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微量試料で結晶化条件をスクリーニングできるプレート Crystal Formerシリーズ

掲載日情報:2020/10/22 現在Webページ番号:4324

スライドガラスサイズのプレートで結晶化条件の検討を行うことができるスクリーニングプレートです。1反応に必要な試料量は0.5μl以下で済むため、貴重な試料を節約することができます。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

SBS Crystal Formerプレートの構造

SBS Crystal Formerプレートの構造

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特長

  • 1枚のプレートに16個または96個のreaction chamberがあり、ハイスループットな結晶化条件スクリーニングが可能です。
  • 実験操作は、reaction chamberを挟んだ1組のウェルに、タンパク質試料と結晶化試薬をそれぞれ加えるだけと簡便です。
  • 蒸気拡散法に比べて、効率良く結晶化試験が行えます。
  • 1反応当たりの試料量は0.3~0.5μl、結晶化試薬のアプライ量は0.3~1μlなので、試料や試薬を節約することができます。
  • 本製品で得られた結晶は、直接X線回折などへ使用することが可能です。ラージスケールで結晶をとりなおす必要はありません。
  • reaction chamber部分の容量が大きいCrystal Former XLのほか、SBS規格に準拠した96ウェルプレートフォーマットのHigh-throughput Crystal Formerもあります。

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製品ラインナップ

製品外観をクリックすると拡大図、商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

品名 Crystal Former Crystal Former XL High-throughput Crystal Former,
96-Channel Format
製品外観 CF製品外観 CFXL製品外観 HTCF製品外観
チャネル数 16 16 96
チャネルのサイズ 100μm×150μm×10 mm 270μm×400μm×10 mm 100μm×150μm×10 mm
チャネル容量 150 nl 1.1μl 150 nl
包装 1 pack 20 packs 1 pack 20 packs 1 pack 10 packs
商品コード CF-O CF-O-20 CF-XL CF-XL-20 CF-HT2 CF-HT2-10

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使用例

Crystal Fomerで作製した結晶の蛍光イメージ

結晶の蛍光イメージ

Crystal Fomerで作製した結晶の目視イメージ

結晶の目視イメージ
結晶の目視イメージ

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操作方法概略

SBS Crystal Former操作方法概略

  1. タンパク質用のウェルに試料を0.3~0.5μlずつ入れる。
  2. タンパク質用ウェルの反対側に位置する結晶化試薬用のウェルに結晶化条件検討用試薬をそれぞれ0.3~1μlずつ入れる。
  3. タンパク質ウェルと結晶化試薬ウェルの間のreaction chamberで両側の液が拡散混合する。
  4. 付属のアルミシールでしっかりとカバーし、インキュベートする。
  5. 結晶生成後、解析したい部分のシールをメスで切り取る。
  6. 切り取ったシールをピンセットなどではがし、生成した結晶を取り出す。

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操作方法動画

手動によるセットアップ

Crystal Former(#CF-O-20)、Crystal Former XL(#CF-XL-20)

High-throughput Crystal Former, 96-Channel Format(#CF-HT2-10)

自動分注装置を用いたセットアップ例

Formulatrix NT8

TTP Labtech

ARI Phoenix

Crystal Formerの保管と結晶の採取

Crystal Formerの保管方法

結晶の採取方法

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製品マニュアル

下図をクリックすると製品マニュアル(CFマニュアル)をご覧いただけます。

CFマニュアル

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FAQ

Q-1. 推奨する試料量はどのくらいですか?
A-1. 手動で分注する場合、タンパク質溶液の量は 0.3 ~ 0.5 μl、結晶 化試薬の量は 0.3 ~ 1 μl です。自動分注機の場合は、タンパク質 溶液・結晶化試薬共に最少で 0.2 μl です。手動分注の場合は 0.5 μl を、自動分注機の場合は 0.3 μl をお勧めします。
Crystal Former XL は、reaction chamber の容量が大きいため、 通常よりも大きいサイズの結晶を成長させることができ、タンパク 質溶液の量は ~ 1.5 μl に、結晶化試薬の量は 0.1 ~ 1.5 μl にな ります。 


Q-2. Crystal Former のフォーマットにより、reaction chamber(マイクロチャンネル)の仕様は違いますか?
A-2. reaction chamber の長さはすべて 10 mm です。reaction chamber 内の全溶液量は、150 nl(Crystal Former)、または 1.1 μl(Crystal Former XL)です。


Q-3. インキュベートする際、付属のアルミシールでカバーする以外の方法を用いることはできますか?
A-3. いいえ。デュアルストリップのアルミシールは、試料を加えるウェ ルのみをカバーし、気泡の発生を最少に抑えますので、他の方法は お勧めできません。
また、カバーする際には、過剰な力を加えないで下さい。 reaction chamber 内で試薬がミックスされ、濃度勾配が消失してしまいます。


Q-4. 膜内在性タンパク質の結晶化に使用できますか?
A-4. できます。Crystal Former の素材は、膜タンパク質の可溶化に用 いられる変性剤に耐性があるため、結晶化に適しています。


Q-5. 結晶化の際、有機溶媒を使用できますか?
A-5. はい。タンパク質の結晶化に用いられる有機溶媒で不適合を示した ものは、これまでありません。


Q-6. インキュベーションの条件は?
A-6. 特別な条件はありません。タンパク質結晶化の際に長時間のインキュベーションが必要な場合には、試薬の蒸発を防ぐために、濡らした布と共に小さな箱に入れて、>60%の高湿度環境に置いて下さい。


Q-7. in situ での X 線回折に使用できますか?
A-7. 使用できます。


Q-8. UVイメージングに使用できますか?
A-8. 使用できます。


Q-9. reaction chamber 内の平衡化にはどのくらいかかりますか?
A-9. 通常は約 1 週間ですが、巨大分子や高分子ポリマーを用いている場 合は 2 週間程度かかることもあります。ただし、結晶の成長に平衡 化は必要なく、多くの結晶は 12 ~ 72 時間で現れます。


Q-10. 生成した結晶はどのようにして回収できますか?
A-10. 鋭利なメスを用いて裏面からシールを切り、剥し、100 μm 以下のループを用いて結晶を回収して下さい。reaction chamber 内を空気にさらす際に、安定化溶液を加えることをお勧めします。 安定化溶液は、予測される平衡後の反応用液の組成と等しいもの (出発濃度の 50%)を用いて下さい。


Q-11. 結晶の凍結保存についてお勧めのプロトコルは?
A-11. 生成した結晶を回収した後は、通常の手法に従って下さい。前述 のとおり、平衡後の反応用液の組成で安定化させるか、抗凍結剤 を含む溶液を reaction chamber に加え、結晶を回収した後、 急速に凍結させて下さい。凍結保存の条件が不明な場合は、ミネ ラルオイルまたは paratone oil でreaction chamber を覆い、 結晶を回収した後、急速に凍結させて下さい。
Crystal Former のユニークなデザインにより、ウェルに加えた 抗凍結剤は、reaction chamber 内の回収前の結晶にゆっくり と拡散します。


Q-12. 結晶化に成功した条件は、他の結晶化法に応用できますか?
A-12. 本製品で結晶化に成功した条件は、多くの場合、蒸気拡散法での 条件検討のスタート点として使用できます。

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価格

Crystal Former

[在庫・価格 :2024年03月29日 00時00分現在]

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ORIGINAL CRYSTAL FORMER (1 EA)

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Crystal Former XL

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SCALE-UP CRYSTAL FORMER (1 EA)

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Crystal Former Scale-Up

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High-throughput Crystal Former, 96-Channel Format

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HIGH THROUGHPUT CRYSTAL FORMER (1 EA)

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SBS High Throughput Crystal Former

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アクセサリー

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Crystal Former Sealing Tape
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Crystal Former Sealing Tape

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  • 商品コード:RT-2
  • メーカー:MNA
  • 包装:1roll
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Crystal Former Slide Holder, Snap Fit

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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