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Luxcel BioSciences Ltd
ルクセルバイオサイエンス / Luxcel BioSciences Ltd
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[掲載日情報:2017/06/16 現在]

ミトコンドリアによる脂肪酸酸化測定キット MitoXpress FAO Assay

培養細胞を試料として,ミトコンドリアにおける脂肪酸の酸化(Fatty acid oxidation:FAO)を測定するキットです。別売りの細胞外酸素レベルをリン光によりモニタリングできるプローブMitoXpress Xtra-Oxygen Consumption Assay(#MX-200)と組み合わせて使用することにより*,簡便にハイスループット解析が行えます。

本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。
* 本製品の使用に際しては,別途MitoXpress Xtra-Oxygen Consumption Assay(#MX-200)が必要です。

MEMO

脂肪酸の酸化について


種々の組織において脂肪酸の酸化(fatty acid oxidation:FAO)は,主要な代謝経路であり,グルコース欠乏時においては特に重要となります。脂肪酸の酸化は,肝臓や骨格筋などの器官では75%以上のATPを供給でき,心臓では細胞が必要とするエネルギー量の90%を担うことができます。また現在,脂肪酸の酸化はがん細胞の代謝の重要な要因となっており,薬剤投与によるmicrosteatosis(脂肪肝の一形態)との関連が知られています。

LyseNow Perforated Card操作方法

脂肪酸分解の主要な代謝経路は,ミトコンドリアの脂肪酸β酸化であり,長鎖脂肪酸(Long chain fatty acids:LCFA)をアシルカルニチンとしてミトコンドリア内へ輸送します。一旦内部に入ると,完全鎖がacetyl-CoAへ酸化されるまで,acyl CoAは反復的な4ステップの酸化を経て放出され,一方でカルニチンは更なるLCFA輸送を促進するために戻ります。産生されたacetyl-CoAは主としてTCAに入りますが,肝臓内では他の組織の重要なエネルギー源であるケトン体の産生も刺激します。TCA回路とβ酸化はいずれも,還元等量(NADHとFADH2)の蓄積に寄与し,次いでETCの活性化とその後のATP生成に作用します。


ミトコンドリアによる脂肪酸酸化(FAO)測定キットの特長

  • MitoXpressは,酸素存在下では消光状態となるリン光プローブです。詳細についてはこちらをご覧下さい。
  • ミトコンドリアの脂肪酸酸化による酸素消費を指標として,内因性または外因性の脂肪酸の酸化を測定します。
  • キットには基質としてBSA結合オレイン酸が含まれています。

ミトコンドリアによる脂肪酸酸化(FAO)測定キットの使用例

HepG2細胞の脂肪酸酸化による酸素消費量

上図:キットに含まれるOleateでHepG2細胞を処理した。その際にCPT1阻害物質のEtomoxir, または脱共役剤のFCCPで処理した条件も用意し,MitoXpress-Xtraを用いて酸素消費速度を測定した。

下図:酸素消費速度の測定結果から,各曲線プロファイルの直線部の傾斜(m)を算出し,下記の計算式に基づいて外因性/内因性LCFAによるFAO,およびLCFA以外によるFAOを評価した。

外因性FAO:mOleate - mEtomoxir
内因性FAO:mOleate-free - mEtomoxir
LCFA以外によるFAO:mEtomoxir - mSignal Control

ミトコンドリアによる脂肪酸酸化(FAO)測定キットのアプリケーションノート

アプリケーションノート

アプリケーションノートのダウンロードはこちら。

ミトコンドリアによる脂肪酸酸化(FAO)測定キットの操作方法概略

  1. 測定前に別売りのMitoXpress Xtra-Oxygen Consumption Assay(#MX-200)を用いて,最適な測定条件および細胞数を決定する。
  2. マイクロプレートに細胞を播種し,一晩培養する。
  3. 培養培地をグルコース不含培地に交換し,一晩培養する。
  4. 細胞を脂肪酸不含のmeasurement mediaで洗浄し,脂肪酸含有または不含のmeasurement mediaおよびMitoXpress Xtraを加える。
  5. Etoxomir等のコントロールや被験物質等を適時・適量加える。
  6. HS mineral oil(#MX-200に含まれる)を重層し,蛍光プレートリーダーでカイネティックで測定する。

ミトコンドリアによる脂肪酸酸化(FAO)測定キットのキット内容

  • Oleate-BSA conjugate
  • BSA control
  • Base measurement media tablet
  • L-carnitine
  • FCCP
  • Etomoxir

製品にリン光プローブは含まれていません。MitoXpress Xtra(#MX-200)を別途ご用意下さい。
製品に蛍光用マイクロプレートは含まれていません。
測定には温度調節機能付きの蛍光プレートリーダーが必要です。

ミトコンドリアによる脂肪酸酸化(FAO)測定キットの価格

[在庫・価格 : 2017年08月17日 18時50分 現在]
メーカー 商品コード 商品名 包装 価格 在庫 リスト
LUBルクセルバイオサイエンス
Luxcel BioSciences Ltd

データシート

MXC-500

MitoXpressR FAO Kit

1kit

\31,0002個以上追加
[在庫・価格 : 2017年08月17日 18時50分 現在]
メーカー 商品コード 商品名 包装 価格 在庫 リスト
LUBルクセルバイオサイエンス
Luxcel BioSciences Ltd

MXC-500

MitoXpressR FAO Kit

1kit

\31,0002個以上追加
説明文

培養細胞を試料として,ミトコンドリアにおける脂肪酸の酸化(Fatty acid oxidation:FAO)を測定するキット。別売りのMitoXpress Xtra-Oxygen Consumption Assay(#MX-200)と組み合わせて使用することにより,簡便にハイスループット解析が行える。使用回数:>96 test。

保存条件4℃,-20℃法規制等医薬用外劇物
Genbank NoGene Accession NoProtein Accession No
掲載カタログ

製品記事

MitoXpress FAO Assay

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■MitoXpress Xtra

[在庫・価格 : 2017年08月17日 18時50分 現在]
メーカー 商品コード 商品名 包装 価格 在庫 リスト
LUBルクセルバイオサイエンス
Luxcel BioSciences Ltd

データシート

MX-200

MitoXpress Xtra-Oxygen Consumption Assay (HS Method)

1kit

\46,000
(発注済)
追加
LUBルクセルバイオサイエンス
Luxcel BioSciences Ltd

データシート

MX-200/4

MitoXpress Xtra - Oxygen Consumption Assay (HS Method) Multipack

1pack

\164,000
(未発注)
追加
[在庫・価格 : 2017年08月17日 18時50分 現在]
メーカー 商品コード 商品名 包装 価格 在庫 リスト
LUBルクセルバイオサイエンス
Luxcel BioSciences Ltd

MX-200

MitoXpress Xtra-Oxygen Consumption Assay (HS Method)

1kit

\46,000
(発注済)
追加
説明文

細胞外酸素レベルをリン光によりモニタリングできるプローブ。酸素消費量を高感度かつハイスループットに測定可能。超高感度タイプ。細胞測定用。キット内容:MitoXpress oxygen reagent, HS mineral oil別包装品あり

保存条件4℃,暗所保存法規制等
Genbank NoGene Accession NoProtein Accession No
掲載カタログ

ニュース2016年8月15日号 p.24

製品記事

MitoXpress Xtra-Oxygen Consumption Assay [HS Method]
pH-Xtra Glycolysis Assay
MitoXpress FAO Assay
ミトコンドリア(Mitochondria)研究用製品特集

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MX-200/4

MitoXpress Xtra - Oxygen Consumption Assay (HS Method) Multipack

1pack

\164,000
(未発注)
追加
説明文

細胞外酸素レベルをリン光によりモニタリングできるプローブ。酸素消費量を高感度かつハイスループットに測定可能。超高感度タイプ。細胞測定用。別包装品あり

保存条件4℃,暗所保存法規制等
Genbank NoGene Accession NoProtein Accession No
掲載カタログ

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