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オートファジー誘導ペプチド Tat-Beclin-1-D11/Tat-L11

掲載日情報:2017/07/05 現在Webページ番号:65025

従来のBeclin 1ペプチド(18アミノ酸)に比べ配列が短く、より特異的かつ効果的にオートファジーを誘導するペプチドです。Beclin-1のオートファジー誘導領域(11アミノ酸)と、細胞膜透過性を高めるためのHIV-Tatタンパク質を2残基のグリシンリンカーでつないだ配列で構成されています。in vitroおよびin vivoの両方で使用できます。

本製品は、Dr.Beth C Levineが開発したペプチドです。Novus Biologicals社が独占的にライセンス(Bio-Techne's exclusive patent license: US Patent 8,802,633)を受けて販売しています。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

Inducing autophagy with Novus’ Tat-D11 and Tat-L11 Peptides

オートファジー(Autophagy)特集

オートファジー誘導ペプチドTat-D11とは

オートファジーの誘導には飢餓環境やラパマイシン(MTORC1のアロステリック阻害物質)がよく用いられますが、特異性に乏しいため、データの解釈が複雑になり、Atg機能欠損変異体と比較して実験を行う必要がありました。2013年(Nature, 2013; PMID 23364696)、オートファジーを特異的に誘導するTat-Beclin-1が作製されました。Tat-Beclin-1はBeclin-1のオートファジー誘導領域と、HIV-Tatタンパク質の融合ペプチドで、オートファゴソームとオートリソソームの数を増加させ、タンパク質の分解を促進することが示されています。その後、Tat-Beclin-1ペプチドはin vitroおよびin vivoの両方でオートファジーの誘導に用いられてきました。

Novus biologicals社では、Tat-Beclin-1よりも短く、強力にオートファジーを誘導できるTat-Beclin-1 D11(Tat-D11)を新たに開発しました。



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特長

  • 他の細胞内経路に影響することなく、オートファジーを誘導します。ラパマイシンや飢餓環境によるオートファジー誘導に比べ、オフターゲットが起こりにくくなっています。
  • 短時間でインキュベーションや操作を行えます。
  • Tat-D11ペプチドはTat-Beclin1ペプチドより5倍のオートファジー誘導能を示し、必要なTat-D11ペプチドは少量で済みます。
  • Tat-D11とTat-L11は、Beclin-1のオートファジー誘導領域(11アミノ酸)と、細胞膜透過性を高めるためのHIV-Tatタンパク質から構成されています。Tat-D11はD体レトロインベルソ(配列が通常と逆)ペプチド、Tat-L11は天然のL体ペプチドです。
  • Tat-L11S (Tat-Beclin 1 L11S, #NBP2-49887)は、Tat-L11由来の非活性型スクランブルコントロールです。Tat-D11とTat-L11のネガティブコントロールとして使用できます。

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作用機構

Fig2

Tat-D11はオートファジー抑制作用を持つGAPR-1/GLIPR2に結合します。Tat-D11はBeclin-1と拮抗するため、GAPR-1に結合していたBeclin-1が細胞質にリリースされ、オートファゴソームの形成とオートファジーを誘導します。

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使用例

Tat-D11, Tat-L11, Tat-L11S, Tat-Beclin-1で1.5時間処理したHela GFP-LC3b細胞

A. オートファゴソームの蛍光顕微鏡像

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A. オートファゴソームの蛍光顕微鏡像

B. GFP+/LC3b+スポットの数の定量

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B. GFP+/LC3b+スポットの数の定量

Hela細胞におけるTat-D11量依存的なGFP-LC3bの誘導

Hela細胞におけるTat-D11量依存的なGFP-LC3bの誘導

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Hela細胞におけるTat-D11量依存的なGFP-LC3bの誘導
左上図はTat-D11がTat-Beclin-1よりも強力なオートファジー誘導物質であることを示している。

Tat-D11とTat-l1処理HeLa細胞におけるLC3bの誘導とp62の発現減少

Tat-D11とTat-l1処理HeLa細胞におけるLC3bの誘導とp62の発現減少

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Novus社のTat-D-11紹介フライヤー

Novus社のTat-D-11紹介フライヤーはこちら(日本語版英語版)をご覧ください。

Fig1
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参考文献

  1. Mizushima, N. and D.J. Klionsky, Protein turnover via autophagy: implications for metabolism. Annu Rev Nutr,27:19-40(2007).
  2. Stolz, A., A. Ernst, and I. Dikic, Cargo recognition and trafficking in selective autophagy. Nat Cell Biol,16(6):495-501(2014).
  3. Kuma, A., et al., The role of autophagy during the early neonatal starvation period. Nature,432(7020):1032-6(2004).
  4. Komatsu, M., et al., Loss of autophagy in the central nervous system causes neurodegeneration in mice. Nature,441(7095):880-4(2006).
  5. Hara, T., et al., Suppression of basal autophagy in neural cells causes neurodegenerative disease in mice. Nature, 441(7095):885-9(2006).
  6. Nakai, A., et al., The role of autophagy in cardiomyocytes in the basalstate and in response to hemodynamic stress. Nat Med, 13(5):619-24(2007).
  7. Masiero, E., et al., Autophagy is required to maintain muscle mass. Cell Metab, 10(6):507-15(2009).
  8. Glick, D., S. Barth, and K.F. Macleod, Autophagy: cellular and molecular mechanisms. J. Pathol,221(1):3-12(2010).
  9. Shoji-Kawata, S., et al., Identification of a candidate therapeutic autophagy-inducing peptide. Nature,494(7436):201-6(2013).

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価格

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