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PrecisionX Cas9 SmartNuclease System
[CRISPR-Cas9] guide RNAによる新技術のゲノム編集ツール PrecisionX Cas9 SmartNuclease System
掲載日情報：2020/06/12 現在Webページ番号：7686
CRISPR-Cas9システムで使用する野生型 hspCas9のAll-in-Oneベクターです。CRISPRベクターは線状化されているため、ライゲーションが容易に行えます。
CRISPR-Cas9システムは、ゲノム中で切断したい領域を切断できる遺伝子改変ツール(ゲノム編集ツール)です。
切断したい標的塩基配列を含むguide RNA (crRNA:tracrRNA) とCas9タンパク質により、ゲノム上の任意の配列を切断します。標的配列のデザインの簡便さや実験手法の容易さから、CRISPRはZFN(Zinc Finger Nuclease)やTALEN(Transcription Activator-Like Effector Nuclease)と並び、注目されるゲノム編集（genome editing）技術です。
※ [CRISPR-Cas9] Cas9 Nickaseによるゲノム編集ツールについては、「PrecisionX Mutant Cas9 SmartNuclease Vector System」をご覧下さい。
※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
追加しました。
- 操作法概略
- 特長
- 発現プラスミドのベクターマップ
- 配列のデザイン方法
- 適用例
- キット内容
- 関連文献
- 使用例
- 価格
- コントロール
- PrecisionX HR Targeting Vector
- オリゴ合成受託サービス
- コンピテントセル
- 抗mycタグ抗体
- Cas9の検出
操作法概略
切断したいDNA配列に対する相補的な配列を含むguide RNA、およびその相補鎖を設計し、それらの断片をCRISPRベクターにクローニングします。作製したCRISPR-Cas9発現プラスミドを目的細胞へトランスフェクションすると、CRISPR-Cas9システムにより標的領域が切断されます。
追加しました。
特長
- guide RNA (crRNA:tracrRNA)およびCas9タンパク質は1つのCRISPRベクターから発現できるため、細胞への導入が必要となるCRISPRベクターは1種類のみです。
- CRISPRベクターは線状化されているため、ライゲーションが容易に行えます。
- プロモーターの異なる3種類のCRISPRベクターがあります。
- 10反応分の量が含まれています。
追加しました。
発現プラスミドのベクターマップ
追加しました。
配列のデザイン方法
標的配列は、末端に「GG」が配置されている領域を選択していただき、NGGの上流20塩基で設計します。切断したい標的配列を含むgRNAおよびその相補鎖をオリゴ合成等で作成していただきます。
| 標的領域 | 5’ NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNGG 3’ |
| デザインする配列 | 5’ATCCNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN 3’ 3’NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNCAAA 5’ |
追加しました。
適用例
CRISPR-Cas9システムでの切断後、ゲノムの切断された部分では、塩基の置換や欠損が誘引され、これにより遺伝子のノックアウトができます。また、切断した部位に特定の配列をノックインしたい場合には、その目的配列を含むドナーベクターを一緒にトランスフェクションすると、相同組換えによりその断片をノックインすることができます。
- 遺伝子のノックイン、ノックアウトへの利用
- ゲノム中の任意の位置の改変
追加しました。
キット内容
- Lenearized Cas9 Smart Nuclease vector
- Ligation buffer
- Fast ligase
- Fwd Sequecing primer
追加しました。
関連文献
- Cong L, Ran FA, Cox D, Lin S, Barretto R, Habib N, Hsu PD, Wu X, Jiang W, Marraffini LA, Zhang F. “Multiplex genome engineering using CRISPR/Cas systems. Science, 2013 Feb 15 ;339(6121):819-23. doi: 10.1126/science.1231143. Epub 2013 Jan 3.
- Mali P, Yang L, Esvelt KM, Aach J, Guell M, DiCarlo JE, Norville JE, Church GM. RNA-guided human genome engineering via Cas9. Science, 2013 Feb 15; 339(6121):823-6. doi: 10.1126/science.1232033. Epub 2013 Jan 3.
追加しました。
使用例
Luciferase切断用CRISPRベクターを用いてLuciferase発現293細胞におけるLuciferaseを切断した解析例
CRISPR-Cas9システムを用いてLuciferase切断を標的とするguide RNAを組み込んだCRISPRベクターを作成し、Luciferase発現細胞にトランスフェクションし、切断効果を検証した。Guide RNAは標的配列の異なる2種類’(gRNA1およびgRNA2)を作成した。
A) Luciferase活性測定による検証。Negative controlに対して、gRNA1およびgRNA2ではLuciferase遺伝子の破壊による活性の低下が見られた。
B)Surveyor Assayを行ったところ、gRNA1およびgRNA2においてそれぞれ30%および22％の切断効果が見られた。
Luciferase切断用CRISPRベクターおよびRFPドナーベクターを用いてRFP遺伝子をノックインした解析例
gRNA1およびgRNA2のどちらにおいても切断部分にRFPドナーベクターが組み込まれた。
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月17日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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EF1-T7-hspCas9-H1-gRNA linearized SmartNuclease vector(10tests) |
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CAG-T7-hspCas9-H1-gRNA linearized SmartNuclease vector(10tests) |
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CMV-T7-hspCas9-H1-gRNA linearized SmartNuclease vector(10tests) |
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[在庫・価格 ：2024年04月17日 00時00分現在]
EF1-T7-hspCas9-H1-gRNA linearized SmartNuclease vector(10tests)
文献数： 0
- 商品コード：CAS700A-1
- メーカー：SBI
- 包装：1kit
- 価格：¥158,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
任意のgRNAおよびCas9を発現するベクターを構築するためのキット。EF1α promoterでCas9を発現。10回使い切り。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年9月15日号 p.20 ニュース2021年6月15日号 p.10
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PrecisionX Cas9 SmartNuclease All-in-one Vectors |
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CAG-T7-hspCas9-H1-gRNA linearized SmartNuclease vector(10tests)
文献数： 0
- 商品コード：CAS720A-1
- メーカー：SBI
- 包装：1kit
- 価格：¥158,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
任意のgRNAおよびCas9を発現するベクターを構築するためのキット。CAG promoterでCas9を発現。10回使い切り。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年9月15日号 p.20 ニュース2021年6月15日号 p.10
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PrecisionX Cas9 SmartNuclease All-in-one Vectors |
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CMV-T7-hspCas9-H1-gRNA linearized SmartNuclease vector(10tests)
文献数： 0
- 商品コード：CAS740A-1
- メーカー：SBI
- 包装：1kit
- 価格：¥158,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
任意のgRNAおよびCas9を発現するベクターを構築するためのキット。CMV promoterでCas9を発現。10回使い切り。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年9月15日号 p.20 ニュース2021年6月15日号 p.10
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| 製品記事 |
PrecisionX Cas9 SmartNuclease All-in-one Vectors |
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コントロール
[在庫・価格 ：2024年04月17日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Cas9 SmartNuclease AAVS1-gRNA Targeting vector, EF1a Promoter |
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[在庫・価格 ：2024年04月17日 00時00分現在]
Cas9 SmartNuclease AAVS1-gRNA Targeting vector, EF1a Promoter
文献数： 0
- 商品コード：CAS601A-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥218,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年9月15日号 p.21 ニュース2021年6月15日号 p.11
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PrecisionX Cas9 SmartNuclease All-in-one Vectors AAVS1 SparQ All-In-One Inducible System |
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追加しました。
PrecisionX HR Targeting Vector
切断部位におけるHomologous Recombinationを行うためのドナーベクターが作製できます。
[在庫・価格 ：2024年04月17日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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piggyBac HR Vector (5'MCS-EF1-GFP-Puro-TK-3'MCS) |
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Basic HR Targeting Vector for Gene Knock-In/Out [MCS1-LoxP-MCS2-MCS3-pA-LoxP-MCS4] |
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Gene Knock-Out HR Targeting Vector [MCS1-EF1α-RFP-T2A-Puro-pA-MCS2] |
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GFP-Fusion HR Targeting Vector [GFP-pA-LoxP-EF1α-RFP-T2A-Puro-pA-LoxP-MCS] |
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T2A-GFP Co-Expression HR Targeting Vector [T2A-GFP-pA-loxP-EF1α-RFP-T2A-Puro-pA-LoxP-MCS] |
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GFP-T2A-Luciferase Co-Expression HR Targeting Vector [GFP-T2A-Luc-pA-loxP-EF1α-RFP-T2A-Puro-pA-LoxP-MCS] |
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IRES-GFP Co-Expression HR Targeting Vector [IRES-GFP-pA-loxP-MCS1-EF1α-RFP-T2A-Puro-pA-LoxP-MCS2] |
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piggyBac HR Vector (5'MCS-EF1-GFP-Puro-TK-3'MCS) |
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[在庫・価格 ：2024年04月17日 00時00分現在]
piggyBac HR Vector (5'MCS-EF1-GFP-Puro-TK-3'MCS)
文献数： 0
- 商品コード：PBHR100A-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥275,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
※営利団体・企業(Commercial)にご所属のお客様は，コマーシャルライセンス契約が必要です。 切断部位におけるHomologous Recombinationを行うためのドナーベクターが作製できます。EZ-TAL TALE Assembly KitまたはPrecisionX Cas9 SmartNuclease Systemと組み合わせて使用することにより，ゲノム内に変異の修正や変異の導入を行なうことができる。一旦ゲノムに組み込んだセレクション用のマーカー遺伝子は，PiggyBac Transposaseにより痕跡を残さず除去することが可能。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年9月15日号 p.28 ニュース2021年6月15日号 p.25
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| 製品記事 |
PiggyBac Genome Engineering HR Vector PrecisionX Mutant Cas9 SmartNuclease Vector System |
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Basic HR Targeting Vector for Gene Knock-In/Out [MCS1-LoxP-MCS2-MCS3-pA-LoxP-MCS4]
文献数： 0
- 商品コード：HR100PA-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥190,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
切断部位におけるHomologous Recombinationを行うためのドナーベクターが作製できます。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年9月15日号 p.26 ニュース2021年6月15日号 p.26
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| 製品記事 |
PrecisionX HR Targeting Vector PrecisionX Mutant Cas9 SmartNuclease Vector System |
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Gene Knock-Out HR Targeting Vector [MCS1-EF1α-RFP-T2A-Puro-pA-MCS2]
文献数： 0
- 商品コード：HR110PA-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥204,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
切断部位におけるHomologous Recombinationを行うためのドナーベクターが作製できます。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年9月15日号 p.26 ニュース2021年6月15日号 p.26
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| 製品記事 |
PrecisionX HR Targeting Vector PrecisionX Mutant Cas9 SmartNuclease Vector System |
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GFP-Fusion HR Targeting Vector [GFP-pA-LoxP-EF1α-RFP-T2A-Puro-pA-LoxP-MCS]
文献数： 0
- 商品コード：HR120PA-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥204,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
切断部位におけるHomologous Recombinationを行うためのドナーベクターが作製できます。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年9月15日号 p.27 ニュース2021年6月15日号 p.27
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| 製品記事 |
PrecisionX HR Targeting Vector PrecisionX Mutant Cas9 SmartNuclease Vector System |
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T2A-GFP Co-Expression HR Targeting Vector [T2A-GFP-pA-loxP-EF1α-RFP-T2A-Puro-pA-LoxP-MCS]
文献数： 0
- 商品コード：HR130PA-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥204,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
切断部位におけるHomologous Recombinationを行うためのドナーベクターが作製できます。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年9月15日号 p.27 ニュース2021年6月15日号 p.27
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PrecisionX HR Targeting Vector PrecisionX Mutant Cas9 SmartNuclease Vector System |
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GFP-T2A-Luciferase Co-Expression HR Targeting Vector [GFP-T2A-Luc-pA-loxP-EF1α-RFP-T2A-Puro-pA-LoxP-MCS]
文献数： 0
- 商品コード：HR150PA-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥204,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
切断部位におけるHomologous Recombinationを行うためのドナーベクターが作製できます。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年9月15日号 p.27 ニュース2021年6月15日号 p.27
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PrecisionX HR Targeting Vector PrecisionX Mutant Cas9 SmartNuclease Vector System |
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IRES-GFP Co-Expression HR Targeting Vector [IRES-GFP-pA-loxP-MCS1-EF1α-RFP-T2A-Puro-pA-LoxP-MCS2]
文献数： 0
- 商品コード：HR180PA-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥204,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
切断部位におけるHomologous Recombinationを行うためのドナーベクターが作製できます。 |
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年9月15日号 p.27 ニュース2021年6月15日号 p.27
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| 製品記事 |
PrecisionX HR Targeting Vector PrecisionX Mutant Cas9 SmartNuclease Vector System |
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piggyBac HR Vector (5'MCS-EF1-GFP-Puro-TK-3'MCS)
文献数： 0
- 商品コード：PBHR100A-1
- メーカー：SBI
- 包装：10μg
- 価格：¥275,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
※営利団体・企業(Commercial)にご所属のお客様は，コマーシャルライセンス契約が必要です。 切断部位におけるHomologous Recombinationを行うためのドナーベクターが作製できます。EZ-TAL TALE Assembly KitまたはPrecisionX Cas9 SmartNuclease Systemと組み合わせて使用することにより，ゲノム内に変異の修正や変異の導入を行なうことができる。一旦ゲノムに組み込んだセレクション用のマーカー遺伝子は，PiggyBac Transposaseにより痕跡を残さず除去することが可能。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年9月15日号 p.28 ニュース2021年6月15日号 p.25
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| 製品記事 |
PiggyBac Genome Engineering HR Vector PrecisionX Mutant Cas9 SmartNuclease Vector System |
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追加しました。
オリゴ合成受託サービス
「フナコシ オリゴDNA合成受託サービス」のCRISPR-Cas9システム用の注文書をご用意いたしました。
注文書に必要事項をご記入の上、受託・特注品業務担当(jutaku@funakoshi.co.jp)へメールに添付してお送りください。
希釈して直ぐにご使用いただけるように、100μM(蒸留水)に調整し、クローニング用途としてOPCグレードをお勧めします。
- オリゴDNA合成の注文書はこちら。(xlsファイル、64 KB)
- フナコシ オリゴ合成受託サービスの詳細はこちら。
追加しました。
コンピテントセル
Giga Competent Cell (DH5α)
System Biosciences社では、CRISPRベクターの形質転換の際に、形質転換効率が高いコンピテントセル（＞1×109 CFUs/μg plasmid）を使用することを推奨しております。
形質転換効率が高いコンピテントセルについては、下記製品の取り扱いがございます。
追加しました。
抗mycタグ抗体
Cas9タンパク質にはmycタグが付加するため、抗mycタグ抗体を使用してCas9タンパク質を検出できます。
追加しました。
Cas9の検出
追加しました。
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/ 最新のゲノム広域スクリーニングとCas9細胞株樹立システム
AAVS1 Safe Harbor Targeting System with Cas9 -
PolyPlus-transfection SAS
/ Cas9タンパク質とガイドRNAの導入専用のトランスフェクション試薬
jetCRISPR
製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。