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持続性発光基質を用いた、高感度で使いやすいルシフェラーゼアッセイキット Luciferase Assay Kit

掲載日情報:2015/12/08 現在Webページ番号:64482

ルシフェラーゼを用いたアッセイ系は、高感度な測定が可能なことから、遺伝子発現の検出を初めとする様々な解析に用いられています。しかし、発光が減衰しやすいことや、操作が煩雑という欠点があります。
OZ Bioscience社のLuciferase Assay Kitは、キットに最適化された試薬が全て含まれ、迅速かつ簡単、正確かつ直線性に優れた測定が可能です。特殊な装置は必要なく、通常の560 nmが測定できるルミノメーターが使用できます。

特長

  • ホタル・ルシフェラーゼ(firefly luciferase)用のキットです。
  • ダイナミックレンジが広く非常に高感度です。
  • 細胞溶解バッファー、酵素アッセイバッファー、ルシフェラーゼ基質など、測定に必要な最適化された試薬が全て含まれており、高感度で均質な発光データが得られます。
  • ルシフェラーゼを組み込んだベクター(例えば pVectOZ-Luc、#PL00040など)やレポータータンパク質発現用mRNA(LUC MRNA: Firefly Luciferase encoding mRNA、#MRNA12-20など)を用いた系との組み合わせに最適です。
  • トランスフェクトした細胞をそのままウェル中で測定する「迅速プロトコル」もあります。
  • アッセイ数:100 assays(#LUC0100)、1,000 assays(#LUC1000)
  • 検出方法:発光(96ウェルプレートフォーマット)
  • 測定波長:560 nm
  • 測定試料:培養細胞(付着、浮遊)

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使用例

Luciferase Assay Kitの使用例

Luciferase Assay Kitを用いた発光の経時的観察

6ウェルプレートで培養したHEK-293細胞に、DreamFect Goldトランスフェクション試薬(#DG80500)を用い、0.1 μgから0.5 μgのpVectOZ-LUCプラスミドを導入した。24時間後細胞を溶解し、ルシフェラーゼアッセイ試薬を加え、添加後30秒から30分までのルシフェラーゼ活性を測定した。加えたプラスミド量が増えるにつれ相対蛍光強度は増加するが、いずれの場合もアッセイ試薬添加後30分までは際だった光量の減衰は見られなかった。

Luciferase Assay Kitの使用例2

HEK-293細胞に導入するルシフェラーゼ発現ベクターの量を変化させ、24時間後のルシフェラーゼの発現量を検討した。
6ウェルプレートで培養したHEK-293細胞に、DreamFect Goldトランスフェクション試薬(#DG80500)で、0.1 μgから1 μgのpVectOZ-LUCプラスミドを導入した。24時間後細胞を溶解し、ルシフェラーゼアッセイ試薬を加え、1分後のルシフェラーゼ活性を測定した。加えたプラスミド量が増えるにつれ相対蛍光強度は増加し、ルシフェラーゼの発現量と発光量とに相関関係が見られた。


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操作方法概略

Luciferase Assay Kitの操作方法概略

プレート中の細胞ライセートをマイクロチューブに移して操作を行う通常法(上図右側)と、96ウェルプレート中で発光までの全ての操作を行う迅速法(上図左側)があり、実験デザインに柔軟に対応できます。


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キットの内容

  • Cell lysis buffer
  • Luciferase assay buffer
  • Luciferase substrate lyophilized

96ウェルの白色不透明(opaque)プレート、および96ウェルプレートが測定できる、マイクロプレート・ルミノメーターが必要です。


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価格

[在庫・価格 :2024年03月29日 14時15分現在]

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詳細 商品名
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納期 文献数
Luciferase Assay kit(100 assays)
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
持続性発光基質を用いた,高感度で使いやすいルシフェラーゼ活性測定キット。
別包装品 別包装品あり
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10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 16
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法規制等
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納期 文献数
DreamFect Gold
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 88
説明文
0.5 mlで1μgのDNAを125~500回導入可能。
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掲載カタログ ニュース2020年8月15日号 p.30

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説明文 0.5 mlで1μgのDNAを125~500回導入可能。
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F-Luc mRNA, Modified(5moU)
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
3’末端にポリアデニル(poly A)tailを有する5moU修飾mRNA。LUC(ホタルルシフェラーゼ)を発現する。
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3’末端にポリアデニル(poly A)tailを有する5moU修飾mRNA。LUC(ホタルルシフェラーゼ)を発現する。
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説明文 3’末端にポリアデニル(poly A)tailを有する5moU修飾mRNA。LUC(ホタルルシフェラーゼ)を発現する。
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RMESFECT
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
mRNAを迅速かつ高効率で細胞に導入することができるトランスフェクション試薬。多種類の細胞株および初代培養細胞に適用可能。
別包装品 別包装品あり
法規制等
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RMESFECT STEM
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
幹細胞や初代培養細胞に高効率かつ低毒性でmRNAを導入できるトランスフェクション試薬。低毒性で複数のmRNAを導入可能のため,mRNAを用いたiPS細胞の作製に有用。
別包装品 別包装品あり
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ニュース2017年6月1日号 p.23

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RMESFECT STEM

文献数: 0

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

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