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Synthego Corporation
シンセゴーコーポレーション / Synthego Corporation
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[掲載日情報:2017/11/13 現在]

編集効率が格段に良いsgRNAを受託合成します CRISPRevolution sgRNA合成受託サービス

S. pyogenes に由来するCas9(SpCas9)用の「CRISPRevolution」と呼ばれるguideRNAの合成受託サービスです。標的配列(17~23 nt)をご指定いただくことで,最大90%の高いゲノム編集効率を持つ一本鎖guideRNA(sgRNA)を合成し,キットとしてお届けいたします。 CRISPRevolution画像

本サービスは研究用です。商用・臨床用には利用できません。

合成guideRNAを使用するメリット

Speed
プラスミド由来guideRNAと比較して,Synthego社 CRISPRevolution Synthetic guide RNAはプラスミド配列デザイン・コンストラクト作製・シークェンス・プラスミドDNA精製が不要です。
また,高価なin vitro transcription(IVT)キットを使用して貴重な実験時間を費やす必要がありません。
Quality
高品質な合成RNAは安定したCRISPRゲノム編集をもたらします。
Synthego社はトランスフェクションやマイクロインジェクションに用いるRNAの品質と正確な量をコントロールすることにより,最も的確なゲノム編集効率を達成しました。
Accuracy
Cas9タンパク質とのRNP複合体を作ることで,編集確率が格段に上昇します。
トランスフェクションしゲノム編集が起こった後,Cas9と外因性RNAは分解します。これにより,オフターゲット効果の可能性は大きく減少します。
Price
プラスミドまたはin vitro transcription(IVT)法によるguideRNA作製と比較して安価です。Synthego社は他社よりもより小スケールでsgRNAとcr:tracrRNAを合成できるため,必要量だけをご購入いただけます。
Throughput
合成RNAは,従来のguideRNA作製技術では実現不可能だった拡張性をもたらします。
guideRNAをプラスミドやin vitro transcription(IVT)法によって作製する際に伴うコストや労力といった負担を回避するために,数千ものguideRNAがあるライブラリーをオーダーできます。
Easy to Use
Synthego社のサイト「CRISPR Knockout Guide Designer」より,100,000種以上のゲノムと9,000の生物種から選択することで,遺伝子ノックアウト用CRISPR guideを簡単にデザインできます。
製品はすぐにトランスフェクション可能な状態でお届けします。

CRISPRevolution sgRNAの特長

  • in vitro transcription(IVT)で作製されたsgRNAに比べ,編集効率が格段に良いsgRNAです。
  • SpCas9向けに最適化されています。
  • sgRNAを作製する際の面倒なアニーリング操作が不要です。
  • 100% DNAフリーです。
  • シングルオリゴヌクレオチドです。
  • 様々な細胞種に対応します。
  • 幹細胞および編集困難な細胞の編集用に,先頭3箇所の5’と3’末端RNA残基に2’-O-methyl analogsと3’phosphorothioate internucleotideを結合した化学修飾sgRNAもあります。

Synthego社の合成RNA(sgRNA)とプラスミドおよびIVTの比較

  Synthego(sgRNA) Plasmid in vitro Transcription (IVT)
guideRNA作製過程 1. 標的シークエンスを選択する。
2. 合成RNAを注文する。
1. 標的シークエンスを選択する。
2. DNAプライマーを準備する。
3. プラスミド内へguideRNAをPCRする。
4. 細胞内へトランスフェクトする。
5. 細胞をスクリーニングする。
6. シークエンスを検証する。
7. プラスミドDNAを精製する。
1. 標的シークエンスを選択する。
2. DNAプライマーを準備する。
3. PCRでguideRNAを作製する。
4. IVTを行う。
5. guideRNAを精製する。
製品購入後の
トランスフェクション
開始時間
購入後すぐ 1~2週間 1~3日
作業時間 数分 数日 1日
編集効率 最大90% 中~高 様々
品質 非常に高い 様々 低い(不純物があり,不一致もみられる)
初代細胞および幹細胞への効率 非常に良い 悪い 悪い
オフターゲット効果 非常に低い 様々(宿主ゲノム内へのDNA混入の可能性あり) 様々(IVT用酵素がエラーを引き起こす可能性あり)

■高品質

他社sgRNAとの比較

Synthego社のCRISPRevolution guideRNAは高純度であるのに対し,IVTで作製したguideRNAは不純物が含まれる。

■高効率と一貫性

他社sgRNAとの比較

HEK293T細胞におけるsgRNAの編集効率と一貫性の比較
3種類の異なるターゲット遺伝子に対して,CRISPRevolution guideRNAとIVTでゲノム編集を行った。どの遺伝子においても,IVTによって作製されたguideRNAに比べ,Synthego社guideRNAが高効率に安定した塩基の挿入/欠損(Indel formation)が確認できた。

■高い正確性

CRISPR/CAS9比較

CRISPR/Cas9 cleavage assay
線状化DNAプラスミドを二本鎖guideRNA(gRNA)と S. pyogenes Cas9で切断した。プラスミド内の特定の20 nucleotide protospacerを標的とするgRNAを,Synthego社 CRISPRevolution EZcrRNAとtracrRNAアニーリングすることで作製した。標的DNAは95.8%の効率で切断された。

合成sgRNAでのトランスジェニックマウス作製率の比較

CRISPR Guide RNAデザインツール

100,000種以上のゲノムと9,000の生物種から選択することで,遺伝子ノックアウト用CRISPR guideを簡単にデザインできます。最小限のオフターゲット効果でノックアウト用の自動推奨デザインを調べることができます。下記デザイン画像をクリックして下さい。

CRISPRevolution画像

Synthego社の合成RNA(sgRNA)のキット内容

  • CRISPRevolution synthetic guide RNA 3 nmol
  • TE buffer 1.5 ml
  • Nuclease-free water 1.5 ml

オプション品(単品購入不可,詳細はお問い合わせ下さい)

  • Cas9 Protein 300 pmol, 1,000 pmol
  • Annealing buffer 1.5 ml
  • Tris-EDTA buffer 1.5 ml
  • Nuclease-free water 1.5 ml

ご注文方法/価格

標的配列(17~20 mer)をご指定下さい。
例.5′-AAUUUCACAGCUGCACAUA+Synthego Scaffold-3′

専用注文書に必要事項をご記入の上,電子メールに添付して当社受託・特注品業務担当(e-mail:jutaku@funakoshi.co.jp)までお送り下さい。

[在庫・価格 : 2017年11月23日 14時50分 現在]
メーカー 商品コード 商品名 包装 価格 在庫 リスト
SGOシンセゴーコーポレーション
Synthego Corporation

SGO-0001

sgRNA Kit

3nmol

\59,000
(未発注)
追加
SGOシンセゴーコーポレーション
Synthego Corporation

SGO-0001-CM

sgRNA Kit (Chemically Modified)

3nmol

\89,000
(未発注)
追加
SGOシンセゴーコーポレーション
Synthego Corporation

SGO-1000-1

Cas9 Protein

300pmol

\20,000
(未発注)
追加
SGOシンセゴーコーポレーション
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SGO-1000-2

Cas9 Protein

1000pmol

\60,000
(未発注)
追加
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SGO-1001

Annealing Buffer

1.5ml

\5,000
(未発注)
追加
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SGO-1002

Tris-EDTA Buffer

1.5ml

\5,000
(未発注)
追加
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SGO-1003

Nuclease-free Water

1.5ml

\5,000
(未発注)
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[在庫・価格 : 2017年11月23日 14時50分 現在]
メーカー 商品コード 商品名 包装 価格 在庫 リスト
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SGO-0001

sgRNA Kit

3nmol

\59,000
(未発注)
追加
説明文

CRISPR/Cas9用の合成guideRNA。sgRNAを作製する際の手間がかかるアニーリング操作が不要で、編集効率が良いことが特長。標的配列(17~23 mer)を指定し、弊社受託推進部へお問い合わせ下さい。※専用注文書でご注文ください。※購入時にSGO社専用の「使用目的確約書」が必要です。

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SGO-0001-CM

sgRNA Kit (Chemically Modified)

3nmol

\89,000
(未発注)
追加
説明文

化学修飾をしたCRISPR/Cas9用の合成guideRNA。sgRNAを作製する際の手間がかかるアニーリング操作が不要で、編集効率が良いことが特長。特に初代培養細胞やiPS/ES細胞といった幹細胞において高い編集効率が得られる。標的配列(17~23 mer)を指定し、弊社受託推進部へお問い合わせ下さい。※専用注文書でご注文ください。※購入時にSGO社専用の「使用目的確約書」が必要です。

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SGO-1000-1

Cas9 Protein

300pmol

\20,000
(未発注)
追加
説明文

CRISPRevolution sgRNAの追加購入品。詳細は弊社受託推進部へお問い合わせ下さい。 ※単品購入不可 ※専用注文書でご注文ください。

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Cas9 Protein

1000pmol

\60,000
(未発注)
追加
説明文

CRISPRevolution sgRNAの追加購入品。詳細は弊社受託推進部へお問い合わせ下さい。 ※単品購入不可 ※専用注文書でご注文ください。

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SGO-1001

Annealing Buffer

1.5ml

\5,000
(未発注)
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説明文

CRISPRevolution sgRNAの追加購入品。組成:300 mM KCl, 30 mM HEPES;pH 7.0 詳細は弊社受託推進部へお問い合わせ下さい。 ※単品購入不可 ※専用注文書でご注文ください。

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SGO-1002

Tris-EDTA Buffer

1.5ml

\5,000
(未発注)
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説明文

CRISPRevolution sgRNAの追加購入品。組成:10 mM Tris, 1 mM EDTA;pH 8.0 詳細は弊社受託推進部へお問い合わせ下さい。 ※単品購入不可 ※専用注文書でご注文ください。

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SGO-1003

Nuclease-free Water

1.5ml

\5,000
(未発注)
追加
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CRISPRevolution sgRNAの追加購入品。詳細は弊社受託推進部へお問い合わせ下さい。 ※単品購入不可 ※専用注文書でご注文ください。

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