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StemCulture Inc.
ステムカルチャー / StemCulture Inc.
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[掲載日情報:2017/09/01 現在]

ヒトES細胞/iPS細胞の培地交換回数を減らせるFGF-2徐放性ビーズ StemBeads FGF2

StemBeads FGF2は,培地に添加するだけで FGF-2(basic FGF,bFGF,FGF-b)を約3日間安定的に供給し続けることができるFDA認可の生分解性徐放性ビーズです。培地交換の手間やコストを節約でき,また幹細胞培養中の形態や未分化能の維持に効果があります。

本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。

幹細胞や神経細胞の培養に最適なEGF徐放性ビーズや,多能性幹細胞の培養やがん細胞の細胞死誘導に最適なActivin-A徐放性ビーズもあります。


StemBeadsの特長アニメーション

StemBeadsのバイアル

StemBeadsのバイアル


MEMO

幹細胞培養におけるFGF-2の添加


ヒトES細胞/iPS細胞の培養では,未分化能維持のため,培地にFGF-2を添加します。血清培地,無血清培地に関わらず,FGF-2添加のために培地交換を毎日行う必要があり,研究者にとっては大きな負担となっていました。本製品は,一定量のFGF-2を3日間安定して培地中に供給することができる,画期的な培地添加物です。

培地交換回数を減らせるFGF-2徐放性ビーズ StemBeads FGF2 培地交換回数を減らせるFGF-2徐放性ビーズ StemBeads FGF2

特長

  • ヒトES細胞/iPS細胞の培地交換の頻度を67%減少させることができます。金曜日に培地交換を行えば,土曜日,日曜日の培地交換は不要です。
  • 組換え体ヒト完全長FGF-2(産生:E. coli)が徐放されます
  • 培地1 ml当たり,StemBeads FGF2を8μl添加して使用します*
  • 現在使用している培地および培養条件を変える必要はありません。
  • StemBeads FGF2を添加した培地では,培地中のFGF2の濃度が一定に保たれるため,幹細胞の形態をより安定に維持でき,また分化を阻止できます。
  • StemBeads直径:15±2μm

* StemBeads FGF2は,放出されるFGF2が培地中で10 ng/mlになるよう調製されています。FGF2の濃度を上げる際は,培地に添加するStemBeads FGF2の量を多くして下さい。

使用例

形態と多能性の維持

StemBeads FGF2の使用によりhPSCの形態と多能性は長期間培養で維持されている。

StemBeads FGF2を添加した培地で3ヶ月以上培養したhPSCは,典型的なhPSCの形態を示している(A)。FACs解析により,分化マーカーであるSSEA-1の発現が無くても,多能性マーカーであるSSEA-4, Tra-1-60は発現している(B)。

FGF2濃度の維持

StemBeads FGF2の使用によるFGF2濃度の維持

hESC培養における通常の培地交換ではFGF2の濃度は変化するが(左上図),StemBeads FGF2を添加した場合は3日間経過した後もFGF-2の濃度が一定に保たれていることが分かる(右上図)。
培養中のStemBeads FGF2の直径は平均14.5μm(左右下図 矢印)スケールバー:100μm。

培地交換回数を減らせるFGF-2徐放性ビーズ StemBeads FGF2

時間経過によるFGF-2の濃度変化

ヒトES細胞(hESC:左)またはマウス神経幹細胞(mNSC:右)を,StemBeads FGF2または可溶性FGF-2を添加して培養し,培地中のFGF-2量の変化を調べた。本製品(青)では,培養72時間経過した後もFGF-2の濃度が一定に保たれていることが分かる。

培地交換回数を減らせるFGF-2徐放性ビーズ StemBeads FGF2

本製品を用いて培養したヒトES細胞(hESC)における未分化マーカー,核型,コロニー形態解析

本製品を添加した培地を用いて3日に一度の培地交換によりMEFフィーダー細胞上で1か月培養したhESC(赤)と,可溶性FGF-2を添加した培地で培養した細胞(青)をフローサイトメトリーにより解析したところ,両者はほぼ類似したマーカー発現プロファイルを示した。しかし,qRT-PCR解析の結果,本製品を使用した細胞ではNANOGの発現が上昇し,分化マーカーSOX17やBrachyuryの発現は減少した。播種前のhESCと,本製品または可溶性FGF-2で1か月培養したhESCの核型を比較した結果,異常は見られなかった。免疫染色の結果では,本製品を用いて培養したhESCではコロニーの形態や多能性マーカーOCT4,NANOGの発現が,可溶性FGF-2で培養したhESCと類似していた。

培地交換回数を減らせるFGF-2徐放性ビーズ StemBeads FGF2

本製品を用いて培養したマウス神経幹細胞(mNSC)の未分化状態の確認

マウス神経幹細胞を本製品または可溶性FGF-2を添加した培地で1週間培養し,未分化マーカーと分化マーカーの発現を調べた。本製品で培養したマウス神経幹細胞は,未分化状態が維持されていることが分かる。

マーカー発現比較 マーカー発現比較

FGF-2を用いて培養したヒトES細胞(hESC)のマーカー発現比較

StemBeads FGF2を添加した培地で培養した細胞(赤)と,FGF-2を連日添加した培地で培養した細胞(青)をフローサイトメトリーにより解析した。mTeSR (Stem Cell Technologies)とMatrigel (Corning社)を用いて一週間に二度の培地交換によりhESCを11週間培養した。
両者はほぼ類似した多能性マーカー発現を示したが,分化マーカーSSEA1の発現は低かった。免疫染色の結果では,本製品を用いて培養したhESCにおいて,コロニーの形態や多能性マーカーNANOG,Tra-1-60, SSEA4の発現が見られた。本製品で培養したhESCの核型には異常は見られなかった。

hESCの増殖数(hESC)の比較

本製品を用いて培養したヒトES細胞(hESC)の増殖数の比較

StemBeads FGF2を添加した培地で培養した細胞数(青)と,FGF-2を連日添加した培地で培養した細胞数(赤)を比較した。mTeSR (Stem Cell Technologies)とMatrigel (Corning社)を用いて一週間に二度の培地交換によりhESCを11週間培養した。
StemBeads FGF2を用いて培養したhESC数は,FGF-2で連日処理したhESC数を上回り,外胚葉(左図),中胚葉(中央図),内胚葉(右図)の3系統へと分化した。

使用文献

FAQ

StemBeads FGF2についてFAQはこちら。

価格

[在庫・価格 : 2017年09月26日 16時50分 現在]
メーカー 商品コード 商品名 包装 価格 在庫 リスト
SCUステムカルチャー
StemCulture Inc.

データシート

SB500

StemBeads FGF2

3ml

\56,000
(未発注)
追加
[在庫・価格 : 2017年09月26日 16時50分 現在]
メーカー 商品コード 商品名 包装 価格 在庫 リスト
SCUステムカルチャー
StemCulture Inc.

SB500

StemBeads FGF2

3ml

\56,000
(未発注)
追加
説明文

培地に添加するだけで, 一定量のFGF-2を安定的に供給し続けることができる徐放性ビーズ。ヒトES細胞/iPS細胞やマウス神経幹細胞などの培養に使用できる。

保存条件4℃法規制等
Genbank NoGene Accession NoProtein Accession No
掲載カタログ

ニュース2016年3月1日号 p.23
ニュース 2015年3月1日号 p.10

製品記事

StemBeads FGF2
StemCulture社 StemBeadsに関するFAQ

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[在庫・価格 : 2017年09月26日 16時50分 現在]
メーカー 商品コード 商品名 包装 価格 在庫 リスト
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StemCulture Inc.

データシート

SB001

StemBeads Blank15

3ml

\27,000
(未発注)
追加
[在庫・価格 : 2017年09月26日 16時50分 現在]
メーカー 商品コード 商品名 包装 価格 在庫 リスト
SCUステムカルチャー
StemCulture Inc.

SB001

StemBeads Blank15

3ml

\27,000
(未発注)
追加
説明文

徐放性ビーズStemBeadsのコントロール品。タンパク質を含まない。

保存条件4℃法規制等
Genbank NoGene Accession NoProtein Accession No
掲載カタログ

製品記事

StemBeads FGF2
StemBeads EGF
StemBeads Activin-A

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