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単一細胞の平均温度追跡用の蛍光プローブ Particulate Thermoprobe®

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:7536

フナコシ /
フナコシ株式会社
[メーカー略称:FNA]

Particulate Thermoprobe®は、細胞内へマイクロインジェクションで導入後、温度依存的に凝集したプローブの蛍光強度を蛍光顕微鏡で測定する事により、細胞の温度を測定できる蛍光プローブです。

本製品は、東京大学より研究用試薬としてライセンスされています。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
細胞内小器官の温度を測定できる蛍光プローブDiffusive Thermoprobe®については、こちらをご覧下さい。

Particulate Thermoprobeをインジェクションした生細胞(COS7細胞)の位相差顕微鏡像

位相差顕微鏡像

Particulate Thermoprobeをインジェクションした生細胞(COS7細胞)の蛍光顕微鏡像

蛍光顕微鏡像

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細胞機能と温度

温度は、細胞内におけるあらゆる化学反応を支配する物理量です。生体分子は細胞内の特定の場所において発熱もしくは吸熱反応を行なうことで、細胞機能を担っています。そのため、細胞内の温度分布は細胞内分子の熱力学や機能を反映しています。また、医学的見地からは、がん細胞などの病態細胞では亢進した熱発生があることが報告されています。以上のことから、細胞内の温度分布が分かれば、細胞の機能に関する理解が深まるとともに、新規診断、治療法の開発にも貢献すると期待されています。

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特長

  • Particulate Thermoprobe®はナノゲルタイプの蛍光性温度プローブで、細胞内へ導入後、温度依存的に凝集し、その蛍光強度は温度に依存します。細胞1個内にあるParticulate Thermoprobe®の蛍光強度を測定する事により、その細胞の平均温度を算出できます。
  • Particulate Thermoprobe®の温度検出限界は、0.5℃以下であり、わずかな温度差も検出できます。
  • Particulate Thermoprobe®による温度測定は、細胞内のイオン強度、pH、タンパク質含有量および粘性により影響を受けません。
  • 平均直径:48 nm
  • 純度:>99%
  • 可溶性:水溶性
  • 形状:黄色粉末

別途、マイクロインジェクション装置が必要です。

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構造と原理

Particulate Thermoprobeの構造と原理

Particulate Thermoprobe®の化学構造

Particulate Thermoprobe®は温度感受性ユニット(polyNIPAM)、水感受性蛍光団ユニット(DBThD-AA)、クロスリンカー(MBAM)から構成されている。温度センサーの水溶液が低温の際には、Particulate Thermoprobe®内に水分子が吸収され、内側にあるDBThD-AAの蛍光は、周辺の水分子により、その発光が消光されている。温度上昇により、Particulate Thermoprobe®が収縮し、水分子の放出に伴って、蛍光を発する。

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操作方法概略

  1. 粉末100μgに10μlの80 mM KCl、10 mM K2HPO4、4 mM NaCl溶液を加え、溶解する。
  2. 4℃で少なくとも8時間静置する。
  3. 溶液1μlをマイクロインジェクションの針に注入する。
  4. 30℃以下の温度で、細胞内へ注入する。
  5. 細胞を30分静置する。
  6. 蛍光顕微鏡で観察する。

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温度依存的な蛍光強度

単一細胞の平均温度追跡用の蛍光プローブParticulate Thermoprobe

COS7細胞抽出物でのParticulate Thermoprobe®の蛍光強度

溶液の温度が23℃から35℃へ増加した時、Particulate Thermoprobe®の蛍光強度は5.9倍増加した。

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使用文献

  1. Uchiyama, S., et al., Chem. Eur. J., 18(31), 9552~9563(2012).
  2. Gota, C., et al., J. Am. Chem. Soc., 131(8), 2766~2767(2009).

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価格

[在庫・価格 :2024年03月29日 17時15分現在]

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詳細 商品名
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  • 法規制等
納期 文献数
Particulate Thermoprobe
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説明文
温度感受性の蛍光性プローブ。単一細胞の平均温度を計測できる。必要装置:マイクロインジェクション, 蛍光顕微鏡。
法規制等
保存条件 室温,暗所保存 法規備考
掲載カタログ

製品記事 Thermoprobe®特集
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Particulate Thermoprobe

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説明文 温度感受性の蛍光性プローブ。単一細胞の平均温度を計測できる。必要装置:マイクロインジェクション, 蛍光顕微鏡。
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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