R&D Systems(R&Dシステムズ)社 Quantikine Kit 操作マニュアル
掲載日情報：2017/09/01 現在Webページ番号：80555
追加しました。
- R&D Systems(R&Dシステムズ)社 Quantikine Kit 操作マニュアル
- キット内容
- 準備する物
- 測定可能試料および調製法
- 試薬の調製
- スタンダードの調製法
- 操作時の注意点
- アッセイ方法
R&D Systems(R&Dシステムズ)社 Quantikine Kit 操作マニュアル
R&D Systems(R&Dシステムズ)社 Human VEGF Quantikine ELISA Kit（#DVE00）の操作方法概略です。一般的なELISA キットの操作の参考にして下さい。
※ご注意
ご使用前に必ず各製品添付のデータシートをご覧の上、その指示に従って下さい。
追加しました。
キット内容
- VEGF microplate（捕捉用抗VEGF 抗体がコートされた96well マイクロストリッププレート）
- VEGF conjugate（HRP 標識検出用抗VEGF 抗体）
- VEGF standard（VEGF スタンダード）
- Assay diluent RD1W（測定用バッファー）
- Calibrator diluent RD5K（ 細胞培養上清試料用希釈バッファー）
- Calibrator diluent RD6U（血清・血漿試料用希釈バッファー）
- Wash buffer concentrate（洗浄用バッファー）
- Color reagent A（安定化させたH2O2 ）
- Color reagent B（TMB：HRP の基質）
- Stop solution（反応停止液）
- Plate sealer（プレートシーラー）
追加しました。
準備する物
- マイクロプレートリーダー（450 nm で吸光度を測定可能な物。 補正波長の540 または570 nm が測定できる物がよい。）
- ピペット、ピペットチップ
- 蒸留水
- プレートウォッシャーまたは、プレート洗浄用ボトル
- 500 ml シリンダー
- ポリプロピレンチューブ（12 mm × 75 mm）
- 測定試料
- Human VEGF コントロール（別売品：必要に応じて）
…など
追加しました。
測定可能試料および調製法
- 細胞培養上清（VEGF の安定化のために、少なくとも1％のfetal calf serum を加えて下さい。）
- 血清
- 血漿（抗凝血剤としてEDTA、クエン酸、ヘパリンのいずれかで処理した試料）
※ 詳細は製品添付のデータシートの「SAMPLE COLLECTION ＆STORAGE」の項目をご覧下さい。
追加しました。
試薬の調製
※ 使用する前に試薬はすべて室温に戻して下さい。
洗浄用バッファー ：バッファー中に沈殿物が生じている場合は室温に戻し、よく混合して下さい。その後、最終容量が500 mになるように480 ml の蒸留水を加えて20 ml のWash buffer concentrate を希釈して下さい。
基質溶液 ：使用する15 分前にColor reagent A・B を等量ずつ混合して下さい。各ウェルに200 μ l ずつ必要です。混合後は 必ず遮光して下さい。
VEGF スタンダード ：測定する試料（因子）によって希釈に使用するCalibrator diluent が異なります。添付のプロトコルをご覧下さい。希釈前に、15 分間穏やかに撹拌して下さい。
※ スタンダードを調製する際は、ポリプロピレンチューブ（12mm × 75 mm）をご使用下さい。
追加しました。
スタンダードの調製法
＊ Calibrator diluent はあらかじめ500 μ l ずつ各チューブに分注して下さい。
追加しました。
操作時の注意点
- すべての試料、スタンダードおよびコントロールは二重試験法でアッセイして下さい。
- タンパク質を含む試薬を取扱う際には、気泡を立てないようにして下さい。
- クロスコンタミネーションを避けるために、ピペットチップやリザーバーは試薬ごとに変えて下さい。
- インキュベーション中は必ずプレートシーラーでふたをして下さい。
- プレートウォッシャーを使用してプレート洗浄を行う場合には、プレートを30 秒間洗浄液にソークし、次の洗浄を行う前にプレートの左右の向きを入れ替えて下さい。
- 基質溶液は使用する15 分前に調製して下さい。調製後は必ず遮光して下さい。調製直後は青色ですが、ウェルに添加後、反応停止液を添加すると黄色に変化します。
- 基質溶液、反応停止液をウェルに添加した際に、ウェル中の溶液が緑色になってしまった場合は、プレートを軽くゆすって試薬を混合して下さい。
追加しました。
アッセイ方法
追加しました。
おすすめ製品記事
-
R&D Systems, Inc.
/ BMSC / MSCの分化能を評価するキット
Mesenchymal Stem Cell Functional Identification Kit -
Cell Biolabs. Inc.
/ 酸化ストレス／ホルモン／セル・ベースアッセイの各種キット製品
Cell Biolabs（セルバイオラボ）社製品特集 -
Anacyte Laboratories GmbH
/ 細胞・組織中のDNA、RNA、タンパク質を安定に保存できる試薬
CellCover -
R&D Systems, Inc.
/ 構築済みのELISA Kit
Quantikine ELISA Kit
製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。