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StressMarq Biosciences Inc.
ストレスマークバイオサイエンス / StressMarq Biosciences Inc.
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[掲載日情報:2017/04/11 現在]

活性型のヒトαシヌクレイン組換え体タンパク質 α Synuclein, Human, Recombinant Protein, Active

StressMarq Biosciences社のヒトαシヌクレイン組換え体タンパク質をご紹介します。単量体(Monomer),凝集体(Aggregate),活性型単量体(Active Monomer),活性型凝集体(Active Aggregate)の4種類があります。アルツハイマー病やパーキンソン病といった神経変性疾患の研究に有用です。

本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。

ヒトαシヌクレイン組換え体タンパク質

MEMO

α Synucleinとは


αシヌクレイン(α Synuclein,SNCA)は,主に脳内に発現するタンパク質で,シナプス前末端に集中して存在します。嗅球,海馬,線条体および視床のミトコンドリアで高度に発現しています。αシヌクレインはチューブリンと相互作用することが示されており,潜在的な微小管関連タンパク質として機能している可能性があります。
認知機能の正常な発達のために必須であることも明らかにされており,αシヌクレインの不活性化は空間学習や作業記憶の障害につながる可能性があります。 αシヌクレイン原線維凝集体は,アルツハイマー病アミロイド斑の主要な非アミロイドβ成分として存在し,パーキンソン病ではレビー小体の主要成分として存在します。

参考文献

Genetics Home Reference: SNCA., US National Library of Medicine, (2013).
Zhang L., et al., Brain Res., 1244, 40~52 (2008).
Alim M.A., et al., J Biol Chem., 277(3), 2112~2117 (2002).
Kokhan V.S., et al., Behav. Brain Res., 231(1), 226~230 (2012).
Spillantini M.G., et al., Nature., 388(6645), 839~840 (1997).
Mezey E., et al., Nat Med., 4(7), 755~757 (1998).


α Synuclein Human Recombinant Proteinの特長

品名 α Synuclein Human Recombinant Protein, Monomer <単量体> α Synuclein Human Recombinant Protein, Aggregate <凝集体> α Synuclein Human Recombinant Protein, Monomer, Avtive <活性型単量体> α Synuclein Human Recombinant Protein, Aggregate, Active <活性型凝集体>
商品コード SPR-316 SPR-317 SPR-321 SPR-322
動物種 ヒト
産生 E. coli
タグ なし
配列 全長
凝集体を形成する活性
濃度 1.1 mg/ml 2.1 mg/ml
純度 92%(SDS-PAGE) >95%(SDS-PAGE)
適用 ウエスタンブロッティング,SDS-PAGE,in vivo assay,iin vitro assay

100μMのαシヌクレイン組換え体タンパク質単量体活性型(#SPR-321)と10 nMのαシヌクレイン組換え体タンパク質凝集体活性型(#SPR-322)を,25μMのチオフラビンT(PBS pH7.4,100μl)中に入れ,600 rpmで振とうさせながら37℃条件下で24時間インキュベートした。その後,Molecular Devices Gemini XPSマイクロプレートリーダーを用いて蛍光を測定した(励起:450 nm,蛍光:485 nm)。結果,生じた蛍光強度は13,000 RFU(Relative Fluorescent Units)であった。

α Synuclein Human Recombinant Proteinの使用例

ヒトαシヌクレイン組換え体タンパク質の使用例

αシヌクレイン組換え体タンパク質単量体活性型(#SPR-321)のSDS-PAGE像
レーン1:分子量ラダー(MW)
レーン2:BSA(2.5μg)
レーン3:BSA(5μg)
レーン4:αシヌクレイン組換え体タンパク質単量体活性型(#SPR-321)(5μg)
レーン5:αシヌクレイン組換え体タンパク質単量体活性型(#SPR-321)(2.5μg)

ヒト αシヌクレイン組換え体タンパク質の使用例

ラット初代海馬ニューロンにおけるレビー小体の形成
A,B,C:αシヌクレイン組換え体タンパク質凝集体(#SPR-317)で処理,レビー小体は形成されず。
D,E,F:αシヌクレイン組換え体タンパク質凝集体活性型(#SPR-322)で処理,レビー小体が形成された。

試料:Sprague-Dawleyラットの初代海馬ニューロン
固定:4%パラホルムアルデヒド(PFA)
一次抗体:マウス抗pSer129抗体(希釈倍率1:1000)を4℃で24時間インキュベート
二次抗体:FITC標識ヤギ抗マウス抗体(緑色)(希釈倍率1:700)を室温で1時間インキュベート
対比染色:Hoechst核染色(青色)

ヒト αシヌクレイン組換え体タンパク質の使用例

αシヌクレイン凝集体の形成
チオフラビンT(Thioflavin T)は,αシヌクレイン凝集体のようなβシートに富む構造に結合する蛍光色素(励起波長450 nm/蛍光波長485 nm)。そのような構造体に結合すると,蛍光強度が増加する。
α シヌクレイン活性型凝集体(#SPR-322B)存在下で,α ヌクレイン活性型単量体(#SPR-321B)のプールから新たな α シヌクレイン凝集体が形成されたことが分かる(最上の青色の曲線)。

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