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癌抗原配列特異的CD8陽性キラーT細胞(CD8+ killer T cell)の検出に 『Pro5 MHC Class I ペンタマー』 癌抗原ペプチドを結合したPro5 MHC Class I Pentamer

掲載日情報:2015/12/01 現在Webページ番号:5274

ProImmune社では、単一抗原特異的なCD8陽性キラーT細胞(CD8+ killer T cell)の検出・定量を可能にする、MHCタンパク質と抗原ペプチド複合体の5量体: Pro5 MHC Class I ペンタマーを開発しました。Pro5 MHC Class I Pentamerは、ご指定の抗原ペプチド配列およびMHCアリルに基づくMHCタンパク質-抗原ペプチド複合体で、従来より知られているMHC-Tetramerに比べ、優れた特長を有しています(下表参照)。
今回は癌抗原配列を含むPro5 MHC Class I Pentamerをご紹介します。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
癌抗原配列以外にも、各種ウイルス(EBV、HBV、HCV、HIVなど)抗原配列を含むPro5 MHC Class I Pentamerの通常製品(Catalog Item)があります。製品検索方法については、フナコシホームページをご覧いただくか、当社テクニカルサポート(試薬担当)までお問い合わせ下さい。
通常製品にはない抗原配列を含むPro5 MHC Class I Pentamerの受託合成サービスも承ります。詳細はフナコシホームページをご覧いただくか、当社受託・特注品業務担当(Tel. 03-5684-1645、Fax 03-5684-6539、e-mail:jutaku@funakoshi.co.jp)までお問い合わせ下さい。

抗原特異的CD8陽性キラーT細胞の検出「Pro5 MHC Class I Pentamer」の構造

MHCタンパク質-抗原ペプチド複合体5分子が、Coiled-Coilドメインで結合しています。

癌抗原ペプチドを結合したPro5 MHC Class I Pentamerの構造

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Pro5 MHC Class I PentamerとTetramerの比較

Pro5 Pentamer Tetramer
配向性 5個のMHC-Peptide複合体が同一方向で重合しており、最大5か所でT細胞に結合する。 最大3か所でT細胞に結合する。
標 識 標識部位が5か所あるため、従来のTetramerよりも高い検出感度を示す。 複合体の中心に1か所の蛍光標識部位がある。
標識の自由度 蛍光標識体、ビオチン標識体、非標識体の3種類から選択できる。 蛍光標識体(不安定)のみ。
安定性 非標識のPentamerは-80℃で長期保存可能で、使用時に簡単に標識できる。 蛍光標識Tetramerは4℃で6~12か月保存可能。

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特長

  • Pro5 MHC PentamerのMHC-抗原ペプチド複合体は一方向性に重合しています。その結果、5つの複合体が同時にT細胞レセプター(TCR)と結合できるため、T細胞に対してTetramerよりも非常に高い親和性を示します。
  • フローサイトメーターを用いて、抗原特異的なキラーT細胞を高感度に検出できます。
  • 未標識製品のほか、R-PE(R-Phycoerythrin)、APC(Allophycocyanin)、ビオチンであらかじめ標識した製品があります。さらに、染色条件検討用のFITC標識抗CD8抗体がセットになった製品もあります。
  • 1つ1つのPro5 MHC Pentamerは5分子の蛍光色素またはビオチンで標識することが可能なため、高い検出感度が得られます。
  • Pro5 Pentamerを用いた組織染色により、免疫応答の時間的、部位的相互作用を測定できます。
  • ビオチン標識Pentamerは、ストレプトアビジンを介してAPC, R-PE以外の蛍光色素で検出することができます。また、ストレプトアビジン標識磁気ビーズなどと組み合わせて使用することで、抗原特異的T細胞の濃縮・除去なども行えます。
  • 遺伝子組換え技術を用いているため、安価かつ迅速に、高純度のMHCタンパク質-抗原ペプチド複合体を合成できます。
  • 合成した複合体は、適切な立体構造の形成と、マルチマーの形成が確認されています。
  • 日本人を含む多くのアジア人に見られる、MHCアリル:A*2402のMHCタンパク質-抗原ペプチドの受託合成サービス、および通常製品(Catalog Item)も取り扱っています。
  • 未標識の製品は-80℃での長期保存(有効期間:1年間)が可能です。また、必要に応じて別売りのFluorotagまたはBiotagを用いて標識することも可能です。
  • 標識済みPentamerの有効期間は、製品発送後6か月です。
  • MHCタンパク質-抗原ペプチド複合体と同じ配列の、MHCタンパク質が複合していない抗原ペプチドを別売りで購入できます(Matched Peptide)。このペプチドは、in vitroでのT細胞刺激実験に使用できます。

カスタム製品(Custom Item)のPro5 MHC Pentamerをご注文の場合、Matched PeptideはPro5 MHC Pentamerの納品後にご注文いただけます。

■ 染色図

癌抗原ペプチドを結合したPro5 MHC Class I Pentamerの染色図

抗原特異的なヒト末梢血単核球(PBMC)をR-PE標識Pentamer(A*02:01/LMLGEFLKL)およびPE-Cy5標識抗CD8抗体で二重染色した。

抗原特異的なヒト細胞をR-PE標識Pentamer(A*02:01/YLSGANLNL (CEA))およびFITC標識抗CD8抗体で二重染色した。

■ 癌関連抗原ペプチド配列リスト

Code Allele Sequence Origin
599 A*02:01 ALDVYNGLL Prostatic Acid Phosphatase Precursor (PAP) 299-307
600 A*02:01 ALFDIESKV PSM P2 (prostate)
086 A*02:01 ALQPGTALL Prostate Stem Cell Antigen (PSCA) 14-22
527 A*02:01 ALYVDSLFFL PRAME PRA 300-309
082 A*02:01 ELAGIGILTV MelanA / MART-1 26-35
1013 A*02:01 FLGYLILGV Prostatic Acid Phosphatase (PAP-3)
404 A*02:01 FLTPKKLQCV Prostate Specific Antigen-1 (PSA-1) 141-150
034 A*02:01 FLWGPRALV MAGEA3 271-279
813 A*02:01 FVGEFFTDV GPC3 144-152 (overexpressed in hepatocellular carcinoma)
560 A*02:01 GLMEEMSAL Human Mena protein (overexpressed in breast cancer)
389 A*02:01 GLYDGMEHL MAGEA10 254-262
125 A*02:01 GVLVGVALI Carcinogenic Embryonic Antigen (CEA) 694-702
249 A*02:01 HLSTAFARV G250 (renal cell carcinoma) 217-225
085 A*02:01 ILAKFLHWL Telomerase 540-548
210 A*02:01 ILHNGAYSL HER-2 / neu 435-443
329 A*02:01 ILLWQPIPV Prostatic Acid Phosphatase (PAP-3) 135-143
046 A*02:01 IMDQVPFSV gp100 (pmel17) 209-217
214 A*02:01 KIFGSLAFL HER-2 / neu 348-356
646 A*02:01 KLFGTSGQKT EGF-R-479 350-359
405 A*02:01 KLQCVDLHV Prostate Specific Antigen 146-154
859 A*02:01 KLQDASAEV HM1.24-aa 126-134
057 A*02:01 KTWGQYWQV gp100 (pmel17) 154-162
302 A*02:01 KVAELVHFL MAGEA3 112-120
171 A*02:01 KVLEYVIKV MAGEA1 278-286
810 A*02:01 LIAHNQVRQV HER-2 / neu 85-94
205 A*02:01 LLGRNSFEV p53 264-272
690 A*02:01 LLHETDSAV PSMA / PSM-P1 4-12
208 A*02:01 LLLLTVLTV MUC-1 12-20
391 A*02:01 LMLGEFLKL Survivin 96-104
338 A*02:01 QLCPICRAPV Livin/ML-IAP280 175-184
212 A*02:01 RLLQETELV HER-2/neu 689-697
117 A*02:01 RLVDDFLLV Telomerase Reverse Transcriptase 865-873
1056 A*02:01 SLFLGILSV CD20 188-196 (B cell malignancies)
390 A*02:01 SLLMWITQV NY-ESO-1 157-165
1181 A*02:01 SLSEKTVLL CD59 glycoprotein precursor 106-114
958 A*02:01 SLVDVMPWL Cytochrome p450 1B1 239-248
915 A*02:01 TLPGYPPHV PAX-5 311-319
561 A*02:01 TMNGSKSPV Human Mena protein 502-510
097 A*02:01 VISNDVCAQV Prostate Specific Antigen-1 (PSA-1) 154-163
689 A*02:01 VLAGGFFLL PSMA 27-38
781 A*02:01 VLDGLDVLL PRAME 100-108
250 A*02:01 VLQELNVTV Leukocyte Proteinase-3 (Wegener's autoantigen) 169-177
157 A*02:01 VLYRYGSFSV gp100 (pmel17) 476-485
058 A*02:01 YLEPGPVTA gp100 (pmel17) 280-288
394 A*02:01 YLFFYRKSV mTERT 572-580
645 A*02:01 YLNTVQPTCV EGF-R 1138-1147
447 A*02:01 YLQVNSLQTV Telomerase Reverse Transcriptase (hTRT) 988-997
075 A*02:01 YLSGANLNL Carcinogenic Embryonic Antigen (CEA) 571-579
118 A*03:01 ALLAVGATK gp100 (pmel17) 17-25
264 A*03:01 ATGFKQSSK bcr-abl 210 kDa fusion protein 259-269
087 A*03:01 KQSSKALQR bcr-abl 210 kDa fusion protein 21-29
230 A*24:02 AFLPWHRLF Tyrosinase 188-196
416 A*24:02 EYLQLVFGI MAGEA2 156-164
421 A*24:02 TFPDLESEF MAGEA3 97-105
209 A*24:02 TYACFVSNL Carcinogenic Embryonic Antigen (CEA) 652-660
417 A*24:02 TYLPTNASL HER-2 / neu 63-71
418 A*24:02 VYGFVRACL Telomerase Reverse Transcriptase (hTRT) 461-469
094 B*08:01 GFKQSSKAL bcr-abl 210 kDa fusion protein 19-27
185 H-2Kb SVYDFFVWL Tyrosinase related protein-2 180-188
814 H-2Kd EYILSLEEL GPC3 298-306
150 H-2Ld LPYLGWLVF Tumor Antigen P815 35-43


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製品ラインナップ

下記に示した商品コードに記載されている「xxx」は抗原ペプチドの種類により異なります。抗原ペプチドは、上記の癌関連抗原ペプチド配列リストからお選び下さい。また、上記リスト以外の製品はProImmune社ホームページの「ONLINE ORDER」から「Catalog Class I Pentamer」にてご覧いただくか、当社受託・特注品担当までお問い合わせ下さい。

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Pro5 MHC class I Pentamer+Anti-CD8(FITC) Kit, Catalog Item

染色条件検討用のFITC標識抗CD8抗体がセットになっている製品です。

  • 包装:1 set
Pentamerの標識 Unlabelled APC Biotin R-PE
使用回数 商品コード 価 格 商品コード 価 格 商品コード 価 格 商品コード 価 格
50 tests Fxxx-80A ¥268,000 Fxxx-84A ¥315,000 Fxxx-81A ¥296,000 Fxxx-82A ¥296,000
150 tests Fxxx-80B ¥466,000 Fxxx-84B ¥539,000 Fxxx-81B ¥515,000 Fxxx-82B ¥515,000
500 tests Fxxx-80C ¥1,101,000 Fxxx-84C ¥1,297,000 Fxxx-81C ¥1,216,000 Fxxx-82C ¥1,216,000

■価格例

価格例 (クリックで開閉します)

[在庫・価格 :2024年04月21日 00時00分現在]

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詳細 商品名
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納期 文献数
MHC Class I Pentamer, Pro5, A*02:01, Peptide Code : 599, ALDVYNGLL, Prostatic acid phosphatase precursor (PAP) 299-307, Unlabeled, with Anti-CD8, FITC
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MHC Class I Pentamer, Pro5, A*02:01, Peptide Code : 599, ALDVYNGLL, Prostatic acid phosphatase precursor (PAP) 299-307, R-PE, with Anti-CD8, FITC

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Pro5 MHC class I Pentamer, Catalog Item(単独製品)

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50 tests Fxxx-0A ¥244,000 Fxxx-4A ¥293,000 Fxxx-1A ¥272,000 Fxxx-2A ¥272,000
150 tests Fxxx-0B ¥477,000 Fxxx-4B ¥510,000 Fxxx-1B ¥477,000 Fxxx-2B ¥477,000
500 tests Fxxx-0C ¥1,028,000 Fxxx-4C ¥1,222,000 Fxxx-1C ¥1,141,000 Fxxx-2C ¥1,141,000
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MHC Class I Pentamer, Pro5, A*02:01, Peptide Code : 599, ALDVYNGLL, Prostatic acid phosphatase precursor (PAP) 299-307, APC

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MHC Class I Pentamer, Pro5, A*02:01, Peptide Code : 599, ALDVYNGLL, Prostatic acid phosphatase precursor (PAP) 299-307, APC

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文献数: 0

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MHC Class I Pentamer, Pro5, A*02:01, Peptide Code : 599, ALDVYNGLL, Prostatic acid phosphatase precursor (PAP) 299-307, R-PE

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別売品(Catalog Item)

■ Matched Peptide

MHC-Peptide複合体中のPeptide単体製品です。in vitroでのT細胞刺激実験に使用できます。

商品コード 品 名 包 装 価 格
P0A Matched Peptide 1 mg ¥23,000
P0B Matched Peptide 2 mg ¥34,000

通常製品(Catalog Item)以外のPro5 MHC class I Pentamerをご注文の場合、Matched PeptideはPro5 MHC class I Pentamerの納品後にご注文いただけます。



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別売品

■Pro5 Fluorotag

未標識Pentamerを標識するための蛍光タグです。

[在庫・価格 :2024年04月21日 00時00分現在]

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Pro5 Fluorotag, APC Conjugated (50tests)
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Hepatitis Virus (HBV, HCV) 抗原用Pro5 MHC Class I Pentamer
C型肝炎ウイルス(HCV)研究用製品
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Pro5 Fluorotag, APC Conjugated (150tests)
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Hepatitis Virus (HBV, HCV) 抗原用Pro5 MHC Class I Pentamer
C型肝炎ウイルス(HCV)研究用製品
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Pro5 Fluorotag, APC Conjugated (500tests)
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Hepatitis Virus (HBV, HCV) 抗原用Pro5 MHC Class I Pentamer
C型肝炎ウイルス(HCV)研究用製品
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Pro5 Fluorotag, R-PE Conjugated (50tests)
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Hepatitis Virus (HBV, HCV) 抗原用Pro5 MHC Class I Pentamer
C型肝炎ウイルス(HCV)研究用製品
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Pro5 Fluorotag, R-PE Conjugated (150tests)
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Hepatitis Virus (HBV, HCV) 抗原用Pro5 MHC Class I Pentamer
C型肝炎ウイルス(HCV)研究用製品
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Pro5 Fluorotag, R-PE Conjugated (500tests)
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Hepatitis Virus (HBV, HCV) 抗原用Pro5 MHC Class I Pentamer
C型肝炎ウイルス(HCV)研究用製品
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[在庫・価格 :2024年04月21日 00時00分現在]

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Pro5 Fluorotag, APC Conjugated (50tests)

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Hepatitis Virus (HBV, HCV) 抗原用Pro5 MHC Class I Pentamer
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Pro5 Fluorotag, APC Conjugated (150tests)

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Hepatitis Virus (HBV, HCV) 抗原用Pro5 MHC Class I Pentamer
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Pro5 Fluorotag, APC Conjugated (500tests)

文献数: 0

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Hepatitis Virus (HBV, HCV) 抗原用Pro5 MHC Class I Pentamer
C型肝炎ウイルス(HCV)研究用製品
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Pro5 Fluorotag, R-PE Conjugated (50tests)

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Pro5 Fluorotag, R-PE Conjugated (150tests)

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Pro5 Fluorotag, R-PE Conjugated (500tests)

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■Pro5 Biotag

未標識Pentamerをビオチン標識するためのビオチンタグです。

[在庫・価格 :2024年04月21日 00時00分現在]

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Pro5 Biotag, Biotin Conjugated (50tests)

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Pro5 Biotag, Biotin Conjugated (150tests)

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Pro5 Biotag, Biotin Conjugated (500tests)

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使用文献

1. Koido, S., et al., Clin. Cancer Res., 11, 7891~7900 (2005).
2. Koido, S., et al.. J. Immunol., 179, 4874~4883 (2007).
3. Koido, S., et al., Journal of Translational Medicine, 6, 51 (2008).
4. Takamura, et al., The Journal of Immunology, 184, 4696~4707 (2010).

その他にも多数の使用文献および解析例のデータがあります。詳細はProImmune社ホームページをご覧下さい。

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CD8陽性キラーT細胞の定量・検出「Pro5 MHC Class I Pentamer」のケーススタディ

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