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微量試料溶液の移動や測定に有用な多機能マイクロプレート IMAPlate 5RC96 Start Kit

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:5759

IMAPlate 5RC96は、毛細管現象に基づく独自技術により開発された、漏斗型のポリスチレン製96ウェルフォーマット・マイクロプレートです。微量試料溶液の回収、移動、各種反応や、プレートリーダーによる測定に有用です。プレートリーダーにセットするためのアダプターが付属しています。

#NCL-STK-002(Type Aアダプター付きキット)

特長

  • 漏斗状の反応ユニット(容量:5μl、光路長5 mmのキャピラリー型反応チャンバーを含む)が標準的な96ウェルフォーマットに配置されています。
  • 微量試料溶液の移動・反応・測定が簡便に行えるため、試料や試薬の使用量およびコストを減らすことができます。
  • 毛細管現象による方法だけでなく、ピペット操作でも溶液を反応チャンバーに移動することができます。
  • 96チャンネルを同時に処理できるピペットの代用品として、 また分光分析用の96マイクロキュベットアレイや各種反応/分析用の96ウェルマイクロプレートとして多機能に使用できます。
  • ELISAのような不均一反応系では、洗浄操作を簡略化することにより精度の向上が期待できます。また、複数の反応溶液を加えて混合する均一反応系においては、気泡の発生や不完全な混和状態が減るため、より正確な測定が可能です。
  • キット付属のアダプターの使用により、96ウェルプレートリーダーでUV-VIS-IR全領域のスペクトルを高感度に検出できます。

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キット選択方法

  • Type AまたはType Cアダプター付きの2種類の製品があります。
  • プレート定義機能*1の付いたプレートリーダーの場合は、いずれのキットでも使用可能です。Type Aを使用すると、プレートの位置調整などの手間を省くことができます。
  • Type Cアダプター付きのキット(#NCL-STK-003)は、付属のAdjustment toolを用いてプレートの位置を調整する必要があります。プレート定義機能*1が付いてないプレートリーダーの場合は、こちらをご使用下さい。

*1プレート情報(ウェルの数やサイズなど)のパラメーターを設定するための機能を指します。適合するプレートリーダーについての詳細は、当社テクニカルサポート(機器担当)までお問い合わせ下さい。

商品コードNCL-STK-002NCL-STK-003
付属のアダプターの種類Type AType C
お手持ちのプレートリーダーの種類プレート定義機能有り使用可能(推奨)使用可能
無し使用不可使用可能

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原理

(A)毛細管現象により、試料/試薬溶液が吸い上げられて反応チャンバー内に保持されます。

(B)反応チャンバーに保持された溶液は、インキュベーション反応や96ウェルプレートリーダーによる測定などに使用できます。

(C)反応チャンバー内の溶液は遠心操作により96ウェルプレート内へ回収したり、メンブレンにスポットさせたり、ろ紙に吸収させて廃棄することもできます。

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適用例

  • 不均一反応系
  • 均一反応系
  • プレートリーダーによる測定

・5μlスケールのELISA
・15~25μlスケールのELISA

・5μlスケールのタンパク質定量(Bradford法)
・2.5μlスケールのタンパク質定量(BCA法)
・15~25μlスケールのアルカリホスファターゼ/リパーゼアッセイ

・ELISAの感度上昇(吸光度測定)
・DNA / RNA定量(UV測定)
・タンパク質定量(UV測定)

いずれもNCL New Concept Lab社ホームページよりApplication Noteをダウンロードできます。
上記以外にも、各種酵素反応、結合アッセイ、リガンドスクリーニング、プロテオミクス解析、細胞培養、化学合成など、様々なアッセイに応用できます。

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ELISAキットでの使用例

  • 一般的なELISAと比較して、短時間でアッセイすることができます。
  • 使用する抗体、基質、反応停止液の量を約半分に減らすことができます。

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IMAPlateで感度が高くなる理由

96ウェルプレートを使用するELISAでは、溶液の量が同じであれば、色が濃い方が吸光度が高くなり、感度も上昇します(図1左)。溶液の色が同じであれば。量が多い方が光路が長くなるため、吸光度が高くなります(図1右)。

図1:ELISAにおける溶液量と吸光度の関係

従来の96ウェルプレートを使用する場合、5 mmの光路長を得るためには175μlの溶液量を必要とします。IMAPlateを使用すると、わずか5μlの溶液で光路長が5 mmとなります。ELISAにおける反応系全体の溶液量を100μlとした場合、IMAPlateでは5μlで約1.7倍の吸光度を示します(図2)。

図2:IMAPlateでは、わずか5μlの溶液量で5 mmの光路長を確保できる。

また、IMAPlateは、一般的なELISAの反応系よりも少ない溶液量で測定できるため、抗体、基質、反応停止液などの量を減らすことができます。例えば基質50μl、停止液50μl(合計100μl)の場合、基質12.5μl、停止液12.5μl(合計25μl)にすると、吸光度が約4倍になります(図3)。

図3:ウェルに結合した発色用酵素の量が同じ場合、添加する溶液量を1/2にすると吸光度(溶液の濃さ)は2倍になる。

上記の例では、IMAPlateを使用することで光路長で1.7倍溶液量で約4倍の吸光度を示すことになるため、一般的な96ウェルプレートと比べて約7倍の感度の増加が得られることになります。


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市販のELISAキットを使用する場合の測定例

ヒトIL-6
標準物質濃度(pg/ml)
IMAPlate使用時キット付属の標準96ウェルプレート使用時
MeanSDCV(%)MeanSDCV(%)
5002.574 0.025 1.0
2501.369 0.017 1.2
1253.822 0.052 1.4 0.697 0.001 0.2
62.52.186 0.127 5.8 0.355 0.001 0.2
31.31.118 0.046 4.1 0.189 0.009 4.9
15.60.624 0.007 1.1 0.113 0.006 5.0
7.80.378 0.004 1.1 0.071 0.002 3.0
3.90.279 0.016 5.6 0.034 0.003 8.3
1.950.208 0.010 4.8
00.159 0.001 0.4

測定結果の例

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抗体をプレートにコーティングする場合の測定例

測定結果の例

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操作方法概略

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毛細管現象による溶液の吸引(溶液を一度に素早く移動させたい場合)

1. IMAPlate 5RC96の開口部を、96ウェルプレートまたはトレイに入った試料に接するまでゆっくり下げる*2

2. IMAPlate 5RC96を素早く数回上下させ、キャピラリー型反応チャンバー内に試料が完全に吸引されたことを確認した後、ゆっくりとIMAPlate 5RC96を持ち上げる*3

*2V / U字底型の96ウェルプレート(30~50μl溶液/ウェル)を推奨。
*3外側に付着した溶液を除去したい場合は、反応チャンバーを洗浄液に浸す。

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価格

■スターターキット

[在庫・価格 :2024年04月25日 19時15分現在]

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IMAPlate 5RC96 Start Kit, with Type A Adaptor (5×96well)
中止
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IMAPlate 5RC96 Start Kit, with Type A Adaptor (5×96well)

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  • 商品コード:NCL-STK-002
  • メーカー:NCL
  • 包装:1kit
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IMAPlate 5RC96 Start Kit, with Type C Adaptor (5×96well)

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■別売りプレート

[在庫・価格 :2024年04月25日 19時15分現在]

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IMAPlate 5RC96, Black
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微量試料溶液の移動や測定に有用なマイクロプレート。使用例:ELISAの高感度化。Black IMAPlate 5枚入り。
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[在庫・価格 :2024年04月25日 19時15分現在]

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IMAPlate 5RC96, Black

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IMAPlate 5RC96の操作方法動画(英語版)

フナコシホームページではIMAPlate 5RC96の操作方法を動画でわかりやすく説明しています。是非一度ご覧下さい。

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FAQ

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 機器・消耗品担当)

kiki@funakoshi.co.jp

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