアルでのウォッシュ方法  
tn34-0146:Glucagon ELISAにおける試料採取法  
tn34-0155:動物サンプルの検証データ    

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価格

[在庫・価格 :2024年03月28日 19時15分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Glucagon ELISA Kit, Mercodia (96well)
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
試料中のグルカゴンをサンドイッチ法により比色定量するELISAキット。グリセンチンの影響を極限まで排除したヒト用のキット。種交差性:Human,アッセイ法:サンドイッチELISA,測定範囲:1.5~130 pmol/l(5~453 pg/ml),アッセイ数:96 well,検出方法:呈色,測定試料:血清,血漿(EDTA処理),細胞培地,感度:0.75 pmol/l,測定波長:450 nm
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2022年2月15日号 p.6
ニュース2021年5月1日号 p.5

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10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 21
説明文
少量の試料でグルカゴンをサンドイッチ法により比色定量するELISAキット。ヒトを含む幅広い動物種で使用可能。種交差性:Mouse/Rat/Human/Primate/Pig,アッセイ法:サンドイッチELISA,測定範囲:2~180 pmol/l(7~627 pg/ml),アッセイ数:96 well,検出方法:呈色,測定試料:血清,血漿(EDTA処理),細胞培地,感度:1.5 pmol/l(5.2 pg/ml),測定波長:450 nm
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2022年2月15日号 p.6
ニュース2021年7月15日号 p.18

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10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年5月1日号 p.6
ニュース2020年2月1日号 p.7

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※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

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文献数: 0

説明文 試料中のグルカゴンをサンドイッチ法により比色定量するELISAキット。グリセンチンの影響を極限まで排除したヒト用のキット。種交差性:Human,アッセイ法:サンドイッチELISA,測定範囲:1.5~130 pmol/l(5~453 pg/ml),アッセイ数:96 well,検出方法:呈色,測定試料:血清,血漿(EDTA処理),細胞培地,感度:0.75 pmol/l,測定波長:450 nm
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2022年2月15日号 p.6
ニュース2021年5月1日号 p.5

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Glucagon ELISA Kit, 10ul, Mercodia

文献数: 21

説明文 少量の試料でグルカゴンをサンドイッチ法により比色定量するELISAキット。ヒトを含む幅広い動物種で使用可能。種交差性:Mouse/Rat/Human/Primate/Pig,アッセイ法:サンドイッチELISA,測定範囲:2~180 pmol/l(7~627 pg/ml),アッセイ数:96 well,検出方法:呈色,測定試料:血清,血漿(EDTA処理),細胞培地,感度:1.5 pmol/l(5.2 pg/ml),測定波長:450 nm
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2022年2月15日号 p.6
ニュース2021年7月15日号 p.18

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Glicentin, Human, ELISA Kit (96wells)

文献数: 0

説明文
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2021年5月1日号 p.6
ニュース2020年2月1日号 p.7

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メルコディアのグルカゴン測定キット用コントロール

グルカゴン測定キット(#10-1271-01、#10-1281-01)に使用できるコントロールグルカゴンです。3種類の濃度(Low, Medium, High)が含まれています。測定試料にコントロール試料を追加することにより、測定が正しく実施されたどうかを確認できます。

[在庫・価格 :2024年03月28日 19時15分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Mercodia Glucagon Control (L, M and H)
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
グルカゴン測定キット(#10-1281-01)に使用できるコントロールグルカゴン。3種類の濃度(Low, Medium, High)が含まれている。
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年11月1日号 p.27
ニュース2018年2月15日号 p.8

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文献数: 0

説明文 グルカゴン測定キット(#10-1281-01)に使用できるコントロールグルカゴン。3種類の濃度(Low, Medium, High)が含まれている。
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2018年11月1日号 p.27
ニュース2018年2月15日号 p.8

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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